Exposure of different cryoprotectants and concentrations on diameter and number of the granulosa cells of bovine preantral follicles / Exposição de diferentes crioprotetores e concentrações sobre o diâmetro e número de células da granulosa de folículos pré-antrais bovinos

This study evaluated the effect of glycerol (GLY), dimethyl sulfoxide (DMSO) and propylene glycol (PROH) in diameter of follicle, of oocyte and of granulosa cells number of preantral follicles cattle. Ovarian fragments were exposed to cryoprotectants at concentrations of 20 and 40% for 10 min. Then, the tissue was fixed in Carnoy and processed by traditional technique of histology. Slides were stained by hematoxylin and eosin and evaluated under optical microscope equipped with eyes wide with morphometric. Data were analyzed by ANOVA and Tukey test. Regarding diameter of the follicle, no difference was found among the control and the groups exposed to the cryoprotectants. However, in relation to the diameter of the oocyte, 40% concentration in all tested cryoprotectants the primary follicles showed reduction in diameter, including 20% of propylene glycol. For primary follicles, only 40% of glycerol presented difference from control group. For the granulosa cells 40% of DMSO and 20 and 40% of PROH showed significant reduction compared to control group, in primary follicles. In conclusion primary follicles were resistant to cryoprotectants effects. For the primary structures, glycerol, dimethyl sulfoxide and propylene glycol led to reduction of diameter of oocyte and number of granulosa cells but not of follicular diameter.

O objetivo, no presente estudo, foi avaliar o efeito do glicerol (GLI), dimetilsulfóxido (DMSO) e propilenoglicol (PROH) sobre o diâmetro do folículo, do ovócito e do número de células da granulosa de folículos pré-antrais bovinos. Fragmentos ovarianos foram imediatamente fixados em Carnoy (controle) ou expostos aos crioprotetores nas concentrações de 20 e 40%, por 10min. Após o período de exposição, o tecido ovariano também foi fixado em Carnoy e processado para inclusão em parafina. As secções (5) de tecido ovariano foram coradas em hematoxilina e eosina e analisadas ao microscópio de luz com ocular em escala micrométrica. Os dados foram analisados por ANOVA e teste Tukey. Em relação ao diâmetro do folículo primordial, nenhuma diferença foi encontrada entre o controle e os grupos expostos aos crioprotetores. Entretanto, em relação ao diâmetro do ovócito, na concentração de 40%, para todos os crioprotetores testados, os ovócitos primordiais apresentaram redução significativa do diâmetro, o que incluiu o PROH a 20%. Nas estruturas primárias, ocorreu redução dos ovócitos e folículos somente com o glicerol a 40%. Com relação ao número de células da granulosa das estruturas primordiais, o DMSO a 40% e o PROH a 20 e 40% levaram a redução significativa do diâmetro dos ovócitos e folículos em comparação ao grupo controle. Os folículos primários, para todos os crioprotetores testados,

Estratégias para avaliar bem-estar animal em animais em reprodução

A reprodução é um dos processos biológicos mais susceptíveis aos efeitos do comprometimento do Bem-estar animal (BEA), no entanto há uma enorme dificuldade de identificar o quão é comprometida, pois esse efeito é sutil, de forma geral leva a perda na eficiência, problemas de subfertilidade e somente em situações muito graves a infertilidade. Os critérios a serem adotados devem ser confiáveis, apresentar boa repetibilidade, fáceis de executar e devem avaliar os diferentes aspectos do BEA. A avaliação deve ser feita sob três aspectos: Indicadores de BEA que avaliam o animal per si, critérios baseados nos recursos, relativos ao ambiente oferecido ao animal e critérios relativos à gestão que focam no cuidado humano. Esta revisão pretende discutir e apresentar estratégias de avaliação e mudança das condições de BEA no sistema de cria de animais de produção.

Estratégias para avaliar bem-estar animal em animais em reprodução

A reprodução é um dos processos biológicos mais susceptíveis aos efeitos do comprometimento do Bem-estar animal (BEA), no entanto há uma enorme dificuldade de identificar o quão é comprometida, pois esse efeito é sutil, de forma geral leva a perda na eficiência, problemas de subfertilidade e somente em situações muito graves a infertilidade. Os critérios a serem adotados devem ser confiáveis, apresentar boa repetibilidade, fáceis de executar e devem avaliar os diferentes aspectos do BEA. A avaliação deve ser feita sob três aspectos: Indicadores de BEA que avaliam o animal per si, critérios baseados nos recursos, relativos ao ambiente oferecido ao animal e critérios relativos à gestão que focam no cuidado humano. Esta revisão pretende discutir e apresentar estratégias de avaliação e mudança das condições de BEA no sistema de cria de animais de produção.

Exposure of different cryoprotectants and concentrations on diameter and number of the granulosa cells of bovine preantral follicles / Exposição de diferentes crioprotetores e concentrações sobre o diâmetro e número de células da granulosa de folículos pré-antrais bovinos

This study evaluated the effect of glycerol (GLY), dimethyl sulfoxide (DMSO) and propylene glycol (PROH) in diameter of follicle, of oocyte and of granulosa cells number of preantral follicles cattle. Ovarian fragments were exposed to cryoprotectants at concentrations of 20 and 40% for 10 min. Then, the tissue was fixed in Carnoy and processed by traditional technique of histology. Slides were stained by hematoxylin and eosin and evaluated under optical microscope equipped with eyes wide with morphometric. Data were analyzed by ANOVA and Tukey test. Regarding diameter of the follicle, no difference was found among the control and the groups exposed to the cryoprotectants. However, in relation to the diameter of the oocyte, 40% concentration in all tested cryoprotectants the primary follicles showed reduction in diameter, including 20% of propylene glycol. For primary follicles, only 40% of glycerol presented difference from control group. For the granulosa cells 40% of DMSO and 20 and 40% of PROH showed significant reduction compared to control group, in primary follicles. In conclusion primary follicles were resistant to cryoprotectants effects. For the primary structures, glycerol, dimethyl sulfoxide and propylene glycol led to reduction of diameter of oocyte and number of granulosa cells but not of follicular diameter.

O objetivo, no presente estudo, foi avaliar o efeito do glicerol (GLI), dimetilsulfóxido (DMSO) e propilenoglicol (PROH) sobre o diâmetro do folículo, do ovócito e do número de células da granulosa de folículos pré-antrais bovinos. Fragmentos ovarianos foram imediatamente fixados em Carnoy (controle) ou expostos aos crioprotetores nas concentrações de 20 e 40%, por 10min. Após o período de exposição, o tecido ovariano também foi fixado em Carnoy e processado para inclusão em parafina. As secções (5) de tecido ovariano foram coradas em hematoxilina e eosina e analisadas ao microscópio de luz com ocular em escala micrométrica. Os dados foram analisados por ANOVA e teste Tukey. Em relação ao diâmetro do folículo primordial, nenhuma diferença foi encontrada entre o controle e os grupos expostos aos crioprotetores. Entretanto, em relação ao diâmetro do ovócito, na concentração de 40%, para todos os crioprotetores testados, os ovócitos primordiais apresentaram redução significativa do diâmetro, o que incluiu o PROH a 20%. Nas estruturas primárias, ocorreu redução dos ovócitos e folículos somente com o glicerol a 40%. Com relação ao número de células da granulosa das estruturas primordiais, o DMSO a 40% e o PROH a 20 e 40% levaram a redução significativa do diâmetro dos ovócitos e folículos em comparação ao grupo controle. Os folículos primários, para todos os crioprotetores testados,

INDUCTION OF PARTURITION USING TRIAMCINOLONE PRETREATMENT IN PREGNANT RECIPIENTS OF IN VITRO PRODUCED EMBRYO / ACETATO DE TRIANCINOLONA COMO PRÉ-INDUTOR DO PARTO DE RECEPTORAS DE EMBRIÃO NELORE PRODUZIDOS IN VITRO

The aim of the present study was to evaluate the effect of two doses of acetonide triamcinolone (TRI) at two distinct moments of gestation in the pre induction of parturition. Embryo recipients pregnant of the in vitro produced embryo were utilized as experimental model. A total of 175 pregnant embryo recipients were assigned into one of the four groups according to gestational period (280 or 285 days) and utilized dose of the TRI (1mg/60Kg or 1mg/100kg of body weight). The synchronization and assistance rates of the calving, the viability and body weight of calves at calving as well as retained placenta rate were evaluated. The TRI dose did not effect any variables responses (p>0.05). Least spread of the calving moment was observed in the recipients treated at the 280 days of gestation (p?0.05). The cow calving calf with ?42kg needed more assistance to calving (p?0.05) and these calves had lower viability than calves with

Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes doses e momentos da gestação para a administração do acetato de triancinolona (TRI) na pré-indução de partos. Utilizaram-se como modelo experimental receptoras de embriôes Nelore produzidos in vitro (PIV). Cento e setenta e cinco receptoras gestantes foram distribuídas em quatro grupos experimentais de acordo com o tempo gestacional (280 ou 285 dias) e a dose de TRI (1mg/60 Kg ou 1mg/100 Kg de Peso Vivo). Avaliaram-se o momento da gestação, as taxas de sincronização e de assistência aos partos, a viabilidade e o peso dos bezerros e ainda a taxa de retenção de placenta. A dose de TRI não alterou os parâmetros avaliados (p>0,05). Houve maior sincronização dos partos (p

Correlation among methods to evaluate sperm membrane integrity of bovine cryopreserved sperm / Correlação entre métodos de avaliação da integridade da membrana plasmática do espermatozóide bovino criopreservado

It were established correlations among methods of sperm plasmatic membrane evaluation, by analyzing cryopreserved semen of five Nelore bulls, within three replicates / bull. After thawing at 37C/30 seconds, there were assessed motility (%), concentration (x106), morphology (%) and membrane integrity. To evaluate membrane integrity, hypoosmotic test (HOS), fluorescence (FLU) and eosin/nigrosin (EN) were used. Data were submitted to Pearson´s correlation analysis. According to the results, there was correlation between fluorescence vs eosin/nigrosin (r = 0.74; p

O objetivo, com este trabalho, foi verificar a correlação entre métodos de avaliação da integridade da membrana plasmática (IMP), no sêmen congelado comercial de cinco touros da raça Nelore, com três repetições por animal. Após o descongelamento a 37C/30 segundos, foram analisadas as variáveis motilidade (%), concentração (x106/ml), morfologia (%) e IMP. Para a avaliação da IMP, foram usados o teste hiposmótico (HOS), fluorescência (FLU) e eosina/nigrosina (EN), e contadas 100 células/lâmina. Os dados foram submetidos à análise de correlação de Pearson. Houve correlação entre as técnicas de fluorescência vs eosina/nigrosina (r = 0,74; p

Induction of parturition using triamcinolone pretreatment in pregnant recipients of in vitro produced embryo / Acetato de triancinolona como pré-indutor do parto de receptoras de embrião nelore produzidos in vitro

The aim of the present study was to evaluate the effect of two doses of acetonide triamcinolone (TRI) at two distinct moments of gestation in the pre induction of parturition. Embryo recipients pregnant of the in vitro produced embryo were utilized as experimental model. A total of 175 pregnant embryo recipients were assigned into one of the four groups according to gestational period (280 or 285 days) and utilized dose of the TRI (1mg/60Kg or 1mg/100kg of body weight). The synchronization and assistance rates of the calving, the viability and body weight of calves at calving as well as retained placenta rate were evaluated. The TRI dose did not effect any variables responses (p>0.05). Least spread of the calving moment was observed in the recipients treated at the 280 days of gestation (p?0.05). The cow calving calf with ?42kg needed more assistance to calving (p?0.05) and these calves had lower viability than calves with

Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes doses e momentos da gestação para a administração do acetato de triancinolona (TRI) na pré-indução de partos. Utilizaram-se como modelo experimental receptoras de embriôes Nelore produzidos in vitro (PIV). Cento e setenta e cinco receptoras gestantes foram distribuídas em quatro grupos experimentais de acordo com o tempo gestacional (280 ou 285 dias) e a dose de TRI (1mg/60 Kg ou 1mg/100 Kg de Peso Vivo). Avaliaram-se o momento da gestação, as taxas de sincronização e de assistência aos partos, a viabilidade e o peso dos bezerros e ainda a taxa de retenção de placenta. A dose de TRI não alterou os parâmetros avaliados (p>0,05). Houve maior sincronização dos partos (p

Correlation among methods to evaluate sperm membrane integrity of bovine cryopreserved sperm / Correlação entre métodos de avaliação da integridade da membrana plasmática do espermatozóide bovino criopreservado

It were established correlations among methods of sperm plasmatic membrane evaluation, by analyzing cryopreserved semen of five Nelore bulls, within three replicates / bull. After thawing at 37C/30 seconds, there were assessed motility (%), concentration (x106), morphology (%) and membrane integrity. To evaluate membrane integrity, hypoosmotic test (HOS), fluorescence (FLU) and eosin/nigrosin (EN) were used. Data were submitted to Pearson´s correlation analysis. According to the results, there was correlation between fluorescence vs eosin/nigrosin (r = 0.74; p

O objetivo, com este trabalho, foi verificar a correlação entre métodos de avaliação da integridade da membrana plasmática (IMP), no sêmen congelado comercial de cinco touros da raça Nelore, com três repetições por animal. Após o descongelamento a 37C/30 segundos, foram analisadas as variáveis motilidade (%), concentração (x106/ml), morfologia (%) e IMP. Para a avaliação da IMP, foram usados o teste hiposmótico (HOS), fluorescência (FLU) e eosina/nigrosina (EN), e contadas 100 células/lâmina. Os dados foram submetidos à análise de correlação de Pearson. Houve correlação entre as técnicas de fluorescência vs eosina/nigrosina (r = 0,74; p

Selection bovine frozen semen in Percoll® gradient on spermatic parameters / Seleção em gradiente de Percoll® sobre os parâmetros espermáticos do sêmen bovino congelado

At in vitro embryo production sperm selection techniques are used, one of them is Percoll® density-gradient. The aim with this study was to evaluate the plasmatic membrane (eosin-nigrosin), acrosomal (trypan blue-Giemsa; fluorescein isothiocyanate conjugated peanut agglutinin lecitin/propidium iodide (FITC-PNA/PI) and chromatin (toluidine blue) integrity, in frozen bovine spermatozoa. Twenty nine samples were analysed at post-thaw (PD) and post-Percoll® moments. Variable expressed in percentage were submitted to ANOVA and used Tuckeys test for mean comparison. The association between variables was made by Pearsons correlation. There were significant differences (p

Na produção in vitro de embriões, técnicas de seleção espermática são usadas, dentre elas, o gradiente descontínuo de Percoll®. O objetivo foi avaliar a integridade da membrana plasmática (eosina-nigrosina), do acrossomo (trypan blue- Giemsa TBG, lecitina do amendoim conjugada ao isotiocianato de fluoresceína associado ao iodeto de propídeo - Fitc-PNA/PI) e da cromatina (azul de toluidina), em espermatozóide bovino congelado. Vinte e nove amostras foram analisadas nos momentos pós-descongelação (PD) e pós-Percoll® (PP). As variáveis expressas em porcentagem foram submetidas à análise de variância e foi empregado o teste de Tuckey para a comparação entre médias. O estudo da associação entre variáveis foi feito pelo teste de correlação de Pearson. Constataram-se, entre os momentos PD e PP, diferenças significativas (p

Selection bovine frozen semen in Percoll® gradient on spermatic parameters / Seleção em gradiente de Percoll® sobre os parâmetros espermáticos do sêmen bovino congelado

At in vitro embryo production sperm selection techniques are used, one of them is Percoll® density-gradient. The aim with this study was to evaluate the plasmatic membrane (eosin-nigrosin), acrosomal (trypan blue-Giemsa; fluorescein isothiocyanate conjugated peanut agglutinin lecitin/propidium iodide (FITC-PNA/PI) and chromatin (toluidine blue) integrity, in frozen bovine spermatozoa. Twenty nine samples were analysed at post-thaw (PD) and post-Percoll® moments. Variable expressed in percentage were submitted to ANOVA and used Tuckeys test for mean comparison. The association between variables was made by Pearsons correlation. There were significant differences (p

Na produção in vitro de embriões, técnicas de seleção espermática são usadas, dentre elas, o gradiente descontínuo de Percoll®. O objetivo foi avaliar a integridade da membrana plasmática (eosina-nigrosina), do acrossomo (trypan blue- Giemsa TBG, lecitina do amendoim conjugada ao isotiocianato de fluoresceína associado ao iodeto de propídeo - Fitc-PNA/PI) e da cromatina (azul de toluidina), em espermatozóide bovino congelado. Vinte e nove amostras foram analisadas nos momentos pós-descongelação (PD) e pós-Percoll® (PP). As variáveis expressas em porcentagem foram submetidas à análise de variância e foi empregado o teste de Tuckey para a comparação entre médias. O estudo da associação entre variáveis foi feito pelo teste de correlação de Pearson. Constataram-se, entre os momentos PD e PP, diferenças significativas (p