Natural Plasmodium infection in neotropical primates in the island of São Luís, state of Maranhão, Brazil.

The states that make up the Legal Amazon Region, which include the state of Maranhão, account for 99% of registered cases of human malaria in Brazil. It is also believed that transmission of malaria from nonhuman primates (NHP) to humans occurs in this region, because of current reports of seroepidemiological results from samples from humans and NHP coexisting in the same areas. This study aimed to make morphological, serological and molecular diagnoses of Plasmodium spp. in neotropical primates on the island of São Luís, state of Maranhão, Brazil. The diagnostic techniques used were optical microscopy, the polymerase chain reaction (PCR) and the indirect immunofluorescence assay (IFA). From June 2009 to April 2010, 70 NHP were sampled: 50 at the Wild Animal Screening Center (CETAS), located in the municipality of São Luís and 20 free-living individuals that were caught in a private reserve located in the municipality of São Jose de Ribamar, state of Maranhão. Under an optical microscope, 140 slides (two from each animal) were evaluated and five animals (7.1%) were found to be positive. IFA did not detect anti-Plasmodium spp. From PCR on the 70 animals sampled, amplified Plasmodium spp. products were observed in 13 samples, of which eight (61.5%) were from free-living animals and five (38.5%) were from animals at CETAS.

Natural Plasmodium infection in neotropical primates in the island of São Luís, state of Maranhão, Brazil / Infecção natural de Plasmodium em primatas neotropicais da Ilha de São Luís, Estado do Maranhão, Brasil

The states that make up the Legal Amazon Region, which include the state of Maranhão, account for 99% of registered cases of human malaria in Brazil. It is also believed that transmission of malaria from nonhuman primates (NHP) to humans occurs in this region, because of current reports of seroepidemiological results from samples from humans and NHP coexisting in the same areas. This study aimed to make morphological, serological and molecular diagnoses of Plasmodium spp. in neotropical primates on the island of São Luís, state of Maranhão, Brazil. The diagnostic techniques used were optical microscopy, the polymerase chain reaction (PCR) and the indirect immunofluorescence assay (IFA). From June 2009 to April 2010, 70 NHP were sampled: 50 at the Wild Animal Screening Center (CETAS), located in the municipality of São Luís and 20 free-living individuals that were caught in a private reserve located in the municipality of São Jose de Ribamar, state of Maranhão. Under an optical microscope, 140 slides (two from each animal) were evaluated and five animals (7.1%) were found to be positive. IFA did not detect anti-Plasmodium spp. From PCR on the 70 animals sampled, amplified Plasmodium spp. products were observed in 13 samples, of which eight (61.5%) were from free-living animals and five (38.5%) were from animals at CETAS.

Os Estados que compõem a Amazônia Legal, entre eles o Estado do Maranhão, respondem a 99% dos casos registrados de malária humana no Brasil. Também se acredita que nessa região ocorra a transmissão de malária de primatas não humanos (PNH) para humanos, devido a relatos atuais de resultados soroepidemiológicos de amostras de humanos e PNH que coexistem nas mesmas áreas. O presente estudo objetivou realizar o diagnóstico morfológico, sorológico e molecular de Plasmodium spp. em primatas neotropicais na Ilha de São Luís, Estado do Maranhão, Brasil. Foram utilizadas como técnicas de diagnóstico: a microscopia de luz, a reação em cadeia pela polimerase (PCR) e a imunofluorescência indireta (RIFI). No período de junho de 2009 a abril de 2010, foram amostrados 70 PNH, sendo 50 provenientes do Centro de Triagem de Animais Silvestres (CETAS), localizado no município de São Luís, e 20 de vida livre, capturados em reserva particular localizada no município de São José de Ribamar, Estado do Maranhão. Foram avaliadas pela microscopia de luz 140 lâminas (duas de cada animal), das quais cinco animais (7,1%) foram positivos. Pela RIFI não se detectou anticorpos anti-Plasmodium spp. Pela PCR, dos 70 animais amostrados, foi possível observar produtos amplificados para Plasmodium spp. em 13 amostras, das quais oito (61,5%) eram de animais de vida livre e cinco (38,5%) de CETAS.

Análise da resistência in vitro do Plasmodium falciparum à Pirimetamina e ao Cicloguanil em isolados da região amazônica brasileira através da reação em cadeia da Polimerase(PCR) / Analysis of the resistance in vitro of Plasmodium falciparum at Pyrithamine and to Cycloguanil in isolated of the brasilian amazonian region by Polimerase chain reaction (PCR)

A resistência à pirimetamina em isolados de Plasmodium falciparum cultivados em laboratórios está ligada à mutação Asn-108, no gene da DHFR, uma mutação que interfere na ligação da droga com o sítio ativo da enzima. Para determinar a prevalência desta mutação em regiões endêmicas para malária com resistência à pirimetamina, foi utilizada a reação em cadeia da polimerase (PCR)específica para a mutação, em cepas de Plasmodium falciparum oriundas de diversos Estados da Amazônia brasileira. As mutações foram identificadas diretamente de amostras de sangue parasitado, sem a necessidade de realização de cultivo contínuo. Das 42 amostras coletadas de 4 Estados brasileiros, 38(90,5 por cento) apresentaram o codon AAC (Asn-108), que confere resistência à pirimetamina, 04 amostras (9,5 por cento) apresentaram somente o codon AGC (Ser-108) e nenhuma apresentou o codo ACC(Tre-108) encontrados em cepas sensíveis à pirimetamina e resistentes ao cicloguanil. Estes resultados indicam que a alta incidência da mutação Asn-108, é responsável pela esistência à pirimetamina na Amazônia, e são consistentes com os recentes índices de falha terapêutica reportados com o Fansidar R (pirimetamina/sulfadoxina). Os resultados sugerem que o uso limitado do proguanil seja avaliado como uma alternativa à pirimetamina, para o tratamento da malária causada por Plasmoium falciparum.