In Vitro Evaluation of the Combinatorial Effect of Naringenin and Miltefosine against Leishmania amazonensis.

Leishmania amazonensis causes a clinical form called diffuse cutaneous leishmaniasis (DCL) with challenges to treatment, like low efficiency and drug toxicity. Therefore, it is necessary to investigate new therapies using less toxic leishmanicidal compounds, such as flavonoids like naringenin, and their combination with conventional drugs, such as miltefosine. Antileishmanial dose/response activity, isobologram, calculation of dose reduction index (DRI), and fractional inhibitory concentration index (FICI) tests were performed on in vitro assays using reference promastigote forms of L. amazonensis (IFLA/BR/67/PH8) to assess the combinatorial effect between naringenin and miltefosine. The in vitro results of isobologram, DRI, and FICI calculations showed that the combination of the compounds had an additive effect and was able to reduce the half maximal inhibitory concentration (IC50) of miltefosine in the promastigote forms of the parasite compared to the treatment of the drug alone. This study demonstrated in vitro the viability of a combination action of the flavonoid with the treatment with miltefosine, opening space for further investigations on the association of natural compounds with the drugs used for the treatment of L. amazonensis.

Hemotropic mycoplasmas (hemoplasmas) in free-ranging bats from Southern Brazil.

Hemotropic mycoplasmas (hemoplasmas) are bacteria distributed worldwide and affect domestic and wildlife animals and human beings. Hemoplasmas have been described infecting hematophagous and non-hematophagous bats; however, transmission risk and zoonotic potential in vampire bats remain to be fully established. This study aimed to evaluate the presence of hemotropic mycoplasma species in free-ranging bats from this area using a universal PCR protocol for hemoplasmas. Accordingly, ten blood samples were collected from six male common vampire bats (Desmodus rotundus), two male hairy-legged vampire bats (Diphylla ecaudata), and two female non-hematophagous Pallas's mastiff bats (Molossus sp.) from the Curitiba's region, Paraná State, Southern Brazil. A total of eight (8/10) blood samples were positive byconventional PCR; five (5/6) Desmodus rotundus, two (2/2) Diphylla ecaudata, and one (1/2) Molossus sp. bats. The analyses of the partial sequence of the 16S rDNA gene suggest that the hemoplasma detected in Desmodus rotundus in South Brazil has a high identity compared to the hemoplasma circulating in vampire bats from Central and South America.

Uncommon Ehrlichia canis infection associated with morulae in neutrophils from naturally infected dogs in Brazil.

Ehrlichia and Anaplasma species are the most common tick-borne disease (TBD) pathogens in dogs worldwide. Ehrlichia canis, the aetiological agent of the Canine Monocytic Ehrlichiosis (CME), is known to replicate within the cytoplasm of mononuclear cells into clusters of organisms called morulae. However, detection of morulae in neutrophils is commonly observed in dogs infected by Ehrlichia ewingii or Anaplasma phagocytophilum. We report uncommon clinical cases of canine ehrlichiosis presenting morulae compatible with E. ewingii and A. phagocytophilum in dogs from two distinct regions of Brazil. Eight dogs were admitted to two veterinary teaching hospitals from Brazil, showing clinical or haematological signs suggestive of TBD. Blood or peritoneal fluid was withdrawn for haematological and cytologic analysis. All samples were evaluated by PCR assays for Ehrlichia and Anaplasma using genus-specific primers for dsb, 16S rRNA and groEL genes, followed by sequencing. Samples were also evaluated by nested PCR assays for the 16S rRNA gene of E. ewingii and groEL gene of A. phagocytophilum and Anaplasma platys. Seven dogs revealed thrombocytopenia, six dogs had monocytosis and five presented lymphopenia and anaemia. All dogs showed morulae structures compatible with Ehrlichia spp. in neutrophils and were PCR-positive for the dsb and 16S rRNA gene fragments of Ehrlichia, with sequences showing 100% identity with multiple E. canis sequences deposited in the GenBank™. Sequencing of 16S rRNA and groEL gene fragments from one PCR-positive dog showed 100% identity with A. platys. Overall, our data suggest that in endemic regions for E. canis, that is Brazil, the presence of morulae in neutrophils may indicate infection by this bacterium. Herein, morulae were also found in neutrophils present in the peritoneal fluid of a dog. Also, this is the first report of E. canis and Hepatozoon canis co-infection in neutrophils from naturally infected dogs confirmed by DNA sequencing.

First molecular screening of Plasmodium species in ungulates from Southern Brazil.

OBJECTIVE: Despite malaria epidemiology has been extensively studied in primates, few studies were conducted in ungulates. After half a century without descriptions of Plasmodium spp. in deer since its first identification, recent research has rediscovered Plasmodium on ungulates in Africa, Asia, North America and South America, including Central Brazil. Here, a captive herd was evaluated in southern Brazil using light microscopy and PCR. DNA samples were tested for fragment amplification of two Plasmodium spp. genes: mitochondrial cytochrome b and small subunit ribosomal RNA. RESULTS: All analyses were negative. However, the tests were performed on samples that were collected at a single time point, and parasitemia may fluctuate over the parasite's life cycle. Thus, the possibility of occult infection cannot be ruled out. Despite the negative results of all of the methods applied, it cannot be categorically stated that these animals are free from Plasmodium sp. infection. Further monitoring and/or multiple sequential sampling may improve the success rate of detecting parasites. Moreover, although this survey of Plasmodium represents the first molecular study on ungulate malaria parasites from Southern Brazil, further analysis of samples from different ungulate species is important for characterizing the epidemiology of Plasmodium of these mammals in this region.

Resposta imune de bezerros imunizados com um coquetel de vacina de DNA que codificam proteínas de membrana externa de Anaplasma marginale / Immune response of calves immunized with cocktail of DNA vaccine encoding complexed outer membrane proteins from Anaplasma marginale

No presente estudo, avaliou-se a resposta imune humoral e celular de um coquetel de plasmídeos recombinantes que codificam as principais proteínas de superfície (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4, rMSP5, VirB9 e virB10) em bezerros. Dez animais foram divididos em três grupos: quatro bezerros foram inoculados com os plasmídeos / rMSPs (G1); 2 bezerros foram inoculados com vetor vazio (G2), e quatro bezerros receberam salina (G3). Três inoculações foram efetuadas em intervalos de 21 dias. No G1, os bezerros apresentaram aumentos significativos nos níveis de IgG total 21 dias após a segunda inoculação, em comparação com o grupo controle (p 0,05 %) e os bezerros do G1 permaneceram com DO acima do ponto de corte 28 dias após a terceira inoculação (p 0,05 %). Os soros pós-imunes dos bezerros do G1 reagiram especificamente para cada uma das rMSPs usadas. Adicionalmente, IgG específicas para VirB9 e Vir B10 foram detectadas por ELISA. Em conclusão, a associação de plasmídeos recombinantes induziu soroconversão específica nos bezerros testados. Portanto, sugerese a realização de testes adicionais para avaliar a proteção induzida pelos plasmídeos recombinantes, isoladamente ou em conjunto com as proteínas já identificadas com epítopos subdominantes. 

In the present study, we evaluated a cocktail of recombinant plasmids encoding the major surface proteins (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4, rMSP5, VirB9 and VirB10) to improve the humoral and cellular immune response triggered in calves. Ten calves were divided in three groups: Four calves were inoculated with the plasmids/rMSPs (G1); 2 calves were inoculated with empty vector (G2); and 4 calves received saline (G3). Three inoculations were administered at 21-day intervals. In G1, the calves showed significant increases in total IgG level 21 days after the second inoculation, compared to the control group (p 0,05%), and G1 calves remained above the cut-off value 28 days after the third inoculation (p 0,05%). The post-immunized sera from calves in G1 reacted specifically for each of the rMSPs used. Additionally, ELISA detected specific IgG for VirB9 and VirB10. In conclusion, the cocktail of recombinant plasmids induced antigen-specific seroconversion in calves. Therefore, additional testing to explore the protection induced by recombinant plasmids, alone or in conjunction with proteins previously identified as subdominant epitopes, is warranted.

Molecular detection of Ehrlichia canisand Anaplasma platys in dogs in Southern Brazil

The aims of this study were to determine the occurrence ofAnaplasma platys and Ehrlichia canisinfection in dogs in Porto Alegre, Southern Brazil; and to investigate their association with hematological abnormalities. Serum samples from 196 dogs were first tested using dot-ELISA for antibodies against Anaplasmaspp. and Ehrlichia canis. Peripheral blood samples from 199 dogs were subjected to 16S rRNA nested PCR (nPCR) for A. platysand E. canis, followed by DNA sequencing to ensure pathogen identity. A total of 19/196 samples (9.69%) were positive forAnaplasma spp. using ELISA and 28/199 (14.07%) samples were positive for A. platys by nested PCR. All the dog samples were negative for E. canis, both in anti-E. canisantibody tests and in nested PCR. There were no significant differences in hematological parameters between A. platys-PCR positive and negative dogs and Anaplasma spp. serologically positive dogs, except for basophil counts, which were higher in nPCR-positive dogs. This is the first report showing A. platys presence in dogs in Southern Brazil. In conclusion, hematological parameters may not be sufficient to diagnose A. platys infection in dogs in Southern Brazil, probably due either to low pathogenicity or to chronic infection. On the other hand, E. canis may either have very low occurrence or be absent in dogs in Porto Alegre.

O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência deAnaplasma platys e Ehrlichia canis em cães de Porto Alegre, sul do Brasil, sua detecção molecular e associação com anormalidades hematológicas. Amostras séricas de 196 cães foram inicialmente triadas por dot-ELISA para a presença de anticorpos contraAnaplasma spp. e Ehrlichia canis. Amostras de sangue periférico de 199 cães foram submetidas à nested PCR (16S rRNA) paraA. platys e E. canis, seguido de sequenciamento do DNA para confirmar a identidade do agente. Do total, 19/196 (9,69%) amostras foram positivas para Anaplasma spp. por dot-ELISA e 28/199 (14,07%) por nPCR. Todas as amostras dos cães foram negativas para E. canis no teste sorológico anti-E. canis e também na nPCR. Não houve diferença significativa nos parâmetros hematológicos, exceto a contagem de basófilos, que apresentou valores mais altos em cães positivos na nPCR para A. platys. Este é o primeiro relato da presença de A. platys no Rio Grande do Sul, e a primeira detecção molecular do agente no sul do Brasil. Em conclusão, parâmetros hematológicos não são suficientes para diagnosticar a infecção porA. platys em cães, provavelmente devido sua baixa patogenicidade ou infecção crônica. Por outro lado, E. canisparece ter ocorrência baixa ou mesmo nula em cães de Porto Alegre.

Immune response of calves inoculated with proteins ofAnaplasma marginale bound to an immunostimulant complex

Despite our current knowledge of the immunology, pathology, and genetics of Anaplasma marginale, prevention in cattle is currently based on old standbys, including live attenuated vaccines, antibiotic treatment, and maintaining enzootic stability in cattle herds. In the present study, we evaluated the use of an immunostimulant complex (ISCOMATRIX) adjuvant, associated with a pool of recombinant major surface proteins (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4 and rMSP5) to improve the humoral immune response triggered in calves mainly by IgG2. Ten calves were divided in three groups: 4 calves were inoculated with the ISCOMATRIX/rMSPs (G1); 2 calves were inoculated with ISCOMATRIX adjuvant (G2); and 4 calves received saline (G3). Three inoculations were administered at 21-day intervals. In G1, the calves showed significant increases in total IgG, IgG1 and IgG2 levels 21 days after the second inoculation, compared to the control group (p 0.05), and G1 calves remained above the cut-off value 28 days after the third inoculation (p 0.05). The post-immunized sera from calves in G1 reacted specifically for each of the rMSPs used. In conclusion, the ISCOMATRIX/rMSPs induced antigen-specific seroconversion in calves. Therefore, additional testing to explore the protection induced by rMSPs, both alone and in conjunction with proteins previously identified as subdominant epitopes, is warranted.

Apesar dos avanços da imunologia, patologia e genética deAnaplasma marginale, a prevenção em bovinos ainda é baseada nas vacinas vivas atenuadas, na terapia com antibiótico e estabilidade enzoótica dos rebanhos bovinos. No presente estudo, avaliou-se o uso de um complexo imunoestimulante (ISCOMATRIX), associado ás proteínas recombinantes de superfície (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4 e rMSP5) para melhorar a resposta imune humoral desencadeada em bezerros, principalmente por IgG2. Dez animais foram divididos em três grupos: 4 bezerros foram inoculados com o ISCOMATRIX/rMSPs (G1), 2 bezerros foram inoculados com ISCOMATRIX adjuvante (G2) e 4 bezerros receberam salina (G3). Três doses vacinais foram administradas em intervalos de 21 dias. No G1, os bezerros apresentaram aumentos significativos nos níveis de IgG total, IgG1 e IgG2 21 dias após a segunda inoculação, em comparação com o grupo de controle (p 0,05). Nos bezerros do G1 esses níveis de anticoprpos permaneceram acima do ponto de corte 28 dias após a terceira inoculação (p 0,05). Os soros pós-imunização de bezerros do G1 reagiram especificamente com cada uma das rMSPs utilizadas. Em conclusão, o ISCOMATRIX/rMSPs induziu soroconversão antígeno-específica em bezerros. Portanto, se justifica a realização de ensaios adicionais para explorar a proteção induzida pela rMSPs, tanto sozinhas como em conjunto com novas proteínas identificadas com epitopos subdominantes.

Serosurvey of tick-borne pathogens in dogs from urban and rural areas from Parana State, Brazil

Considering the zoonotic potential of tick-borne disease (TBD) agents and the fact that dogs may act as sentinels for human infection, the aim of the present study was to determine the seroprevalence of TBD agents and risk factors for exposure in two different canine populations from Parana State, Southern Brazil. A total of 138 dog serum samples from urban (UA) (n=68) and rural (RA) (n=70) areas were tested with commercial ELISA rapid test forAnaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canisand Borrelia burgdorferi antibodies and indirect immunofluorescence assay (IFAT) for Babesia vogeli. An overall of 92138 (66.7%) dogs, being 6268 (91.2%) from UA and 3070 (42.9%) from RA, were seropositive for at least one TBD agent. From the total number of dogs, sixty-two were positive for E. canis (44.9%), 19 (13.8%) for A. phagocytophilum, and 64 (46.4%) for B. vogeli. Anti-B. burgdorferi antibodies were not detected. Dogs from UA showed a higher percentage of tick infestation (p = 0.0135) and were highly associated with seropositivity to E. canis (p = 0.000005), A. phagocytophilum (p = 0.0001), and B. vogeli (p = 0.0012). In summary, the findings indicate that dogs from urban areas present higher potential risk exposure to TBD pathogens than those from rural areas.

Considerando o potencial zoonótico das doenças transmitidas por carrapatos (DTCs) e que os cães podem atuar como sentinelas para infecções em humanos, os objetivos deste estudo foram determinar a soroprevalência de agentes das DTCs e fatores de risco para a exposição em duas diferentes populações caninas do Estado do Paraná, região Sul do Brasil. Um total de 138 amostras de soro de cães de área urbana (AU) (n = 68) e rural (AR) (n = 70) foram testadas utilizando um teste de ELISA comercial rápido para detecção de anticorpos contra Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canis eBorrelia burgdorferi e imunofluorescência indireta (IFI) para Babesia vogeli. Um total de 92138 (66,7%) cães, sendo 6268 (91,2%) da AU e 3070 (42,9%) da AR, foram soropositivos para pelo menos um agente. Do número total de amostras, sessenta e duas (44,9%) foram positivas paraE. canis, 19 (13,8%) para A. phagocytophilum e 64 (46,4%) para B. canis vogeli. Anticorpos anti-B. burgdorferi não foram detectados. Os cães da AU apresentaram o maior percentual de infestação por carrapatos (p = 0,0135) e foram altamente associados com a positividade para E. canis (p = 0,000005), A. phagocytophilum (p = 0,0001) e B. vogeli (p = 0,0012). Em resumo, nossos achados indicam que cães de áreas urbanas têm um maior risco potencial de exposição a agentes patogênicos das DTCs comparados aos das áreas rurais.

Resposta imune de bezerros imunizados com um coquetel de vacina de DNA que codificam proteínas de membrana externa de Anaplasma marginale / Immune response of calves immunized with cocktail of DNA vaccine encoding complexed outer membrane proteins from Anaplasma marginale

No presente estudo, avaliou-se a resposta imune humoral e celular de um coquetel de plasmídeos recombinantes que codificam as principais proteínas de superfície (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4, rMSP5, VirB9 e virB10) em bezerros. Dez animais foram divididos em três grupos: quatro bezerros foram inoculados com os plasmídeos / rMSPs (G1); 2 bezerros foram inoculados com vetor vazio (G2), e quatro bezerros receberam salina (G3). Três inoculações foram efetuadas em intervalos de 21 dias. No G1, os bezerros apresentaram aumentos significativos nos níveis de IgG total 21 dias após a segunda inoculação, em comparação com o grupo controle (p 0,05 %) e os bezerros do G1 permaneceram com DO acima do ponto de corte 28 dias após a terceira inoculação (p 0,05 %). Os soros pós-imunes dos bezerros do G1 reagiram especificamente para cada uma das rMSPs usadas. Adicionalmente, IgG específicas para VirB9 e Vir B10 foram detectadas por ELISA. Em conclusão, a associação de plasmídeos recombinantes induziu soroconversão específica nos bezerros testados. Portanto, sugerese a realização de testes adicionais para avaliar a proteção induzida pelos plasmídeos recombinantes, isoladamente ou em conjunto com as proteínas já identificadas com epítopos subdominantes.

In the present study, we evaluated a cocktail of recombinant plasmids encoding the major surface proteins (rMSP1a, rMSP1b, rMSP4, rMSP5, VirB9 and VirB10) to improve the humoral and cellular immune response triggered in calves. Ten calves were divided in three groups: Four calves were inoculated with the plasmids/rMSPs (G1); 2 calves were inoculated with empty vector (G2); and 4 calves received saline (G3). Three inoculations were administered at 21-day intervals. In G1, the calves showed significant increases in total IgG level 21 days after the second inoculation, compared to the control group (p 0,05%), and G1 calves remained above the cut-off value 28 days after the third inoculation (p 0,05%). The post-immunized sera from calves in G1 reacted specifically for each of the rMSPs used. Additionally, ELISA detected specific IgG for VirB9 and VirB10. In conclusion, the cocktail of recombinant plasmids induced antigen-specific seroconversion in calves. Therefore, additional testing to explore the protection induced by recombinant plasmids, alone or in conjunction with proteins previously identified as subdominant epitopes, is warranted.

A prevalência e epidemiologia espacial da cisticercose em bovinos abatidos no Brasil / The prevalence and spatial epidemiology of cysticercosis in slaughtered cattle from Brazil

Cisticercose bovina é uma doença endêmica em vários países com um importante potencial zoonótico e uma crescente importância na saúde pública. A inspecção da carne nos matadouros é fundamental para estabelecer a prevalência e prevenção de doenças zoonóticas, tais como a cisticercose. No entanto, no Brasil, não há estudo que tenha investigado a dinâmica da cisticercose em bovinos abatidos em todo o país. Assim, o presente estudo teve como objetivo usar Sistema de Informação Geográfica (GIS) como uma ferramenta para analisar a prevalência de cisticercose bovina em bovinos, usando os dados de matadouros inspecionados pelo Serviço de Inspeção Federal do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (SIF/MAPA), no período de janeiro de 2007 a abril de 2010. As informações de bovinos abatidos foram usadas para gerar um banco de dados sobre cisticercose bovina para todos os estados e municípios do Brasil, a fim de analisar e criar mapas epidemiológicos usando o software GIS. Durante o período analisado, 75.983.590 bovinos foram abatidos e a prevalência de cisticercose bovina no Brasil foi de 1,05%, com a região Sudeste apresentando a maioria dos casos. A maior quantidade de casos cisticercose bovina ocorreram no estado de São Paulo (400.834), seguido por Mato Grosso do Sul (151.735) e Paraná (94.046), enquanto não houve observação de ocorrência em nove estados. Os dados fornecid

Bovine cysticercosis is a disease that is endemic in several countries with an important zoonotic potential but with an increasing public health concern. The meat inspection at slaughterhouses is fundamental to establish the prevalence and prevention of zoonotic diseases, such as cysticercosis. However, in Brazil, there is no study investigating the dynamics of cysticercosis in slaughtered cattle from the entire country. Thus, the aim was to use Geographic Information System (GIS) as a tool to analyze the prevalence of bovine cysticercosis in slaughtered cattle, by using the data from slaughterhouses inspected by the Federal Inspection Service of the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (SIF/MAPA), during January/2007 to April/2010. Data from slaughtered cattle was used to generate a bovine cysticercosis database for all states and municipalities of Brazil, in order to analyze and create epidemiological maps using the GIS software. During the period analyzed, 75.983.590 cattle were slaughtered and the prevalence of bovine cysticercosis in Brazil was 1.05%, with the Southeast region presenting the majority of cases. The highest amount of bovine cysticercosis cases occurred in the state of São Paulo (400,834) followed by Mato Grosso do Sul (151,735), and Paraná (94,046), while there was no observation of occurrence in nine states. The data provided by slaughterhouses ins

A prevalência e epidemiologia espacial da cisticercose em bovinos abatidos no Brasil / The prevalence and spatial epidemiology of cysticercosis in slaughtered cattle from Brazil

Cisticercose bovina é uma doença endêmica em vários países com um importante potencial zoonótico e uma crescente importância na saúde pública. A inspecção da carne nos matadouros é fundamental para estabelecer a prevalência e prevenção de doenças zoonóticas, tais como a cisticercose. No entanto, no Brasil, não há estudo que tenha investigado a dinâmica da cisticercose em bovinos abatidos em todo o país. Assim, o presente estudo teve como objetivo usar Sistema de Informação Geográfica (GIS) como uma ferramenta para analisar a prevalência de cisticercose bovina em bovinos, usando os dados de matadouros inspecionados pelo Serviço de Inspeção Federal do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (SIF/MAPA), no período de janeiro de 2007 a abril de 2010. As informações de bovinos abatidos foram usadas para gerar um banco de dados sobre cisticercose bovina para todos os estados e municípios do Brasil, a fim de analisar e criar mapas epidemiológicos usando o software GIS. Durante o período analisado, 75.983.590 bovinos foram abatidos e a prevalência de cisticercose bovina no Brasil foi de 1,05%, com a região Sudeste apresentando a maioria dos casos. A maior quantidade de casos cisticercose bovina ocorreram no estado de São Paulo (400.834), seguido por Mato Grosso do Sul (151.735) e Paraná (94.046), enquanto não houve observação de ocorrência em nove estados. Os dados fornecid

Bovine cysticercosis is a disease that is endemic in several countries with an important zoonotic potential but with an increasing public health concern. The meat inspection at slaughterhouses is fundamental to establish the prevalence and prevention of zoonotic diseases, such as cysticercosis. However, in Brazil, there is no study investigating the dynamics of cysticercosis in slaughtered cattle from the entire country. Thus, the aim was to use Geographic Information System (GIS) as a tool to analyze the prevalence of bovine cysticercosis in slaughtered cattle, by using the data from slaughterhouses inspected by the Federal Inspection Service of the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (SIF/MAPA), during January/2007 to April/2010. Data from slaughtered cattle was used to generate a bovine cysticercosis database for all states and municipalities of Brazil, in order to analyze and create epidemiological maps using the GIS software. During the period analyzed, 75.983.590 cattle were slaughtered and the prevalence of bovine cysticercosis in Brazil was 1.05%, with the Southeast region presenting the majority of cases. The highest amount of bovine cysticercosis cases occurred in the state of São Paulo (400,834) followed by Mato Grosso do Sul (151,735), and Paraná (94,046), while there was no observation of occurrence in nine states. The data provided by slaughterhouses ins

Laboratorial evaluation of canine distemper - retrospective study of 25 cases in Araçatuba county SP / Avaliação laboratorial da cinomose canina estudo retrospectivo de 25 casos no município de Araçatuba, SP

Canine Distemper is a contagious, severe and multisystemic disease caused by a virus from Morbillivírus genus. The virus is distributed worldwide and it presents a high lethality rate, affecting mainly dogs. The diagnosis is based on clinical signs associated with hematological findings. The observation of Lentz bodies in erythrocytes and leukocytes is the definitive diagnosis for the disease. The aim of this work was to test the hypothesis that the hematological profile in dogs positive for canine distemper differs according to blood cell type presenting Lentz bodies. For this purpose, 25 dogs positive for the disease were evaluated at the Veterinary Hospital Luís Quintiliano de Oliveira UNESP, Araçatuba city. The diagnosis was based on the observation of Lentz bodies in blood smears. From the total, 64% of dogs presented anemia, 16% leucopenia and 12% leukocytosis. Lymphopenia occurred in 76% of dogs. Viral inclusions were observed solely in neutrophils (32%), lymphocytes (28%) and erythrocytes (12%). Concomitant observation occurred in lymphocytes and erythrocytes (4%), in lymphocytes and neutrophils (12%), in neutrophils and monocytes (4%) and in neutrophils and erythrocytes (4%). In an isolated case Lentz bodies were observed simultaneously in neuthrophils, monocytes and lymphocytes. In conclusion, hematological profile is not associated with the presence of viral inclus

A cinomose é uma enfermidade contagiosa, grave e multissistêmica, causada por um vírus do gênero Morbillivirus, de disseminação mundial com alta taxa de letalidade e que afeta principalmente os cães. O seu diagnóstico é baseado nos sinais clínicos associados a achados hematológicos. A observação do Corpúsculo de Lentz (CL) em eritrócitos ou leucócitos confere o diagnóstico definitivo para esta enfermidade. Objetivou-se testar a hipótese de que o quadro hematológico de cães com cinomose difere de acordo com o tipo de célula sanguínea que apresenta o CL. Para tal foi avaliado o perfil hematológico de 25 cães positivos para a doença atendidos no Hospital Veterinário Luis Quintiliano de Oliveira da Universidade Estadual Paulista (UNESP), campus de Araçatuba. O diagnóstico da doença foi realizado após a visibilização do CL em esfregaços sanguíneos. Do total de casos, 64% apresentaram anemia, 16% leucopenia e 12% leucocitose. A linfopenia ocorreu em 76% dos cães. As inclusões virais foram observadas em neutrófi los (32%), linfócitos (28%) e eritrócitos (12%). Observação concomitante ocorreu em linfócitos e eritrócitos (4%), em linfócitos e neutrófilos (12%), em neutrófilos e monócitos (4%) e em neutrófilos e eritrócitos (4%). Em um único caso o CL foi observado simultaneamente em neutrófilos, monócitos e linfócitos. O quadro hematológico não está associado à presença da inclusão vi

Use of a Mycoplasma suis-PCR protocol for screening a population of captive peccaries (Tayassu tajacu and Tayassu pecari)

Mycoplasma suis is a hemotropic bacteria of red blood cells and the causative agent of swine eperythrozoonosis. Diagnosis of infection may be reached by direct examination of blood smears; however, the use of polymerase chain reaction (PCR) of the 16S RNA gene of M. suis improves the sensitivity and specificity of detection. The aim of this study was to screen peccaries (Tayassu tajacu and T. pecari) for M. suis infection using a specific conventional PCR. A total of 28 blood samples from captive collared and white-lipped peccaries were collected, DNA extracted and a specific M. suis PCR assay performed. All samples were negatives by both blood smear examination and PCR testing. To verify the presence of amplifiable DNA, PCR for beta-actin gene was performed in all samples. This study was part of an active surveillance program, which is crucial for monitoring animal health status, particularly in wildlife species.

Mycoplasma suis é uma bactéria hemotrópica dos eritrócitos e é o agente causador da eperitrozoonose suína. O diagnóstico da infecção pode ser realizado pelo exame direto de esfregaços sanguíneos; entretanto, o uso da reação em cadeia da polimerase (PCR) baseada no gene 16S RNA de M. suis aumenta a sensibilidade e especificidade da detecção. O objetivo deste estudo foi avaliar catetos e queixadas (Tayassu tajacu e T. pecari) para a infecção por M. suis, utilizando PCR convencional específico. Um total de 28 amostras de sangue de catetos e queixadas de cativeiro foram coletadas, o DNA foi extraído e a PCR específica para a detecção de M. suis realizada. Todas as amostras foram negativas pelo esfregaço sanguíneo e PCR. Para verificar a presença de DNA amplificável, PCR para o gene da beta actina foi realizada em todas as amostras. Este estudo foi parte de um programa de vigilância ativa, o qual é crucial para o monitoramento do estado de saúde animal, particularmente em espécies selvagens.

Ehrlichiosis in Brazil

Ehrlichiosis is a disease caused by rickettsial organisms belonging to the genus Ehrlichia. In Brazil, molecular and serological studies have evaluated the occurrence of Ehrlichia species in dogs, cats, wild animals and humans. Ehrlichia canis is the main species found in dogs in Brazil, although E. ewingii infection has been recently suspected in five dogs. Ehrlichia chaffeensis DNA has been detected and characterized in mash deer, whereas E. muris and E. ruminantium have not yet been identified in Brazil. Canine monocytic ehrlichiosis caused by E. canis appears to be highly endemic in several regions of Brazil, however prevalence data are not available for several regions. Ehrlichia canis DNA also has been detected and molecularly characterized in three domestic cats, and antibodies against E. canis were detected in free-ranging Neotropical felids. There is serological evidence suggesting the occurrence of human ehrlichiosis in Brazil but its etiologic agent has not yet been established. Improved molecular diagnostic resources for laboratory testing will allow better identification and characterization of ehrlichial organisms associated with human ehrlichiosis in Brazil.

Erliquiose é uma doença causada por rickettsias pertencentes ao gênero Ehrlichia. No Brasil, estudos sorológicos e moleculares têm avaliado a ocorrência de espécies de Ehrlichia em cães, gatos, animais selvagens e seres humanos. Ehrlichia canis é a principal espécie em cães no Brasil, embora a infecção por E. ewingii tenha, recentemente, despertado suspeita em cinco cães. O DNA de E. chaffeensis foi detectado e caracterizado em cervo-do-pantanal, enquanto que E. muris e E. ruminantium ainda não foram identificadas no Brasil. A erliquiose monocítica canina causada pela E. canis parece ser altamente endêmica em muitas regiões do Brasil, embora dados de prevalência não estejam disponíveis em muitas delas. O DNA de E. canis também foi detectado e caracterizado em três gatos domésticos, enquanto anticorpos contra E. canis foram detectados em felídeos neotropicais de vida livre. Evidências sorológicas sugerem a ocorrência de erliquiose humana no Brasil, entretanto, o agente etiológico ainda não foi identificado. A melhoria do diagnóstico molecular promoverá a identificação e caracterização de espécies associadas à erliquiose humana no Brasil.

Laboratorial evaluation of canine distemper - retrospective study of 25 cases in Araçatuba county SP / Avaliação laboratorial da cinomose canina estudo retrospectivo de 25 casos no município de Araçatuba, SP

Canine Distemper is a contagious, severe and multisystemic disease caused by a virus from Morbillivírus genus. The virus is distributed worldwide and it presents a high lethality rate, affecting mainly dogs. The diagnosis is based on clinical signs associated with hematological findings. The observation of Lentz bodies in erythrocytes and leukocytes is the definitive diagnosis for the disease. The aim of this work was to test the hypothesis that the hematological profile in dogs positive for canine distemper differs according to blood cell type presenting Lentz bodies. For this purpose, 25 dogs positive for the disease were evaluated at the Veterinary Hospital Luís Quintiliano de Oliveira UNESP, Araçatuba city. The diagnosis was based on the observation of Lentz bodies in blood smears. From the total, 64% of dogs presented anemia, 16% leucopenia and 12% leukocytosis. Lymphopenia occurred in 76% of dogs. Viral inclusions were observed solely in neutrophils (32%), lymphocytes (28%) and erythrocytes (12%). Concomitant observation occurred in lymphocytes and erythrocytes (4%), in lymphocytes and neutrophils (12%), in neutrophils and monocytes (4%) and in neutrophils and erythrocytes (4%). In an isolated case Lentz bodies were observed simultaneously in neuthrophils, monocytes and lymphocytes. In conclusion, hematological profile is not associated with the presence of viral inclus

A cinomose é uma enfermidade contagiosa, grave e multissistêmica, causada por um vírus do gênero Morbillivirus, de disseminação mundial com alta taxa de letalidade e que afeta principalmente os cães. O seu diagnóstico é baseado nos sinais clínicos associados a achados hematológicos. A observação do Corpúsculo de Lentz (CL) em eritrócitos ou leucócitos confere o diagnóstico definitivo para esta enfermidade. Objetivou-se testar a hipótese de que o quadro hematológico de cães com cinomose difere de acordo com o tipo de célula sanguínea que apresenta o CL. Para tal foi avaliado o perfil hematológico de 25 cães positivos para a doença atendidos no Hospital Veterinário Luis Quintiliano de Oliveira da Universidade Estadual Paulista (UNESP), campus de Araçatuba. O diagnóstico da doença foi realizado após a visibilização do CL em esfregaços sanguíneos. Do total de casos, 64% apresentaram anemia, 16% leucopenia e 12% leucocitose. A linfopenia ocorreu em 76% dos cães. As inclusões virais foram observadas em neutrófi los (32%), linfócitos (28%) e eritrócitos (12%). Observação concomitante ocorreu em linfócitos e eritrócitos (4%), em linfócitos e neutrófilos (12%), em neutrófilos e monócitos (4%) e em neutrófilos e eritrócitos (4%). Em um único caso o CL foi observado simultaneamente em neutrófilos, monócitos e linfócitos. O quadro hematológico não está associado à presença da inclusão vi

A review of the occurrence of hemoplasmas (hemotrophic mycoplasmas) in Brazil

Recent studies have been conducted in Brazil using molecular techniques for the detection of hemotrophic mycoplasmas in several mammals. In domestic cats, Mycoplasma haemofelis, 'Candidatus M. haemominutum', and 'Candidatus M. turicensis' infections have been identified. These species have also been found in free-ranging and captive neotropical felid species. Two canine hemoplasmas, Mycoplasma haemocanis and 'Candidatus Mycoplasma haematoparvum', have been identified in dogs. In commercial swine populations, Mycoplasma suis was found to be highly prevalent, especially in sows. Moreover, novel mycoplasma species have been identified in Brazilian commercial pigs and domestic dogs. A hemoplasma infection in a human patient infected with the human immunodeficiency virus (HIV) was also recently documented. In conclusion, hemoplasma species are common and important infectious agents in Brazil. Further studies should be conducted to better understand their impact on pets, production animals, and wildlife fauna, as well as their role as zoonotic agents, particularly in immunocompromised patients.

Estudos recentes utilizando técnicas moleculares para a detecção de micoplasmas hemotróficos em diferentes mamíferos têm sido conduzidos no Brasil. Em gatos domésticos, infecções por Mycoplasma haemofelis, 'Candidatus M. haemominutum' e 'Candidatus M. turicensis' foram identificadas. Estas espécies também foram encontradas em felídeos neotropicais de vida livre e de cativeiro. Dois hemoplasmas caninos, Mycoplasma haemocanis e 'Candidatus Mycoplasma haematoparvum', foram identificados em cães domésticos. Em populações comerciais de suínos, Mycoplasma suis possui alta prevalência, especialmente em porcas. Além disso, novas espécies de hemoplasmas foram detectadas em suínos comercias e cães. Infecção por um hemoplasma em um paciente humano infectado com o vírus da imunodeficiência humana (HIV) foi recentemente documentada. Em conclusão, espécies de hemoplasmas são comuns e importantes agentes de infecções no Brasil. Estudos futuros devem ser conduzidos para melhor entender seu impacto em cães e gatos, animais de produção e na fauna silvestre, e também para determinar o seu papel como agentes zoonóticos, particularmente em pacientes imunocomprometidos.

USO DA TÉCNICA DE HISTOMETRIA PARA GRADUAÇÃO DA LESÃO RENAL DE NEFRITE INTERSTICIAL EM SUÍNOS ABATIDOS EM FRIGORÍFICOS INDUSTRIAIS

A histometria tem se mostrado uma ferramenta de grande precisão no estabelecimento de medidas confiáveis de estruturas, com aplicações no estudo de alterações pa- tológicas baseadas no grau de lesão tecidual. Este trabalho objetivou estabelecer uma classificação das nefrites intersticiais, mensurando-se as áreas de infiltrado inflamatório pela técnica de histometria para determinação do grau de acometimento do parênquima renal. Foram selecionadas aleatoriamente dez lâminas de 150 rins rejeitados de suínos para o consumo humano. Para a análise histométrica foram utilizadas oito micrografias por lâmina, totalizando oitenta micrografias. A porcentagem de infiltrado foi estabelecida pela relação entre a média das áreas de lesão por zona e a área total do campo. Para efeito de classificação adotou-se a seguinte gradação: insignificante = 0% a 10%; leve = 11% a 40%; moderado = 41% a 70% e intenso = 71% a 100%. Em relação à cortical, verificou-se infiltração inflamatória média de 42,80%, indicando grau de acometimento moderado. Na medular observou-se em média 12,72% de infiltração, determinando grau leve. A pelve apresentou infiltração média de 5,54%, apontando ausência de lesão significativa. A análise estatística dos dados revelou diferenças significativas (p = 0,05) apenas entre a cortical e as demais áreas. Desconsiderando as divisões histológicas, os rins analisados apresentavam

Uso da técnica de histometria para graduação da lesão renal de nefrite intersticial em suínos abatidos em frigoríficos industriais

A histometria tem se mostrado uma ferramenta de grande precisão no estabelecimento de medidas confiáveis de estruturas, com aplicações no estudo de alterações pa- tológicas baseadas no grau de lesão tecidual. Este trabalho objetivou estabelecer uma classificação das nefrites intersticiais, mensurando-se as áreas de infiltrado inflamatório pela técnica de histometria para determinação do grau de acometimento do parênquima renal. Foram selecionadas aleatoriamente dez lâminas de 150 rins rejeitados de suínos para o consumo humano. Para a análise histométrica foram utilizadas oito micrografias por lâmina, totalizando oitenta micrografias. A porcentagem de infiltrado foi estabelecida pela relação entre a média das áreas de lesão por zona e a área total do campo. Para efeito de classificação adotou-se a seguinte gradação: insignificante = 0% a 10%; leve = 11% a 40%; moderado = 41% a 70% e intenso = 71% a 100%. Em relação à cortical, verificou-se infiltração inflamatória média de 42,80%, indicando grau de acometimento moderado. Na medular observou-se em média 12,72% de infiltração, determinando grau leve. A pelve apresentou infiltração média de 5,54%, apontando ausência de lesão significativa. A análise estatística dos dados revelou diferenças significativas (p = 0,05) apenas entre a cortical e as demais áreas. Desconsiderando as divisões histológicas, os rins analisados apresentavam