RESUMO
The tandemly repetitive Trypanosoma cruzi B13 protein is an immunodominant antigen among Chagas disease patients. Such repetitive domains may behave as T-independent antigens. However, T cells can recognize B13 epitopes in an HLA class II-restricted fashion and could potentially provide cognate T cell help and boost antibody titers. We assessed whether the presence of HLA class II molecules able to present B13 epitopes to T cells could affect anti-B13 IgG levels in a cognate fashion, in both major clinical forms of chronic Chagas disease. We found no difference between anti-B13 IgG antibody levels between patients carrying HLA class II molecules associated to T cell responses or other alleles. The predominant anti-B13 IgG subclass was IgG1, with negligible IgG2, suggesting a T-dependent, noncognate help for antibody production. In addition, the finding of increased anti-B13 IgG levels in sera from CCC patients indicates that clinical presentation is associated with increased anti-B13 antibody levels.
RESUMO
B13, one of the immunodominant antigens of Trypanosoma cruzi, is composed of repeats of a 12-amino-acid motif. Using synthetic peptides, the sequence FGQAAAGDK was previously shown to contain the B13 immunodominant epitope recognized by chagasic patients sera. To investigate the effects of neighboring sequences in the immunodominance, we tested serum recognition of two B13 sequences fused to LamB. GDKPSPFGQAAA-LamB and FGQAAAGDKPSP-LamB were recognized, respectively, by 15% and 80% of 80 sera reactive to B13 antigen. Recognition of FGQAAAGDKPSP-LamB was inhibited by AAAGDK-containing synthetic peptides. FGQAAAGDKPSP-LamB competed with a B13 recombinant protein containing 16.6 repeats for binding to chagasic antibodies. These results strengthen previous conclusions on the immunodominant epitope of B13 and provide a comparison of two methods for epitope mapping.
Assuntos
Antígenos de Protozoários/imunologia , Mapeamento de Epitopos , Proteínas de Escherichia coli/imunologia , Proteínas Recombinantes de Fusão/imunologia , Sequências Repetitivas de Ácido Nucleico/imunologia , Trypanosoma cruzi/imunologia , Sequência de Aminoácidos , Animais , Anticorpos Antiprotozoários/sangue , Antígenos de Protozoários/química , Antígenos de Protozoários/genética , Linfócitos B/imunologia , Doença de Chagas/imunologia , Doença de Chagas/parasitologia , Mapeamento de Epitopos/métodos , Proteínas de Escherichia coli/genética , Proteínas de Escherichia coli/metabolismo , Humanos , Epitopos Imunodominantes/química , Epitopos Imunodominantes/genética , Epitopos Imunodominantes/imunologia , Dados de Sequência Molecular , Peptídeos/síntese química , Peptídeos/química , Peptídeos/imunologia , Sinais Direcionadores de Proteínas/genética , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética , Proteínas Recombinantes de Fusão/metabolismo , Sequências Repetitivas de Ácido Nucleico/genéticaRESUMO
A proteína recombinante B13 contém repetições seriadas de 12 aminoácidos e corresponde a uma região do antígeno imunodominante de 140-116 KDa encontrado na superfície da forma tripomastigota de T. cruzi (cepa Y). A proteína B13 apresenta elevada sensibilidade e especificidade no diagnóstico sorológico da Doença de Chagas. A análise da distribuição de subclasses de IgG anti-B13 em soros de pacientes chagásicos cardiopatas (SCC) e de assintomáticas (SCI) mostrou o mesmo padrão: IgG1¼IgG3>IgG2>IgG4. No entanto, a média da reatividade a B13 foi maior no grupo SCC do que no grupo SCI. Dados anteriores de nosso grupo indicam que a resposta de célula T a B13 é restrita ao grupo HLA de classe II...
