Integrated Microfluidic Device for Functional Secretory Immunophenotyping of Immune Cells.

Integrated platforms for automatic assessment of cellular functional secretory immunophenotyping could have a widespread use in the diagnosis, real-time monitoring, and therapy evaluation of several pathologies. We present a microfluidic platform with integrated biosensors and culture chambers to measure cytokine secretion from a consistent and uniform number of immune cells. The biosensor relies on a fluorescence sandwich immunoassay enabled by the mechanically induced trapping of molecular interactions method. The platform contains 32 cell culture chambers, each patterned with an array of 492 microwells, to capture and analyze both adherent and nonadherent immune cells. Multiple stimuli can be delivered to a set of culture chambers. Per chamber, we were able to capture consistently 1113 ± 191 of blood-derived monocytes and neutrophils and 348 ± 37 THP-1 monocytes. Good occupancy efficiencies of ∼70% with a uniformity of ∼90% across all of the culture chambers of the device were achieved. Furthermore, we demonstrate that up to 96% of cells remain viable for the first 48 h. The employment of epoxy-modified glass substrates and active mixing enhanced the biosensing performance compared to the use of bare glass and simple diffusion. Finally, we performed functional secretory analysis of interleukin-8 and tumor necrosis factor alpha from human neutrophils and monocytes, stimulated with various doses of lipopolysaccharide and phorbol 12-myristate 13-acetate-ionomycin, respectively. We foresee the employment of our microfluidic platform in the diagnosis of different pathologies where alterations in cytokine secretion patterns can be used as biomarkers.

Adición de glucomananos a dietas con baja proteína a base de sorgo-pasta de soya para cerdos en crecimiento y finalización / Addition of glucomannans to low-protein diets based on sorghum-soybean meal for growing and finishing pigs

Los cerdos en engorde alimentados con dietas sorgo-pasta de soya con baja proteína (DBP) presentan resultados productivos inconsistentes; en ocasiones, las variables productivas se mantienen, y en otras se deterioran. Además, siendo el sorgo el ingrediente en mayor cantidad, es probable que la dieta contenga mayor concentración de micotoxinas que en dietas estándar o en dietas formuladas con maíz. Por ello, se realizaron dos experimentos con cerdos en crecimiento y finalización, adicionando un secuestrante de micotoxinas (SECM) a dietas estándar y DBP para determinar su efecto en la respuesta productiva, características de la canal y urea en plasma. En el experimento de crecimiento se utilizaron 40 cerdos (machos castrados; 22,18 ± 0,82 kg) en un diseño de bloques completos al azar con arreglo factorial (2×4): dos niveles de proteína cruda (PC: 16; y 11,5%) y cuatro del SECM (0; 0,5; 1,0; 1,5 kg t-1), con cinco repeticiones por tratamiento. La reducción de PC disminuyó (P£0,05) la ganancia diaria de peso (GDP) y de carne magra (GCM), e incrementó (P£0,05) la conversión alimenticia (CA). En el experimento de finalización también se utilizaron 40 cerdos (machos castrados; 49,48 ± 1,10 kg). El diseño experimental fue similar al del experimento de crecimiento (14 y 9,5% PC; 0; 0,5; 1,0 y 1,5 kg t-1 SECM) y cinco repeticiones por tratamiento. La reducción de PC disminuyó (P£0,05) GDP, consumo de alimento (CAL) y GCM. En ambos experimentos, el SECM no mejoró las variables de respuesta en cerdos alimentados con DBP. Se concluye que la adición de SECM en DBP no mejora las variables productivas, pero mantiene las características de la canal, aunque reduce la GCM.

The growth performance of fattening pigs fed sorghum-soybean meal, low-protein diets (LPD) has been inconsistent; some times the productive variables do not change, but other times they are deteriorated. In addition, because the sorghum grain represents the main ingredient, it is likely that the diet has higher amounts of mycotoxins than standard diets or diets formulated with corn grain. So, two experiments were conducted with growing-finishing pigs to determine the effect of a mycotoxin sequestrant (MSEQ) added to standard or LPD on growth performance, carcass characteristics, and plasma urea nitrogen concentration. In the growing experiment, 40 growing (22.18 ± 0.82 kg) barrows were used in a randomized complete block design in a factorial (2×4) arrangement: two levels of crude protein (CP: 16 and 11.5%) and four levels of micotixins sequestrant (glucomannans; 0, 0.5, 1.0, 1.5 kg t-1), with five replicates per treatment. Lowering CP reduced (P£0.05) average daily gain (ADG) and fat free lean gain (FFLG), and increased (P£0,05) feed:gain ratio. In the finishing experiment, 40 finishing (49.48 ± 1.10 kg) barrows were used in a randomized complete block design in a factorial (2×4) arrangement: two levels of CP (14 and 9.5%) and four levels of micotoxins sequestrant (glucomannans; 0, 0.5, 1.0, 1.5 kg t-1), with five replicates per treatment. Diminishing CP reduced (P£0.05) ADG, average daily feed intake, and FFLG. The addition of glucomannans to low-protein diets did not affect growth performance in both experiments. It was concluded that adding glucomannans as mycotoxins sequestrant does not improve productive variables in pigs fed low-protein diets, but it produces similar carcass characteristics as in pigs fed standard diet, except the lower FFLG.

Manejo diagnóstico y seguimiento a largo plazo de 1.264 lesiones mamarias no palpables en ocho años / Diagnostic management and long-term follow-up of 1264 nonpalpable breast lesions over an 8-year period

Objetivo: Revisar nuestra experiencia en lesiones no palpables.Estudiar la evolución de nuestra unidad en el manejo de estas lesiones mediante biopsia quirúrgica o biopsia por punción dirigida.Comparar tamaños y estadios tumorales con otros publicados.Calcular sensibilidad, especificidad y eficacia del sistema y de los métodos de punción dirigida.Material y métodos: En ocho años abordamos en nuestro centro 1.264 lesiones, (18-83 años; media: 50,05 ñ 12,26). De ellas, 446 fueron manejadas exclusivamente mediante punción y seguimiento. Meses de seguimiento: 18-114 (media: 51,5 ñ 19,4). Las 818 restantes precisaron cirugía, como biopsia diagnóstica --588-- o como tratamiento.Resultados: 391 casos (30,9 por ciento) resultaron malignos y 33 premalignos. Para los intervenidos quirúrgicamente, el Valor Predictivo Positivo (VPP) asciende a 47,8 por ciento.VPP aumenta con la edad (p < 0,001) y depende de la imagen radiológica (p < 0,001), con valores extremos para Nódulo-Espiculado (95,7 por ciento) y Nódulo-Bien-definido (2,1 por ciento).Punción-citología: la ecoguiada superó en eficacia a la estereotáxica (0,83/0,64).Punción-biopsia de 14G: eficacia: 0,89. Mejoró los resultados de calibres menores y de aguja fina (p < 0,001).Ocurrieron tres falsos positivos y cinco falsos negativos con retrasos diagnósticos de 6-16 meses. Todos correspondían a estadios 0 y I.Evolutivamente, hubo disminución progresiva del número total de procedimientos quirúrgicos, con aumento de lesiones malignas entre las intervenidas (p < 0,001).El 34 por ciento de los tumores eran intraductales, el 66 por ciento infiltrantes y 49 tumores (12,5 por ciento) presentaban metástasis axilares.Estadios: 0.-34 por ciento, I.-50,6 por ciento, IIA.-10 por ciento.Evaluación del sistema en conjunto: sensibilidad: 0,9874; especificidad: 0,9988; eficacia: 0,9953 Conclusión: El VPP depende de la edad y el tipo de imagen, confirmándose la existencia bien diferenciada de lesiones de baja-media-alta sospecha.La biopsia estereotáxica (14G) es el método más preciso disponible de punción.La implantación de las diversas técnicas y la experiencia reducen significativamente el número de biopsias quirúrgicas (AU)

Diagnóstico por ecografía de la torsión de los apéndices testiculares / Ultrasonographic diagnosis of torsion of testicular appendages

Objetivo: Determinar la eficacia de la ecografía en niños con torsión de un apéndice testicular. Enfermos y método: Se estudia una serie de 30 niños con escroto agudo por torsión de un apéndice testicular. Nueve de ellos fueron intervenidos. Los 21 restantes presentaron una clínica y evolución sugestivas de esta entidad. A todos ellos se les practicó ecografía convencional y Doppler color con transductor de 7,5 Mhz. Resultados: En 15 niños la ecografía detectó el apéndice torsionado como una masa entre la cabeza del epidídimo y el testículo. En 13 sólo se observaron signos inflamatorios reactivos: agrandamiento de la cabeza del epidídimo y cubiertas con hiperaflujo e hidrocele, siendo las imágenes indistinguibles de las de una epididimitis aguda. En dos la ecografía fue normal. Conclusión: No existe una apariencia ecográfica única en niños con torsión de un apéndice testicular, siendo útil una valoración conjunta con la clínica (AU)