RESUMO
Carnivore semen cryopreservation procedures started with semen washing and centrifuging in culture media for seminal plasma removal and microorganisms elimination. The objective of this study was to perform coatis semen cryopreservation comparing the effects between two extenders Hams F-10 and M199 for washing and centrifugation before cryopreservation using Dilutris medium. Semen samples (n = 36) were collected by electroejaculation from six adult male coatis (Nasua nasua) between May and October of 2008 at the Universidade Federal de Mato Grosso Zoo. Sperm total motility (%), progressive sperm motility (0-5), plasma membrane integrity spermatozoa rates (%), and acrosome integrity (%) were analyzed. These fresh semen samples were divided in two fractions, diluted in 1 ml of Hams F-10 (Hams F-10, Nutricel S.A., Brazil) or M199 (M199, Nutricel S.A., Brazil) and centrifuged at 300 g for 10 min. The supernatant was discarded and pellets resuspended in 1 ml of Dilutris (Dilutris, Minitube®, Brazil), stored at 5ºC for 3 hours, transferred to 0.25 ml straws, placed in liquid nitrogen vapor for 20 min, and immersed in liquid nitrogen. The means/SD for fresh semen and cryopreserved semen using Hams F-10/Dilutris and M199/Dilutris were, respectively: 84.28 ± 11.57, 45.38 ± 27.26, and 44.61 ± 25.03 for total motility; 3.64 ± 1.44, 2.15 ± 1.14, and 2.07 ± 1.03 for progressive sperm mo
Os procedimentos de criopreservação do sêmen em carnívoros devem ser iniciados após a lavagem e centrifugação em meios de cultura para retirada do plasma seminal e eliminação de microrganismos. O objetivo deste estudo foi realizar a criopreservação do sêmen de quatis comparando os efeitos entre dois extensores Hams F-10 e M199 para lavagem e centrifugação do sêmen antes do congelamento com o meio Dilutris. Amostras de sêmen (n = 36) foram coletadas por eletroejaculação em seis quatis (Nasua nasua) machos adultos entre maio e outubro de 2008, no Zoológico da Universidade Federal de Mato Grosso. Motilidade total (%), motilidade espermática progressiva (0-5), integridade da membrana plasmática (%) e integridade do acrossoma (%) foram analisados. Amostras de sêmen a fresco foram divididas em duas frações, diluídas em 1 mL de Hams F-10 (Hams F-10, Nutricel S.A., Brasil) ou M199 (M199, Nutricel S.A., Brazil) e centrifugado a 300 g por 10 min. O sobrenadante foi descartado e pellets ressuspendidos em 1 mL de Dilutris (Dilutris, Minitube®, Brasil), armazenados a 5ºC durante 3 horas, transferidos para palhetas de 0,25 mL, colocadas em vapor de nitrogênio líquido por 20 min e imersos em nitrogênio líquido. Os resultados para sêmen a fresco e sêmen congelado utilizando Hams F-10/Dilutris e M199/Dilutris foram, respectivamente: 84,28 ± 11,57, 45,38 ± 27,26 e 44,61 ± 25,03 para motilida
RESUMO
Assisted reproductive technologies can be viewed as one potential approach for safeguarding wild species. In this study were evaluated the fertility of captivity male jaguar (Panthera onca) and different capacitation media using the golden hamster zona free oocyte penetration assay. We used frozen/thawed semen from 3 animals housed at Bosque dos Jequitibás, Campinas/SP, to test the Percoll gradient, Swim-up and Swim-up + 1 h incubation (5% CO2 / 38C), considering as penetration the spermatozoa head descondensation visualized within the oocyte. The results rate was greater for Percoll (26.5%) as compared to Swim-up (8.1%) (X2 = 19.93; p 0.05). It was not observed penetration with Swim-up + 1 h incubation (5% CO2 / 38C). It is concluded that Percoll and Swim-up are efficient methods to perform the golden hamster zona free oocyte penetration assay using frozen/thawed jaguar (Panthera onca) spermatozoa. The low rate of penetration could be related to the high rate of morphological abnormal spermatozoa observed in the samples examined.
A aplicação de técnicas de reprodução assistida em espécies selvagens ameaçadas de extinção surge como método alternativo com o intuito de minimizar a diminuição da variabilidade genética das populações. Com o objetivo de determinar a fertilidade de onças pintadas (Panthera onca) mantidas em cativeiro e avaliar a eficácia dos meios de capacitação espermática, foi realizado o ensaio de penetração em oócitos de hamster livres de zona pelúcida. Para a realização do experimento, foi utilizado sêmen congelado de 3 animais do Bosque dos Jequitibás, Campinas/SP. Foram testadas 3 técnicas: Percoll, Swim-up e Swim-up + 1 hora em estufa de CO2 a 38ºC, considerando como oócitos penetrados aqueles que apresentaram no seu interior a descondensação da cabeça do espermatozóide. A média de penetrações da técnica Percoll (26,5%) foi significativamente maior comparada à técnica Swim-up (8,1%), sendo que não houve penetração utilizando a técnica Swim-up + 1 hora em estufa de CO2 a 38C (x² = 19,93; p 0,05). Analisando os resultados, concluímos que as técnicas Percoll e Swim-up foram eficientes para a realização do ensaio de penetração, comprovando a capacidade de penetração dos espermatozóides de onças pintadas (Panthera onca), pós-descongelamento, em oócitos de hamster livres de zona pelúcida. Porém, houve uma baixa porcentagem de penetração, a qual pode estar associada ao elevado índice de