False-positive results of a rapid K39-based strip test and Chagas disease.

BACKGROUND: The definitive diagnosis of visceral leishmaniasis (VL) requires invasive procedures with demonstration of amastigotes in tissue or promastigotes in culture. Unfortunately, these approaches require laboratory materials not available in poor countries where the disease is endemic. The correct diagnosis of VL is important, and made more difficult by the fact that several common tropical diseases such as malaria, disseminated tuberculosis, and enteric fever share the same clinical presentation. Serological tests have been developed to replace parasitological diagnosis in the field. A commercially available K39-based strip test for VL has been developed for this purpose. The endemic area of leishmaniasis in Brazil overlaps the endemic area of Chagas disease, a disease that can cause false-positive serological test results. The aim of this study was to evaluate the incidence of false-positive exams using a rapid test for VL in patients with Chagas disease. METHODS: A rapid test based on the recombinant K39 antigen of Leishmania was used in: (1) 30 patients with confirmed Chagas disease, (2) 30 patients with a serological diagnosis of Chagas disease by ELISA, indirect immunofluorescence, indirect hemagglutination, and chemiluminescence, (3) 30 healthy patients from a non-endemic area as the control group, (4) 30 patients with confirmed VL, and (5) 20 patients with proved cutaneous leishmaniasis. RESULTS: The sensitivity and specificity of the rapid strip test were 100% when compared with healthy volunteers and those with confirmed Chagas disease. One false-positive result occurred in the group with Chagas disease diagnosed by serological tests (specificity of 96%). CONCLUSION: The rapid test based on recombinant K39 is a useful diagnostic assay, and a false-positive result rarely occurs in patients with a serological diagnosis of Chagas disease.

[Behavior of the chemiluminescent ELISA method in relation to results considered discordant via three conventional techniques for diagnosing Chagas disease]. / Comportamento do método quimioluminescente-ELISA em relação a resultados considerados discordantes por meio de três técnicas convencionais para diagnóstico da doença de Chagas.

When indirect hemagglutination, indirect immunofluorescence and enzyme-linked immunosorbent assay are used together for serologically diagnosing Chagas disease, results that are considered discordant sometimes occur because there is disagreement between what these tests indicate. The availability of the chemiluminescent ELISA method enabled tests on 200 serum samples that had previously produced discordant results from the three above-mentioned methods. CL-ELISA revealed that 193 of these samples were negative and seven were positive. The use of this new procedure provides further support for understanding this subject, but more concrete advances will depend on documentation with blood analyses from people previously demonstrated to be unquestionably infected or uninfected with Trypanosoma cruzi.

Comportamento do método quimioluminescente-ELISA em relação a resultados considerados discordantes por meio de três técnicas convencionais para diagnóstico da doença de Chagas / Behavior of the chemiluminescent ELISA method in relation to results considered discordant via three conventional techniques for diagnosing Chagas disease

Quando utilizadas, em conjunto, a hemaglutinação indireta, a imunofluorescência indireta e ELISA para diagnóstico sorológico da doença de Chagas por vezes ocorrem resultados considerados discordantes, por não haver concordância entre o que indicam essas técnicas. A disponibilidade do método quimioluminescente-ELISA permitiu executá-lo com 200 soros que examinados pelos três testes citados que motivaram a obtenção de resultados discordantes. Com o método quimioluminescente-ELISA sucederam 193 negativos e sete positivos. O emprego desse novo procedimento trouxe mais um subsídio para compreensão do assunto, mas avanço mais concreto dependerá de documentação com soros de pessoas infectadas ou não pelo Trypanosoma cruzi conforme comprovação parasitológica.

When indirect hemagglutination, indirect immunofluorescence and enzyme-linked immunosorbent assay are used together for serologically diagnosing Chagas disease, results that are considered discordant sometimes occur because there is disagreement between what these tests indicate. The availability of the chemiluminescent ELISA method enabled tests on 200 serum samples that had previously produced discordant results from the three abovementioned methods. CL-ELISA revealed that 193 of these samples were negative and seven were positive. The use of this new procedure provides further support for understanding this subject, but more concrete advances will depend on documentation with blood analyses from people previously demonstrated to be unquestionably infected or uninfected with Trypanosoma cruzi.

Observacões sobre o TESA blot no diagnóstico sorológico da doenca de Chagas / Observations on the use of TESA blot for the serological diagnosis of Chagas' disease

Comparamos o TESA blot com a hemaglutinacão indireta, imunofluorescência indireta e ELISA. Nos 30 soros de pessoas infectadas pelo Trypanosoma cruzi, as quatro técnicas foram positivas em todos, e nos 30 não-infectados, totalmente negativas. Nos soros indeterminados e nos de leishmaniose visceral, comprovamos muitas positividades falsas, em quantidade bastante menor com o TESA blot.

[Observations on the use of TESA blot for the serological diagnosis of Chagas' disease]. / Observações sobre o TESA blot no diagnóstico sorológico da doença de Chagas.

TESA blot was compared with indirect hemagglutination, indirect immunofluorescence and ELISA tests. In sera from 30 participants infected with Trypanosoma cruzi, and in 30 non infected the four techniques produced entirely equivalent results, all positive and all negative, respectively. In cases admitted to be inconclusive or in visceral leishmaniasis, frequent false positives were detected. However, TESA blot contributed with the least proportion of them.

Avaliação rotineira de prova de execução rápida (ELISA - ImmunoComb II Chagas Ab) para diagnóstico sorológico da doença de Chagas / An evaluation of a quick test for the serological diagnosis of Chagas disease (ELISA - ImmunoComb II Chagas Ab) in routine work

Objetivo. Avaliar, em atividade rotineira, o desempenho de prova rápida (ELISA - ImmunoComb II Chagas Ab - EIC) para o diagnóstico sorológico da doença de Chagas. Métodos. Foi realizada comparação com outros testes habitualmente utilizados: hemaglutinação indireta - HI; imunofluorescência indireta - IFI; ELISA. Quatro grupos de soros compuseram a casuística: de pessoas com com doença de Chagas confirmada sorológica e parasitologicamente; de pessoas sem doença de Chagas, conforme verificação sorológica; correspondentes a resultados tidos como indeterminados quando efetuadas HI, IFI e ELISA; de pessoas com leishmaniose visceral, para apreciação de especificidade. Resultados. Os indicados por EIC mostraram-se totalmente iguais, em termos de positividade ou negatividade, aos obtidos por HI, IFI e ELISA quanto aos soros dos dois grupos primeiro citados. Em relação a indeterminados e a pacientes com leishmaniose visceral, com o EIC sucederam menos duvidosos ou falsos-positivos, mas algumas inadequações ainda persistiram, mantendo obstáculos à obtenção de diagnóstico plenamente aceitável. Conclusões: A prova EIC propiciou resultados absolutamente idênticos aos derivados de HI, IFI e ELISA quando analisados soros de pessoas com doença de Chagas ou não, de acordo com apreciações sorológicas ou confirmatórias da presença de infecção pelo Trypanosoma cruzi. Contudo, considerando os indeterminados e os de pacientes com leishmaniose visceral, o EIC não eliminou inadequações, apesar de tê-las comprovado com menores prevalências.

[Evaluation of the sensitivity of the indirect immunofluorescence test at the 1:20 dilution in the diagnosis of Chagas disease]. / Avaliação da sensibilidade da diluição 1 / 20 pela reação de imunofluorescência indireta, no diagnóstico sorológico da doença de Chagas.

Sera from people in the chronic stage of Chagas disease, whose infection had been parasitologically validated, were assayed by using the indirect immunofluorescence test to evaluated its performance at the 1:20 dilution. All tests were consistently positive at 1:20 and higher dilutions, even in the presence of concomitant infection with the human immunodeficiency virus (HIV). It is thus valid, into the light of this experiment, to take into account the remarkable sensitivity of such serological test at the above mentioned dilution.

Avaliaçäo da sensibilidade da diluiçäo 1/20 pela reaçäo de imunofluorescência indireta, no diagnóstico sorológico da doença de Chagas / Evaluation of the sensitivity of the indirect immunofluorescence test at the 1 / 20 dilution in the diagnosis of Chagas disease

Soros de pessoas com doença de Chagas em fase crônica, comprovada parasitologicamente, foram utilizados para realizaçäo de reaçäo de imunofluorescência indireta, a fim de avaliar o comportamento da prova na diluiçäo 1/20. Sistematicamente houve positividade nessa diluiçäo e em maiores, mesmo quando presente co-infecçäo pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). Portanto, é válido valorizar resultados positivos na diluiçäo citada, que a propósito da casuística analisada demonstrou expressiva sensibilidade

Avaliaçäo, em modelo experimental, da possibilidade do alopurinol impedir reativaçäo da infecçäo pelo Trypanosoma cruzi na vigência de imunodepressäo / Experimental model for the evaluation of the allopurinol as an agent to avoid the reactivation of Trypanosoma cruzi infection during immunodepression

Pacientes com a doença de Chagas na fase crônica têm sido tratados por meio de transplante de coraçäo, em determinadas circunstâncias, e em virtude de imunodepressäo pode ocorrer reativaçäo da infecçäo devida ao Trypanosoma cruzi. Foi verificado que o alopurinol mostrou-se apto a arrefecer esse acontecimento. Por isso, utilizando modelo experimental, procuramos verificar se tal fármaco é capaz de evitar a reativaçäo parasitária quando usado preventivamente. Verificamos, contudo, que propriedade dessa natureza näo ficou comprovada.

Avaliaçäo de eventual influência da intradermorreaçäo de Montenegro sobre prova sorologica para o diagnóstico da leishmaniose tegumentar americana / Assesment of the possible influence of Montenegro's intradermal reaction (leishmanin skin test) on one serological assay for the diagnosis of American cutaneous and mucosal leishmaniasis

Foi avaliada a eventual influência da intradermorreacao de Montenegro no resultado de prova sorologica imunenzimatica para diagnóstico da leishmaniose tegumentar americana. Houve o intuito de verificar possível interferência, capaz de conturbar atividades assistenciais, científicas e epidemiológicas, entre outras. Näo se verificou qualquer participaçäo, pelo menos com a metodologia usada