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Methods Mol Biol ; 1737: 341-350, 2018.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-29484602

RESUMO

Bacterial small RNA molecules (sRNAs) are increasingly recognized as central regulators of bacterial stress responses and pathogenesis. In many cases, RNA-binding proteins are critical for the stability and function of sRNAs. Previous studies have adopted strategies to genetically tag an sRNA of interest, allowing isolation of RNA-protein complexes from cells. Here we present a sequence-specific affinity purification protocol that requires no prior genetic manipulation of bacterial cells, allowing isolation of RNA-binding proteins bound to native RNA molecules.


Assuntos
Proteínas de Bactérias/metabolismo , Cromatografia de Afinidade/métodos , Pseudomonas aeruginosa/metabolismo , RNA Bacteriano/metabolismo , Pequeno RNA não Traduzido/metabolismo , Proteínas de Ligação a RNA/metabolismo , Proteínas de Bactérias/genética , Proteínas de Bactérias/isolamento & purificação , Sítios de Ligação , Reagentes de Ligações Cruzadas/metabolismo , Ligação Proteica , Pseudomonas aeruginosa/genética , Pseudomonas aeruginosa/crescimento & desenvolvimento , RNA Bacteriano/genética , Pequeno RNA não Traduzido/genética , Proteínas de Ligação a RNA/genética , Proteínas de Ligação a RNA/isolamento & purificação , Raios Ultravioleta
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