Inibição do crescimento in vitro de fitopatógenos sob diferentes concentrações de extratos de plantas medicinais / In vitro inhibition of fungal plant pathogens by different concentrations of medicinal plants extracts

Com o objetivo de avaliar in vitro o efeito de diferentes concentrações de extratos vegetais sobre o crescimento de Cercospora kikuchii, Fusarium solani, Colletotrichum sp. e Phomopsis sp., foram conduzidos quatro bioensaios experimentais, no Laboratório de Fitopatologia da Universidade Federal da Grande Dourados. Foi adotado o delineamento inteiramente casualizado em arranjo fatorial 3 x 6, com 8 repetições para cada bioensaio. Foram utilizados extratos aquosos de alho, canela e cravo-da-índia, nas concentrações de 0; 0,5; 1; 5; 10 e 20%. Para obtenção dos extratos foram coletadas 30 g do material vegetal e trituradas em 120 mL de água destilada. Os extratos foram filtrados em papel Wathman nº 1 e incorporados ao meio BDA, de modo a obter as concentrações desejadas. Posteriormente, a solução foi vertida em placas de Petri, onde foram transferidos discos de micélio do patógeno, de 0,3 cm de diâmetro. Em seguida, as placas foram incubadas a 25º C, com fotoperíodo de 12 horas. Foi analisado o crescimento micelial da colônia fúngica. Os resultados revelaram que o efeito do extrato aquoso de canela para todos os patógenos estudados, e do extrato de alho para F. solani, Colletotrichum sp. e Phomopsis sp. foi dependente das concentrações utilizadas, constatando-se maior atividade antifúngica com o aumento das concentrações. Verificou-se com o uso do extrato de cravo-da-índia maior eficácia no controle dos fitopatógenos testados, sendo observada supressão sobre o crescimento de Colletotrichum sp., Cercospora kikuchii, F. solani e de Phomopsis sp. a partir das concentrações de 7,4, 7,5, 8,9 e 7,0%, respectivamente. O extrato aquoso de alho, na concentração de 9,7%, apresentou efetivo controle apenas sobre C. kikuchii.

In order to evaluate the in vitro effect of different concentrations of plant extracts on the growth of Cercospora kikuchii, Fusarium solani, Colletotrichum sp. and Phomopsis sp., 4 bioassays experiments were conducted at the Plant Pathology Laboratory of the Federal University of Grande Dourados, Brazil. The experimental design was a completely randomized design in a 3 x 6 factorial arrangement, with 8 replicates for each bioassay. Aqueous extracts of garlic, cinnamon and clove were evaluated in concentrations of 0, 0.5, 1, 5, 10 and 20%. Extracts were obtained through maceration of 30 g of plant material in 120 mL of distilled water. The extracts were filtered in grade-1 Whatman paper and incorporated into PDA medium to obtain the desired concentrations. Subsequently, the solution was poured into Petri dishes, and then 3 mm-diameter-PDA plugs with pathogen mycelium were transferred to the center of the PDA + plant extract Petri dish. Plates were incubated at 25° C with a 12-h-day photoperiod. Fungal growth was performed daily by measuring the colony diameter. The results showed that the effect of aqueous extract of cinnamon for all pathogens studied, and garlic extract for F. solani, Colletotrichum sp. and Phomopsis sp., was dependent on the concentrations used, noting a higher antifungal activity with increased concentrations used. Clove extract presented the greatest effectiveness for the control of the plant pathogens tested, with observed suppression on the growth of Colletotrichum sp. C. kikuchii, F. solani and Phomopsis sp. at the concentrations 7.4, 7.5, 8.9 and 7.0%, respectively. The aqueous extract of garlic at a concentration of 9.7% presented effective control only for C. kikuchii.

INIBIÇÃO DO CRESCIMENTO IN VITRO DE FITOPATÓGENOS SOB DIFERENTES CONCENTRAÇÕES DE EXTRATOS DE PLANTAS MEDICINAIS

ABSTRACT In order to evaluate the in vitro effect of different concentrations of plant extracts on the growth of Cercospora kikuchii. Fusarium solani. Colletotrichum sp. and Phomopsis sp., 4 bioassays experiments were conducted at the Plant Pathology Laboratory of the Federal University of Grande Dourados, Brazil. The experimental design was a completely randomized design in a 3 x 6 factorial arrangement, with 8 replicates for each bioassay. Aqueous extracts of garlic, cinnamon and clove were evaluated in concentrations of 0, 0.5, 1, 5, 10 and 20%. Extracts were obtained through maceration of 30 g of plant material in 120 mL of distilled water. The extracts were filtered in grade-1 Whatman paper and incorporated into PDA medium to obtain the desired concentrations. Subsequently, the solution was poured into Petri dishes, and then 3 mm-diameter-PDA plugs with pathogen mycelium were transferred to the center of the PDA + plant extract Petri dish. Plates were incubated at 25° C with a 12-h-day photoperiod. Fungal growth was performed daily by measuring the colony diameter. The results showed that the effect of aqueous extract of cinnamon for all pathogens studied, and garlic extract for F. solani. Colletotrichum sp. and Phomopsis sp., was dependent on the concentrations used, noting a higher antifungal activity with increased concentrations used. Clove extract presented the greatest effectiveness for the control of the plant pathogens tested, with observed suppression on the growth of Colletotrichum sp. C. kikuchii. F. solani and Phomopsis sp. at the concentrations 7.4, 7.5, 8.9 and 7.0%, respectively. The aqueous extract of garlic at a concentration of 9.7% presented effective control only for C. kikuchii.

RESUMO Com o objetivo de avaliar in vitro o efeito de diferentes concentrações de extratos vegetais sobre o crescimento de Cercospora kikuchii. Fusarium solani. Colletotrichum sp. e Phomopsis sp., foram conduzidos quatro bioensaios experimentais, no Laboratório de Fitopatologia da Universidade Federal da Grande Dourados. Foi adotado o delineamento inteiramente casualizado em arranjo fatorial 3 x 6, com 8 repetições para cada bioensaio. Foram utilizados extratos aquosos de alho, canela e cravo-da-índia, nas concentrações de 0; 0,5; 1; 5; 10 e 20%. Para obtenção dos extratos foram coletadas 30 g do material vegetal e trituradas em 120 mL de água destilada. Os extratos foram filtrados em papel Wathman nº 1 e incorporados ao meio BDA, de modo a obter as concentrações desejadas. Posteriormente, a solução foi vertida em placas de Petri, onde foram transferidos discos de micélio do patógeno, de 0,3 cm de diâmetro. Em seguida, as placas foram incubadas a 25º C, com fotoperíodo de 12 horas. Foi analisado o crescimento micelial da colônia fúngica. Os resultados revelaram que o efeito do extrato aquoso de canela para todos os patógenos estudados, e do extrato de alho para F. solani. Colletotrichum sp. e Phomopsis sp. foi dependente das concentrações utilizadas, constatando-se maior atividade antifúngica com o aumento das concentrações. Verificou-se com o uso do extrato de cravo-da-índia maior eficácia no controle dos fitopatógenos testados, sendo observada supressão sobre o crescimento de Colletotrichum sp., Cercospora kikuchii, .. solani e de Phomopsis sp. a partir das concentrações de 7,4, 7,5, 8,9 e 7,0%, respectivamente. O extrato aquoso de alho, na concentração de 9,7%, apresentou efetivo controle apenas sobre C. kikuchii.

Influência de diferentes metodologias de esterilização sobre a atividade antifúngica de extratos aquosos de plantas medicinais / Influence of different sterilization methods on the antifungal activity of aqueous extracts of medicinal plants

Foram conduzidos no Laboratório de Fitopatologia da Universidade Federal da Grande Dourados três experimentos com o objetivo de avaliar in vitro a atividade antifúngica dos extratos aquosos de alho, canela e cravo-da-índia, submetidos a diferentes processos de desinfestação e/ou esterilização sobre o desenvolvimento de Fusarium solani. O delineamento experimental utilizado para cada ensaio foi inteiramente casualizado, com 5 tratamentos e 8 repetições. Utilizaram-se os extratos aquosos na concentração de 20 por cento, submetidos às metodologias de filtragem (FI), banho maria a 65°C (BM), autoclavagem a 100ºC (AT1), autoclavagem a 120ºC (AT2) e a testemunha (somente BDA). Posteriormente os extratos foram incorporados em meio BDA, acondicionados em placas de Petri, onde foram transferidos discos de micélio de F. solani medindo 0,3 cm de diâmetro. Após, as placas foram incubadas a 25ºC, com fotoperíodo de 12 horas. Os tratamentos foram analisados em relação ao crescimento micelial da colônia, a porcentagem de inibição e a taxa de crescimento de F. solani. Foi observado em todos os ensaios maior crescimento do fungo na testemunha, evidenciando o potencial antifúngico dos extratos. Foi observada influência da metodologia de esterilização sobre a eficiência dos extratos de alho e canela. Para o alho a FI proporcionou os melhores resultados, enquanto que para o extrato de canela não houve diferenças entre as metodologias FI, BM e AT1. As diferentes metodologias utilizadas não interferiram na eficiência do extrato aquoso de cravo-da-índia.

Three experiments were conducted in the Laboratory of Phytopathology of Federal University of Grande Dourados, Mato Grosso do Sul State, Brazil, to evaluate in vitro the antifungal activity of aqueous extracts of garlic, cinnamon and clove subjected to different processes of disinfection and/or sterilization against the development of Fusarium solani. The experimental design for each trial was completely randomized, with 5 treatments and 8 replicates. Aqueous extracts at a concentration of 20 percent were subjected to the methods of filtering (FI), water bath at 65ºC (WB), autoclaving at 100ºC (AT1), autoclaving at 120ºC (AT2) and control treatment (PDA alone). Subsequently, the extracts were incorporated into PDA medium, added to Petri dishes, to where F. solani mycelium discs of 0.3cm diameter were transferred. Then, the plates were incubated at 25ºC with 12-h photoperiod. The treatments were analyzed as to mycelial growth of the colony, percentage of inhibition and growth rate of F. solani. Increased fungal growth was observed for the control treatment, demonstrating the antifungal potential of the extracts. The sterilization method influenced the efficiency of garlic and cinnamon extracts. For garlic, FI led to the best results, whereas for cinnamon extract there were no differences among the methodologies FI, WB and AT1. The different methods used did not interfere with the efficiency of the aqueous extract of clove.