The effect of BCG vaccination on infection and antibody levels against SARS-CoV-2-The results of ProBCG: a multicenter randomized clinical trial in Brazil.

OBJECTIVES: Evatuate if Bacillus Calmette-Guérin (BCG) vaccine could be used as a tool against SARS-CoV-2 based on the concept of trained immunity. METHODS: A multicenter, double-blinded, randomized clinical trial recruited health care workers (HCWs) in Brazil. The incidence rates of COVID-19, clinical manifestations, absenteeism, and adverse events among HCWs receiving BCG vaccine (Moreau or Moscow strains) or placebo were compared. BCG vaccine-mediated immune response before and after implementing specific vaccines for COVID-19 (CoronaVac or COVISHIELD) was analyzed. Cox proportional hazard and linear mixed effect modeling were used. RESULTS: A total of 264 volunteers were included for analysis (BCG = 134 and placebo = 130). The placebo group presented a COVID-19 cumulative incidence of 0.75% vs 0.52% of BCG. The Moreau strain also presented a higher incidence rate (1.60% × 0.22%). BCG did not show a protective hazard ratio against COVID-19. In addition, the log (immunoglobulin G) level against SARS-CoV-2 presented a higher increase in the BCG group, whether or not participants had COVID-19, but also without statistical significance. CONCLUSION: Our results suggest that BCG has a tendency of protection against SARS-CoV-2 and higher immunoglobulin G levels than placebo. The clinical trial was registered at https://clinicaltrials.gov/ (NCT04659941).

Caracterização molecular e análise da expressão gênica da LaNTPDase-1 em Leishmania amazonensis / Molecular characterization and analysis of LaNTPDase-1 gene expression in Leishmania amazonensis

O presente trabalho trata de um estudo sobre as enzimas nucleotideo trifosfato difosfohidrolase de Leishmania (Leishmania) amazonensis (nucleoside triphosphate diphosphohydrolase - LaNTPDase), um dos principais agentes etiológicos da leishmaniose difusa no Brasil. O desenho experimental do estudo contempla uma abordagem estrutural in silico e uma abordagem experimental de expressão genica do gene codificante desta enzima nos promastigotas e amastigotas do parasito. No estudo foi elucidada a sequência nucleotídica codificante correspondente à NTPDase de L. amazonensis. A sequência obtida foi alinhada com NTPDases de outras espécies do gênero Leishmania. Com os ensaios foi possível propor que esta enzima pode estar ligada à membrana plasmática por um domínio transmembranar, sendo denominada NTPDase-1. A estrutura terciária da enzima foi proposta por modelagem por homologia, indicando importantes diferenças estruturais, especialmente na região de ligação aos nucleotídeos. Expressão heteróloga da enzima de L. amazonensis (rLaNTPDase-1) foi realizada indicando uma proteína de 45 kDa em condições desnaturantes.

Em paralelo, avaliamos a modulação da expressão gênica da LaNTPDase-1 entre dois isolados de L. amazonensis (IFLA/BR/1967/PH8 e MHOM/BR/77/LTB0016), com distintos percentuais de infectividade em macrófagos de camundongos BALB/c cepa PH8 (31,0%±6,3) e cepa LTB0016 (18,2%± 5,3) e perfis diferentes das fases logarítmica e estacionarias de crescimento in vitro dos promastigotas. Observamos que durante a curva de crescimento, somente a cepa PH8 apresentou um aumento na expressão do gene no quarto dia de cultivo (4,3±2), quando comparado com a LTB0016. A expressão da LaNTPDase-1 mostrou-se aumentada nos amastigotas, quando comparada com os promastigotas da cepa PH8 (>5,2±0,8) e da cepa LTB0016 (>0,8±0,5). Os resultados aqui apresentados indicam que o parasito L. amazonensis expressa o gene correspondente a enzima NTPDase-1, sendo que este gene é mais ix expresso nos amastigotas do que nos promastigotas. Estes resultados reforçam a importância desta enzima na fase do parasito quando no hospedeiro vertebrado. (AU)