SARS-CoV-2 Infection in Venezuelan Pediatric Patients-A Single Center Prospective Observational Study.

Several studies suggest that children infected with SARS-CoV-2 have fewer clinical manifestations than adults; when they develop symptoms, they rarely progress to severe disease. Different immunological theories have been proposed to explain this phenomenon. In September 2020, 16% of the active COVID-19 cases in Venezuela were children under 19 years. We conducted a cross-sectional study of pediatric patients' immune response and clinical conditions with SARS-CoV-2 infection. The patients were admitted to the COVID-19 area of the emergency department of Dr José Manuel de los Ríos Children's Hospital (2021-2022). The lymphocyte subpopulations were analyzed by flow cytometry, and IFNγ, IL-6, and IL-10 serum concentrations were quantified using commercial ELISA assays. The analysis was conducted on 72 patients aged one month to 18 years. The majority, 52.8%, had mild disease, and 30.6% of the patients were diagnosed with MIS-C. The main symptoms reported were fever, cough, and diarrhea. A correlation was found between IL-10 and IL-6 concentrations and age group, lymphocyte subpopulations and nutritional status and steroid use, and IL-6 concentrations and clinical severity. The results suggest a different immune response depending on age and nutritional status that should be considered for treating pediatric COVID-19 patients.

[Expression of Fc receptors for IgG in peripheral blood leucocytes from hepatitis C virus infected individuals]. / Expresión de los receptores para el Fc de la IgG en leucocitos de sangre periférica de pacientes con hepatitis C crónica.

The immune response represents a fundamental element in the control of Hepatitis C virus (HCV) infection. Viral and cellular host factors may modulate this response. In the present study, we characterized immune complexes (cryoprecipitates) isolated form HCV-infected patients and evaluated the expression of Fc receptors for IgG (FcgammaR) in peripheral blood leucocytes of these patients. Twelve HCV (+) patients and 12 healthy control individuals were selected for this study. For each group, sera samples were collected for cryoglobulins isolation and characterization and EDTA-anticoagulated venous blood samples were collected for flow cytometry analysis of FcgammaR, CD64 (FcgammaRI), CD32 (FcgammaRII) and CD16 (FcgammaRIII) expression. Presence of HCV RNA in serum and cryoprecipitates was analysed by RT-PCR. Results show that 50% of HCV-infected patients present high levels of cryoglobulins mainly constituted by IgG. Three out of 5 cryoglobulins analyzed by RT-PCR were positive for HCV-RNA. Expression of CD64 was observed mainly in monocytes (80%), CD32 in monocytes, B lymphocytes and neutrophils (> 90%) and CD16 in NK cells and neutrophils (85% and 95% respectively). No differences were observed in the percentage of FcgammaR expression when comparing HCV-infected patients with healthy controls. On the contrary, density of expression of CD32 in monocytes and neutrophils cell populations of HCV patients was significantly lower than that observed in healthy controls (p < 0.05). We concluded that low density expression of FcgammaRII in HCV-infected patients may have implications in the physiopatholgy of HCV infection.

Expresión de los receptores para el Fc de la IgG en leucocitos de sangre periférica de pacientes con hepatitis C crónica / Expression of Fc receptors for IgG in peripheral blood leucocytes from hepatitis C virus infected individuals

La respuesta inmunitaria representa un elemento fundamental en el control de la infección por el Virus del Hepatitis C (VHC). Factores de origen viral y del hospedero modulan dicha respuesta. El presente trabajo tuvo como objetivo caracterizar complejos inmunitarios, bajo la forma de crioglobulinas, de pacientes infectados con el VHC y evaluar la expresión de superficie de los receptores para el Fc de la IgG (FcyR)COLOCARSIGNO en subpoblaciones leucocitarias de sangre periférica de estos pacientes. Se seleccionaron 12 individuos VHC (+) y 12 sujetos sanos. De ambos grupos se tomaron muestras de suero para aislar crioglobulinas y sangre venosa con EDTA para evaluar la expresión e los FcyR CD64 (FcyRI), CD32 (FcyRII) y CD16 (FcyRIII) mediante citometr¡a de flujo. La presencia de ARN del VHC en suero y crioglobulinas fue analizada mediante RT-PCR. Los resultados muestran que el 50 por ciento de los pacientes VHC (+) presentaron niveles elevados de crioglobulinas constituidas fundamentalmente por IgG. En 3 de 5 pacientes con crioglobulinas elevadas se identificó ARN del VHC. La expresión de CD64 se observó principalmente en monocitos (80 por ciento), CD32 en monocitos, linfocitos B y neutrófilos (>90 por ciento) y CD16 en células NK y neutrófilos (85 por ciento y 95 por ciento respectivamente) no encontrándose diferencias significativas entre pacientes y controles. La densidad de expresión de CD32 resultó significativamente menor en poblaciones de monocitos y neutrófilos de pacientes en comparación con controles (p<0,05). Se concluye que esta disminución en la densidad del receptor FcyRII podría tener implicaciones en la fisiopatología de la infección por el VHC.

HIV type 1 drug resistance among naive patients from Venezuela.

In this study, we characterize proviral DNA of 20 HIV-1 asymptomatic antiretroviral-naive patients from Venezuela in env, gag, and pol genes regions. Results from both env/gag HMA subtyping and phylogenetic analysis of pol partial sequences led to the description of clade B in all cases. Nevertheless, the high prevalence of polymorphisms was particularly evident among the protease sequences. A 10% prevalence of major resistance mutations to RTIs was found. Our data also suggested that the protease polymorphisms I62T and V77T could be considered as molecular markers of the subtype B local epidemic. In addition, we show how proviral DNA can be used as a reliable tool to follow trends of resistance mutation transmission.

Candida spp en pacientes VIH/SIDA / Candida spp in patient VIH/SIDA

La candidiasis es la infección fúngica más frecuente en pacientes VIH seropositivos y con SIDA, siendo C. albicans la especie que predomina. En estos pacientes, la candidiasis se manifiesta más comúnmente como orofaringitis, con una incidencia que oscila entre 45 por ciento y 95 por ciento de todos los casos. En Venezuela son pocos los reportes que existen acerca de esta entidad en pacientes VIH/SIDA, por lo cual uno de los objetivos de esta investigación fue evaluar este aspecto. Se estudió una cohorte de 402 pacientes con VIH/SIDA con o sin orofaringitis y con o sin tratamiento antifúngico. Las especies de Candida más importantes aisladas fueron: C. albicans (80,41 por ciento), C. tropicalis (8,78 por ciento), C. glabrata (4,90 por ciento), C. dubliniensis (3,26 por ciento). Se evaluó la susceptibilidad de los diferentes aislados a las drogas antifúngicas con el método de la NCCLS y el método de los pozos de difusión. El 37,5 por ciento C. albicans provenientes de pacientes con tratamiento antimicótico fueron resistentes al fluconazol (resistencia secundaria) y 23,95 por ciento mostraron también resistencia al itraconazol (resistencia cruzada). Los ailados obtenidos se tipificaron a través de la reacción en cadena de la polimera (RAPD) y se estableció la que la misma representa una técnica útil para diferenciar Candida spp. En esta cohorte de pacientes evaluados, las características clínicas y demográficas son similares a las reportadas mundialmente, y que desde la introducción del TARGA, la frecuencia de las infecciones por Candida spp disminuyó. Hasta la presente fecha, en Venezuela no se había reportado el hallazgo de C. dubliniensis (3,26 por ciento).

Interaction of immune complexes isolated from hepatitis C virus-infected individuals with human cell lines.

We investigated the interaction of immune complexes (IC) isolated from hepatitis C virus (HCV)-infected individuals with several cell lines that differentially express Fc receptors, and analyzed viral infection by the presence of HCV RNA sequences. Monocytic (U937 and Monomac-6) and lymphocytic (MOLT-4 and Jurkat) cell lines were incubated with interferon- plus phorbol myristate acetate to stimulate the expression of Fc receptors before addition of IC. Cell interaction with IC was monitored by flow cytometry. Positive cell fluorescence was detected in U937 and Monomac-6 cells [mean fluorescence intensity (MFI) 10.56+/-0.8 and 11.60+/-0.8, respectively]. Incubation of cells with monoclonal antibodies against Fc receptors for IgG before addition of IC decreased MFI in both cell lines (U937 2.1+/-0.5, Monomac-6 4.4+/-0.8, P<0.001), indicating that cell-IC interaction through these receptors was inhibited. In particular, the blockage of FcgammaRII was responsible for this effect. No binding of IC with either MOLT-4 or Jurkat cell lines was detected, which correlated with a very low Fc receptor expression. HCV RNA sequences were identified in the cells up to 120 h of post incubation with IC. These results suggest that IC can mediate entry of HCV to both U-937 and Monomac-6 cell lines mainly through the FcgammaRII.

Molecular epidemiology of HIV-1 in Venezuela: high prevalence of HIV-1 subtype B and identification of a B/F recombinant infection.

The authors assessed HIV-1 variability in two distinct areas of Venezuela (the capital Caracas and Margarita Island) through the analysis of blood specimens and clinical and epidemiologic data of 72 persons. Proviral DNA was evaluated through heteroduplex mobility assay (HMA) based on the envelope region. Additionally, FOK I restriction enzyme digestion assay was performed in all subtype B ED31/33 amplified products to check the presence of the typical Brazilian subtype B GWGR variant. Sequencing and phylogenetic analysis for C2-V3 region of gp120 was performed in selected cases. The vast majority of samples were found to belong to subtype B, with a North American/European RFLP profile. An F subtype HIV-1 based on the region was identified for the first time in Venezuela. Genetic analyses of the protease and reverse transcriptase fragments of this sample depicted a recombinant B/F genetic profile. The discrimination capacity of HIV-1 subtypes using the primer set ED3/14-ED31/33 among the Caracas samples was found to be higher than for those from Margarita Island. The authors' results point to relevant differences between the samples of continental and Caribbean regions of Venezuela, requiring further evaluation of larger samples.

Disminución de la respuesta proliferativa de los linfocitos frente a antígenos ambientales, como indicador precoz / Precocious indicator of the lympocytary injuries induce by the immunodeficiency virus human

A fin de evaluar las células CD4+/CD29+ y sus respuestas frente a diferentes antígenos en estadíos de la infección por el Virus de Imunodeficiencia Humana (VIH), estudiamos 26 pacientes seropositivos asintomáticos (SP) y 15 pacientes con Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA) simultaneamente con 20 individuos controles sanos (CS) y 10 hombres homo y bisexuales seronegativos (SN) y 15 pacientes con Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA) simultáneamente con 20 individuos controles sanos (CS) y 10 hombres homo y bisexuales seronegativos (SN). Los fenotipos CD3, CD4, CD29 y CD45RA fueron analizados por citometría de flujo de dos colores. Encontramos depleción significativa de los linfocitos T CD4+ y de las subpoblaciones de células memoria (CD4+/CD29+) y virgen (CD45/CD45RA+) en los pacientes SP y SIDA, en comparación con los grupos CS y SN. Las respuestas proliferativas con dosis óptimas de Candida Albicans, Estreptokinasa y Toxoide Tetánico fueron exploradas en células mononucleares de sangre periférica (CMSP) y en poblaciones enriquecidas de células CD4+ y CD4/CD29+. En pacientes SP, la respuesta ante C. Albicans de CMSP estaba significativamente disminuída con respecto a la de CS (15.308 vs 35.951 cpm). La reducción de la proliferación frente a estreptokinasa fue evidente solamente con preparaciones enriquecidas de linfocitos Cd4+/cd29+ (3.084 vs 10.367 cpm). Una vez analizados los resultados, evidenciamos entre los pacientes SP, 7 individuos respondedores a por lo menos un antígeno y 7 no respondedores. En este último grupo, la ausencia de proliferación era independiente del número absoluto de células memoria y virgen. La respuesta frente a Toxoide Tetánico, aunque disminuida en SP, no era significativamente diferente de la CS. Nuestros resultados sugieren que la respuesta defectuosa frente a antígenos ambientales comunes, no relacionada con el número absoluto de linfocitos CD4+/CD29+, es probablemente un indicador temprano de lesión linfocitaria inducida por el VIH

Respuesta inmunológica en hepatitis viral / Immune response in viral hepatitis

Los virus de la hepatitis A, B, y C constituyen tres de los principales agentes hepatotrópicos mejor caracterizados desde el punto de vista estructural y molecular. El estudio de la biología de estos virus ha permitido comprender ciertos aspectos relacionados con la fisiopatología y la respuesta inmune en estas infecciones virales. En los tres modelos de infección se describe una respuesta humoral específica dirigida hacia distintos componentes antigénicos de las partículas virales y que pudiera resultar efectiva en el control de la infección. En algunos casos, comola infección por el VHB, el patrón de la respuesta humoral puede correlacionarse con la condición clínico-patológica del paciente infectado. El componente celular de la respuesta inmune resulta también fundamental en el control de la infección viral. Este tipo de respuesta es mediada principalmente por linfocitos T, los cuales reconocen antígenos viarles específicos. Así mismo, dicha respuesta puede ser responsable del año histopatológico que se evidencia en las infecciones por el VHB y el VHC

Ausencia de infección por virus Delta en sujetos masculinos de alto riesgo infectados por virus B y virus de la inmunodeficiencia humana / Absence of delta agent infection in high risk male subjects infected with B virus and human immunodeficiency virus

Contactos positivos para VD fueron investigados en un grupo de 50 sujetos masculinos, 48 homosexuales y 2 heterosexuales con antecedente de drogadicción intravenosa. Ninguno demostró presencia de anticuerpos anti-VD, mientras que el 98% y el 50% del grupo total presentó reactividad comprobada para VIH y VHB respectivamente. Es más, 19 sujetos que notificaron un número igual o superior a 5 parejas sexuales por año, presentaban uno o más marcadores del VHB, hallazgo sólo observado en 6 sujetos de 31 que notificaron menos de 5 parejas por año (p < 0.001). La no evidencia de contactos positivos para VD sugieren que el comportamiento epidemiológico de este virus es menos o no dependiente de a condición sexual de la población expuesta

Diarrea crónica como expresión clínica de la hipogammaglobulinemia común variable. A propósito de tres casos / Chronic diarrhoea in common variable hypogammaglobulinemia: report of 3 cases

La diarrea crónica puede manifestarse hasta en un 60% de los pacientes que presentan compromiso del compartimiento inmunológico humoral, específicamente en la hipogammaglobulinemia común variable (HCV). Presentamos 3 casos con HCV de aparición tardía, en quienes la diarrea crónica fue el síntoma cardinal del cuadro clínico. Los estudios inmunodiagnósticos revelaron niveles no cuantificables o subnormales tanto de Inmunoglobulina G como de M y A, con complemento hemolítico total preservado, y pantalla autoinmune negativa. La exploración del compartimiento celular demostró elevado número de linfocitos T supresores (CD8) con hiporespuesta de la población linfocitaria total frente a mitógenos policionales tipo PHA. El abordaje clínico de los pacientes con HCV debe ser practicado por un equipo multiespecializado conformado por el inmunólogo clínico, el gastroenterólogo y el infectólogo.

Aspectos inmunopatogenos de la infeccion por el virus de la inmunodeficiencia humana en Venezuela / Immunopathogenic aspects of infection by the human immunodeficiency virus in Venezuela

A prospective study was begun on the immunopathogenic characteristics of infection with human immunodeficiency virus (HIV) in order to elucidate the natural history of the disease induced by the virus in Venezuela. The results of a study of 240 individuals with variety of clinical manifestations are presented. The most important findings were depletion of the CD3+, CD4+ subpopulation in most individuals studied, including asymptomatic carriers; significant reduction of the large granular lymphocyte (CD3-, CD16+) pool in AIDS cases; decrease in cytotoxic activity in relation to the viral infection, along with an increase induced by recombinant interleukin 2; and reduction of the CD4 subpopulation in patients with free serum antigen. It is of utmost importance that ongoing research projects to clarity the immunopathogenic mechanisms of HIV be continued so that the characteristics peculiar to HIV infection may be determined, since they can affect clinical manifestation and the desease's development in the Venezuelan population

Aspectos inmunopatogenos de la infeccion por el virus de la inmunodeficiencia humana en Venezuela / Immunopathogenic aspects of infection by the human immunodeficiency virus in Venezuela

A prospective study was begun on the immunopathogenic characteristics of infection with human immunodeficiency virus (HIV) in order to elucidate the natural history of the disease induced by the virus in Venezuela. The results of a study of 240 individuals with variety of clinical manifestations are presented. The most important findings were depletion of the CD3+, CD4+ subpopulation in most individuals studied, including asymptomatic carriers; significant reduction of the large granular lymphocyte (CD3-, CD16+) pool in AIDS cases; decrease in cytotoxic activity in relation to the viral infection, along with an increase induced by recombinant interleukin 2; and reduction of the CD4 subpopulation in patients with free serum antigen. It is of utmost importance that ongoing research projects to clarity the immonopathogenic mechanisms of HIV be continued so that the characteristics peculiar to HIV infection may be determined, since they can affect clinical manifestation and the desease's development in the Venezuelan population