RESUMO
Multi-well assays based on the Boyden chamber have enabled highly parallel studies of chemotaxis-the directional migration of cells in response to molecular gradients-while direct-viewing approaches have allowed more detailed questions to be asked at low throughput. Boyden-based plates provide a count of cells that pass through a membrane, but no information about cell appearance. In contrast, direct-viewing devices enable the observation of cells during chemotaxis, which allows measurement of many parameters including area, shape, and location. Here we show automated chemotaxis and cell morphology assays in a 96-unit direct-viewing plate. Using only 12000 primary human neutrophils per datum, we measured dose-dependent stimulation and inhibition of chemotaxis and quantified the effects of inhibitors on cell area and elongation. With 60 parallel conditions we demonstrated 5-fold increase in throughput compared to previously reported direct-viewing approaches.
Assuntos
Quimiotaxia de Leucócito/imunologia , Técnicas Imunológicas , Neutrófilos/imunologia , Desenho de Equipamento , Humanos , Interleucina-8/imunologia , Técnicas Analíticas Microfluídicas , Neutrófilos/citologia , Proteínas Recombinantes/imunologiaRESUMO
Este estudo teve como objetivo experimentar a analise de relatos de acontecimentos marcantes da vida como via de acesso a identidade pessoal. O roteiro de analise usado foi inspirado no de A. Giorgi, com seus 4 passos, aos quais acrescentamos uma analise do fluxo discursivo. Foram analisados relatos de 4 sujeitos. A identidade foi entendida como estrutura de relacoes, nem sempre consciente, mas que o sujeito tem possibilidade de reconhecer quando confrontado com ela. O metodo se revelou eficaz como acesso a elementos da identidade uteis ao processo de crescimento no momento atual de vida dos sujeitos, e isso foi confirmado por eles em entrevista final. O trabalho de analise funcionou tambem como um treino introdutorio ao atendimento clinico para os auxiliares de pesquisa.
