Bovine seminal plasma osteopontin: Structural modelling, recombinant expression and its relationship with semen quality.

Osteopontin (OPN) is a multifunctional phosphoprotein that has been linked to fertility in bulls. However, the exact mechanism by which OPN contributes to fertilisation is yet unknown. The biotechnological use of OPN in bovine reproduction is promising but some gaps remain unfilled. The present work aimed: (a) to verify whether the seminal plasma OPN is associated with seminal traits and a standard breeding soundness exam; (b) to predict OPN interactions with integrins, CD44 and glycosaminoglycans through molecular docking; and (c) to develop a protocol for recombinant expression of OPN from vesicular gland cDNA. Ejaculates from top ranked bulls had higher amounts of seminal plasma OPN in comparison with bulls classified as questionable (p < .01). The structural modelling and molecular docking predictions indicated that bovine OPN binds to heparin disaccharide, hyaluronic acid and hyaluronan. In addition, docking studies described the binding complexes of OPN with CD44 and the integrin heterodimers α5ß1 and αVß3. Finally, expression of rOPN-6His was successfully obtained after 3 hr of induction with 0.5 mM IPTG at 37°C and a denaturing purification protocol resulted in efficiently purified recombinant OPN. The present results contribute to the development of biotechnological uses of OPN as a biomarker in bovine reproduction.

Vulvoplastia pré ou pós-cobertura e sua influência na fertilidade

O presente estudo teve como objetivo comparar a taxa de prenhez de éguas PSC apresentando boa conformação perineal,natural ou corrigida cirurgicamente, no momento da cobertura com a taxa obtida em éguas com falhas no fechamento vulvar ecuja correção cirúrgica ocorreu somente após a ovulação. Foram utilizadas 293 éguas Puro Sangue de Corrida, sendo 47virgens, 96 falhadas e 150 com produto ao pé. Durante os exames de rotina para o controle folicular, a região perineal eraavaliada quanto à sua conformação. Quando necessária, a sutura dos lábios vulvares era realizada o mais rapidamentepossível, após a ovulação. Os diagnósticos de gestação foram realizados através de ultra-sonografia entre 12 e 14 dias apósa ovulação. Foi observada diferença significativa (p=0,072) entre as éguas com bom fechamento vulvar e com mau fechamentovulvar. Conclui-se que correções dos defeitos de períneo efetuadas antes do início do cio em que se efetuará a coberturaapresentam melhores resultados de prenhez do que quando a correção é realizada após a ovulação.

Perfil eletroforético das proteínas de baixo peso molecular (10-24kDa) do plasma seminal de reprodutores taurinos (Bos taurus taurus) e zebuínos (Bos taurus indicus)

As proteínas do plasma seminal de 14 reprodutores (7 8os taurus taurus e 7 8os taurus indicus) foram analisadas através deeletroforese bidimensional, pela técnica de O"Farrel et ai. (1977), modificada por Rodnight et ai., (1988), em géis de poliacrilamidaa 15%, corados por Azul de Comassie. Foram quantificadas 11 bandas protéicas, de acordo com a densidade óptica exibida.As bandas avaliadas não apresentaram a mesma freqüência de aparecimento nas espécies. Em reprodutores taurinos, comexceção das bandas 13 (14-15 kDa, pl 6,0-6,5) e 19 (16-18 kDa, pl 7,0-7,5), presentes nas amostras de 28,60% (2/7) dosreprodutores, as demais proteínas estiveram presentes nas amostras de plasma seminal de 100% dos animais. Apenas asbandas 3 (15-16 kDa, pl 4,7-5,2), 5 (16-17 kDa, pl 4, 1-4,8), 7 (11-12 kDa, pl 4,8-4,9) e 9 (14-15 kDa, pl 5,5-6,0) não apresentaramvariações significativas entre os reprodutores. Em zebuínos, as bandas protéicas 11 (13-14 kDa, pl 6,0-6,5), 19 (16-18 kDa, pl7,0-7,5) e 23 (18-20 kDa, pl 4,8-5,2) foram evidenciadas nas amostras de 71% ( 5/7) dos reprodutores, a banda 13 em 57% (4/7) e as demais bandas estiveram presentes nas amostras de 100% dos animais. Com exceção da banda 15 (11-12, kDa, pl7,5-8,0), as demais diferiram significativamente entre os touros. Dentre as 11 bandas analisadas, cinco diferiram estatisticamenteentre as espécies, as proteínas denominadas 5 (16-17

Efeito de diferentes diluidores sobre a membrana plasmática do espermatozóide eqüino e fertilidade do sêmen resfriado

O sêmen de garanhões mostra diferenças individuais com relação a sua preservação. Apesar das causas ainda não estaremclaras, fenômenos que ocorrem durante manipulação e armazenagem do sêmen a +5C exercem considerável influênciasobre a funcionalidade e integridade da membrana plasmática do espermatozóide eqüino. O presente trabalho objetivou avaliar a eficácia da adição de diferentes diluentes de sêmen sobre a motilidade progressiva, manutenção da funcionalidadee integridade da membrana plasmática do espermatozóide eqüino preservado a +5C por 72 horas, bem como sobre a taxade fertilidade. Pode-se concluir que a avaliação da integridade e funcionalidade da membrana espermática oferece informaçõesúteis à análise de rotina do sêmen eqüino que podem auxiliar na. previsão da fertilidade do sêmen resfriado.