Changes in the expression of the potassium channels TASK1, TASK3 and TRESK in a rat model of oral squamous cell carcinoma and their relation to malignancy.

OBJECTIVES: Potassium channels have been proposed to promote cancer cell proliferation and metastases. Thus, we investigated the expression pattern of three 2-pore domain potassium channels (K2Ps) TASK1, TASK3 and TRESK in advanced oral squamous cell carcinoma (OSCC), the commonest oral malignancy. DESIGN: We used 4-nitroquinoline-1-oxide (4-NQO) to induce high grade OSCC in male adult rats. We then used immunohistochemistry and Western blotting to study the distribution and expression pattern of TASK1, TASK3 and TRESK in normal versus cancerous tissue. We also examined the expression of ß-tubulin III (ß-tub3), a marker associated with resistance to taxane-based chemotherapy and poor patient prognosis, and its correlation with the K2Ps. Finally, we studied the expression of TASK1, TASK3 and TRESK in human samples of SCC of oral origin. RESULTS: We found that TASK3 was significantly up-regulated whereas TASK1 and TRESK were both significantly down-regulated in advanced, poorly differentiated OSCC. Both, rat and human SCC showed a significant increase in the expression of ß-tub3. Interestingly, the expression of the latter correlated positively and significantly with TASK3 and TRESK but not TASK1 in rat OSCC. Our initial results showed a similar pattern of up and down regulation and correlation with ß-tub3 for these three K2Ps in human SCC. CONCLUSIONS: The changes in expression and the co-localization with a marker of resistance to taxanes like ß-tub3 turn TASK1, TASK3 and TRESK into potentially new prognostic tools and possibly new therapeutic targets for OSCC.

Glycosidases Interact Selectively With Mannose-6-Phosphate Receptors of Bull Spermatozoa.

Glycosidases may play a role in sperm maturation during epididymal transit. In this work, we describe the interaction of these enzymes with bull spermatozoa. We found that ß-galactosidase associated to spermatozoa can be released under low ionic strength conditions, whereas the interaction of N-acetyl-ß-D-glucosaminidase and ß-glucuronidase with spermatozoa appeared to be stronger. On the other hand, α-mannosidase and α-fucosidase cannot be removed from the gametes. In addition, part of N-acetyl-ß-D-glucosaminidase, ß-galactosidase, and ß-glucuronidase can also be released by mannose-6-phosphate. Taking into account these data, we explored the presence of cation-independent- and cation-dependent-mannose-6-phosphate receptors in the spermatozoa and found that cation-independent mannose-6-phosphate receptor is highly expressed in bull spermatozoa and cation-dependent-mannose-6-phosphate receptor is expressed at a lesser extent. In addition, by immunofluorescence, we observed that cation-independent-mannose-6-phosphate receptor is mostly located at the acrosomal zone, whereas cation-dependent-mannose-6-phosphate receptor presents a different distribution pattern on spermatozoa during the epididymal transit. N-acetyl-ß-D-glucosaminidase and ß-glucuronidase isolated from epididymal fluid interacted mostly with cation-independent-mannose-6-phosphate receptor, while ß-galactosidase was recognized by both receptors. We concluded that glycosidases might play different roles in bull spermatozoa and that mannos-6-phosphate receptors may act as recruiters of some enzymes. J. Cell. Biochem. 117: 2464-2472, 2016. © 2016 Wiley Periodicals, Inc.

Dissociation of the X chromosome from the synaptonemal complex in the XY body of the rodent Galea musteloides.

The XY body from spermatocytes of the rodent Galea musteloides shows progressive changes of the synaptonemal complex (SC) axes and the X-chromatin during pachynema. There is a gross thickening of the X-axis and the formation of a large X chromosome loop at mid and late pachytene stages. The SC proteins synaptonemal complex protein 3 (SYCP3), synaptonemal complex protein 1, and synaptonemal complex central element protein 3 and the proteins breast cancer 1, MutL homolog 1 (MLH1), and radiation-repair 51 (related to meiotic processes), the cohesin structural maintenance of chromosome 3, the centromeric protein (with CREST antibody), and the silenced chromatin (with phosphorylated (139ph) H2A histone family, member X (γ-H2AX) antibody) were analyzed in this XY body. The thick X-axis, including the interstitial loop, becomes formed by four to six laminae showing a cross-striation with a periodicity of about 20 nm. The whole length of the gross X-axis shows no significant changes during pachynema, but the interstitial chromatin of the X chromosome and the X centromere are included in the large loop, and it becomes separated from the SC. A conventional SC formed by the Y-axis, a central region and a thin lateral element originally corresponding to the X-axis, remains undisturbed up to the end of pachynema. A single MLH1 focus develops either at the distal or the proximal region of the loop end attached to the conventional SC. The chromatin surrounding the thickened axis is labeled with γ-H2AX. It is shown that most of the SYCP3 protein associated with the X chromosome loop is not involved in the SC maintenance, but it is located with the cohesin axis separated from the SC proper.

Variation in Langerhans cell number and morphology between the upper and lower regions of the human esophageal epithelium.

Langerhans cells (LCs) are dendritic components of stratified epithelia, presenting antigens to other cells of the immune system that play a crucial role in local defense. The paucity of information about their significance in the esophageal mucosa was addressed by studying their distribution and morphology in this particular location. LCs were identified by immunohistochemical detection of CD1a, a cell-specific marker, using a monoclonal antibody, as well as by electron microscopic identification of characteristic Birbeck granules, among other typical morphological features. Cell counts carried out at 25 and 35 cm distal to the dental arch demonstrated significant differences in number and size between the two locations. The upper region contained 10.4 +/- 0.8 cells (mean +/- SEM) vs. 18.4 +/- 1.4 cells in the lower region. Also, cells in the lower region were larger and appeared to have longer dendritic processes. To our knowledge this is the first report of regional differences in number and morphology of LCs in human esophageal mucosa.

Spermatogenesis and blood-testis barrier in rats after long-term Vitamin A deprivation.

It has been established that experimental avitaminosis A in rats results in a 'Sertoli cell-only situation' after about 10 weeks, and that replacing the vitamin immediately reinitiates spermatogenesis. The present study deals with testicular recovery after prolonged deprivation (up to 19 weeks). The Sertoli cell-only situation reached under this condition was thought to be refractory to Vitamin A replacement. However, spermatogenesis did reinitiate about 11 weeks after vitamin restoration, although in an atypical manner. The blood-testis barrier, normally assembled when spermatocytes reaches the zygotene stage, remained under this condition permeable to the lanthanum intercellular tracer. Concomitantly, primary spermatocytes normally found in the adluminal compartment isolated by the barrier (zygotene onward) became massively apoptotic. All the tubules containing early spermatocytes (preleptotene or leptotene cells), normally found in the basal compartment, exhibited normal features with no signs of degeneration. Based on these results, a possible relationship between blood-testis barrier assembly and spermatocyte differentiation is proposed.

The blood-testis barrier in lizards during the annual spermatogenic cycle

La barrera hemato-testicular, primero descripta en los mamíferos, ha sido recientemente demostrada en la mayoría de los vertebrados y en muchos invertebrados. Nosotros hemos utilizado trazadores electrónicamente densos (hidróxido de lantano) y técnicas de criofractura para estudiar las características morfológicas y de permeabilidad de la barrera hemato-testicular en lagartos que muestran ciclos espermatogénicos anuales (Liolaemus bibroni, ruibali y elongatus y Phymaturus palluma). Durante la actividad de espermatogénesis completa la barera hemato-testicular aisla a todas las células germinales, desde la formación de los complejos sinaptonémicos (espermatocitos cigoténicos), en el compartimiento adluminal del epitelio seminífero. Las características especializaciones de uniones interstolianas, equivalente morfológico de la barrera de permeabilidad, desorganizan durante los períodos estacionales de involución de células germinales concomitantemente con la libre percolación de hidróxido de lantano dentro del compartimiento adluminal del epitelio seminífero. La formación y desorganización ciclica de la barrera hemato-testicular en lagartos refuerza la hipótesis de un control local de las células germinales sobre las especialziaciones de uniones intersertorianas

The blood-testis barrier in lizards during the annual spermatogenic cycle

La barrera hemato-testicular, primero descripta en los mamíferos, ha sido recientemente demostrada en la mayoría de los vertebrados y en muchos invertebrados. Nosotros hemos utilizado trazadores electrónicamente densos (hidróxido de lantano) y técnicas de criofractura para estudiar las características morfológicas y de permeabilidad de la barrera hemato-testicular en lagartos que muestran ciclos espermatogénicos anuales (Liolaemus bibroni, ruibali y elongatus y Phymaturus palluma). Durante la actividad de espermatogénesis completa la barera hemato-testicular aisla a todas las células germinales, desde la formación de los complejos sinaptonémicos (espermatocitos cigoténicos), en el compartimiento adluminal del epitelio seminífero. Las características especializaciones de uniones interstolianas, equivalente morfológico de la barrera de permeabilidad, desorganizan durante los períodos estacionales de involución de células germinales concomitantemente con la libre percolación de hidróxido de lantano dentro del compartimiento adluminal del epitelio seminífero. La formación y desorganización ciclica de la barrera hemato-testicular en lagartos refuerza la hipótesis de un control local de las células germinales sobre las especialziaciones de uniones intersertorianas (AU)

Plasma membrane changes during epididymal transit in the guinea pig spermatozoa

El presente trabajo explora en un estudio comparado los cambios que ocurrem en la membrana plasmática (MP) de espermatozoides extraídos del caput (inmaduros) comparados con los extraídos de la región caudal del epidídimo (maduros) mediante técnicas convencionales de réplicas por criofractura, TEM, SEM y morfometría. Al final del tránsito epididimario la MP del segmento principal del acrosoma adquiere una trama hexagonal. El segmento ecuatorial y su borde serrado no muestran variaciones significativas. Otro importante cambio que ocurre también al final del tránsito epididimario es el aumento de la concentración de partículas intramembranosas en la región postacrosomal. El cuello del espermatozoide maduro se adelgaza probablemente debido a la migración de la gota citoplasmática. Esta gota presenta en la fase P de la mmembrana plasmática, hileras de partículas pequeñas que en ocasiones foram conglomerados densos. La MP de la pieza media también contiene particulas intramembranosas en al fase P que aparentemente están mejor el annulus. Se presume que estas dos zonas tienen de común la fusión de la mmembrana plasmática con las estructuras subyacentes, envoltura nuclear y anillo de Jensen respectivamente. La MP de la pieza principal contiene conglomerados de grandes partículas de forma rectangular y de función desconocida que junto al "zipper" no cambian durante el transito epididimario

Plasma membrane changes during epididymal transit in the guinea pig spermatozoa

El presente trabajo explora en un estudio comparado los cambios que ocurrem en la membrana plasmática (MP) de espermatozoides extraídos del caput (inmaduros) comparados con los extraídos de la región caudal del epidídimo (maduros) mediante técnicas convencionales de réplicas por criofractura, TEM, SEM y morfometría. Al final del tránsito epididimario la MP del segmento principal del acrosoma adquiere una trama hexagonal. El segmento ecuatorial y su borde serrado no muestran variaciones significativas. Otro importante cambio que ocurre también al final del tránsito epididimario es el aumento de la concentración de partículas intramembranosas en la región postacrosomal. El cuello del espermatozoide maduro se adelgaza probablemente debido a la migración de la gota citoplasmática. Esta gota presenta en la fase P de la mmembrana plasmática, hileras de partículas pequeñas que en ocasiones foram conglomerados densos. La MP de la pieza media también contiene particulas intramembranosas en al fase P que aparentemente están mejor el annulus. Se presume que estas dos zonas tienen de común la fusión de la mmembrana plasmática con las estructuras subyacentes, envoltura nuclear y anillo de Jensen respectivamente. La MP de la pieza principal contiene conglomerados de grandes partículas de forma rectangular y de función desconocida que junto al "zipper" no cambian durante el transito epididimario (AU)

Effect of ADH on the toad efferent ducts

La ADH produce la reabsorción de fluidos en el aparato renal y en el tracto reproductor masculino de los mamíferos. Los conductos eferentes tienen origen mesonéfrico y están relacionados con ambos sistemas. Se estudió el efecto de la ADH, sobre los conductos eferentes del sapo y los cambios ultraestructurales. Las áreas citoplásmicas y nucleares de las células epiteliales aumentaron. Los núcleos se hicieron más claros, con disminución de la heterocromatina y profundos pliegues de sus envolturas. Es evidente un aumento del número de vesículas citoplásmicas, muchas de las cuales se abren a los espacios intercelulares y están asociadas con microfilamentos y microtúbulos. Estos hallazgos podrían indicar un aumento en el transporte de agua y sodio. Existe un probable efecto directo de la ADH en los conductos eferentes del sapo

Effect of ADH on the toad efferent ducts

La ADH produce la reabsorción de fluidos en el aparato renal y en el tracto reproductor masculino de los mamíferos. Los conductos eferentes tienen origen mesonéfrico y están relacionados con ambos sistemas. Se estudió el efecto de la ADH, sobre los conductos eferentes del sapo y los cambios ultraestructurales. Las áreas citoplásmicas y nucleares de las células epiteliales aumentaron. Los núcleos se hicieron más claros, con disminución de la heterocromatina y profundos pliegues de sus envolturas. Es evidente un aumento del número de vesículas citoplásmicas, muchas de las cuales se abren a los espacios intercelulares y están asociadas con microfilamentos y microtúbulos. Estos hallazgos podrían indicar un aumento en el transporte de agua y sodio. Existe un probable efecto directo de la ADH en los conductos eferentes del sapo (AU)