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SLAS Discov ; 26(3): 410-419, 2021 03.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-32935608

RESUMO

We previously developed a panel of one-step real-time quantitative reverse transcription PCR (one-step qRT-PCR; hereafter referred to as qRT-PCR) assays to assess compound efficacy. However, these high-cost, conventional qRT-PCR manual assays are not amenable to high-throughput screen (HTS) analysis in a time-sensitive and complex drug discovery process. Here, we report the establishment of an automated gene expression platform using in-house lysis conditions that allows the study of various cell lines, including primary T cells. This process innovation provides the opportunity to perform genotypic profiling in both immunology and oncology therapeutic areas with quantitative studies as part of routine drug discovery program support. This newly instituted platform also enables a panel screening strategy to efficiently connect HTS, lead identification, and lead optimization in parallel.


Assuntos
Automação Laboratorial/normas , Perfilação da Expressão Gênica/normas , Ensaios de Triagem em Larga Escala/métodos , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real/métodos , Antígenos de Neoplasias/genética , Antígenos de Neoplasias/imunologia , Automação Laboratorial/instrumentação , Proteína 3 com Repetições IAP de Baculovírus/genética , Proteína 3 com Repetições IAP de Baculovírus/imunologia , Linhagem Celular Tumoral , Quimiocina CCL3/genética , Quimiocina CCL3/imunologia , Descoberta de Drogas/métodos , Perfilação da Expressão Gênica/instrumentação , Perfilação da Expressão Gênica/métodos , Regulação da Expressão Gênica , Células HCT116 , Ensaios de Triagem em Larga Escala/instrumentação , Humanos , Proteínas de Membrana/genética , Proteínas de Membrana/imunologia , Proteínas de Neoplasias/genética , Proteínas de Neoplasias/imunologia , Osteoblastos/citologia , Osteoblastos/metabolismo , Cultura Primária de Células , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real/normas , Proteínas Ribossômicas/genética , Proteínas Ribossômicas/imunologia , Linfócitos T/citologia , Linfócitos T/metabolismo
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