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Virus Res ; 244: 296-303, 2018 01 15.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-28456574

RESUMO

Epstein-Barr virus (EBV) infects more than 90% of the world's adult population. Once established, latent infection of nasopharyngeal epithelial cells with EBV is difficult to eradicate and might lead to the development of nasopharyngeal carcinoma (NPC) in a small subset of individuals. In this study we explored the anti-EBV potential of CRISPR/Cas9 targeting of EBV genome in infected NPC cells. We designed gRNAs to target different regions of the EBV genome and transfected them into C666-1 cells. The levels of EBV DNA in transfected cells were decreased by about 50%. The suppressive effect on EBV DNA load lasted for weeks but could not be further enhanced by re-transfection of gRNA. Suppression of EBV by CRISPR/Cas9 did not affect survival of C666-1 cells but sensitized them to chemotherapeutic killing by cisplatin and 5-fluorouracil. Our work provides the proof-of-principle for suppressing EBV DNA load with CRISPR/Cas9 and a potential new strategy to sensitize EBV-infected NPC cells to chemotherapy.


Assuntos
Proteínas de Bactérias/genética , Sistemas CRISPR-Cas , DNA Viral/genética , Endonucleases/genética , Edição de Genes/métodos , Genoma Viral , Herpesvirus Humano 4/genética , RNA Guia de Cinetoplastídeos/genética , Antineoplásicos/farmacologia , Proteínas de Bactérias/metabolismo , Proteína 9 Associada à CRISPR , Linhagem Celular Tumoral , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Cisplatino/farmacologia , Repetições Palindrômicas Curtas Agrupadas e Regularmente Espaçadas , DNA Viral/metabolismo , Endonucleases/metabolismo , Células Epiteliais/efeitos dos fármacos , Células Epiteliais/patologia , Células Epiteliais/virologia , Fluoruracila/farmacologia , Herpesvirus Humano 4/efeitos dos fármacos , Herpesvirus Humano 4/crescimento & desenvolvimento , Herpesvirus Humano 4/metabolismo , Humanos , Nasofaringe/efeitos dos fármacos , Nasofaringe/patologia , Nasofaringe/virologia , Plasmídeos/química , Plasmídeos/metabolismo , RNA Guia de Cinetoplastídeos/metabolismo , Carga Viral/efeitos dos fármacos , Latência Viral/genética , Replicação Viral
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