Cell-cell adherence as a selection method for the generation of anti-melanoma monoclonal antibodies.

The aim of the present study was to obtain monoclonal antibodies (mAbs) recognising human melanoma-associated antigens after immunisation of BALB/c mice with a 70-150 kDa membrane fraction from melanoma tumour tissues. Screening of specific antibody- producing hybridomas was performed using a novel cell-cell adherence method with the melanoma cell line M-14. Three mAbs of IgG1 isotype were selected: Mel-1, Mel-2 and Mel-3 which recognised the immunogen by ELISA and stained several melanoma cell lines positive in immunofluorescence. The molecular weight of the antigen was studied by different methods; a 170-kDa band was identified following immunoblotting of tumour lysate and a 72-kDa band was observed following immunoaffinity purification. Cell-cell adherence appears to be a reliable procedure for the generation of mAbs against native cellular antigens.

Induction of anti-idiotypic (ab2) and anti-anti-idiotypic (ab3) antibodies in patients treated with the mouse monoclonal antibody 17-1A (ab1). Relation to the clinical outcome--an important antitumoral effector function?

Forty-three patients with metastatic colorectal carcinoma (CRC) were treated with the unconjugated mouse monoclonal antibody (MAb) 17-1A (ab1) only. The presence of antiidiotypic antibodies (ab2) and anti-antiidiotypic antibodies (ab3) were analyzed using an ELISA technique and a mixed hemadsorption assay respectively. Ninety-five percent (41/43) of the patients developed ab2 both of the IgM and the IgG classes. Forty-seven percent (20/43) of the patients had detectable ab3 after therapy, two of them also before administration of MAb 17-1A. Binding in vitro of ab3 (ab1) to CRC cells could be specifically inhibited by ab1. Ab3 bound to human monoclonal antiidiotypic antibodies and to a goat antiidiotypic antibody (ab2). Both these ab2 were directed against MAb 17-1A (ab1). There was a strong correlation between the presence of ab3 and the clinical outcome. Ab3+ patients survived significantly longer than those who did not develop ab3 antibodies, 80 weeks vs 38 weeks (p less than 0.001). A statistically significant correlation was found between the presence of ab3 and the anti-tumor response (CR + PR + MR + SD) (p = 0.01). Thus, induction of an antiidiotypic cascade seems to be an important antitumor effector function of MAb in the treatment of cancer patients.

Tropical treatment of cutaneous T-cell lymphoma skin lesions with the mouse anti-CD6 monoclonal antibody IOR-T1 / Tratamiento tópico de lesiones de piel en linfomas cutáneos de células T con el anticuerpo monoclonal murino anti-Cd6 IOR-T1

Los linfomas cutáneos a células T (CTCL) constituyen un grupo de enfermedades neoplásicas caracterizadas por infiltrados de células T malignas en piel, con una pobre respuesta a la terapia convencional. La aplicación intravenosa de anticuerpos monoclonales (AcM) contra antígenos de diferenciación de células T ha sido experimentalmente evaluada como modalidad terapéutica en estas enfermedades, con respuestas antitumorales limitadas. El IOR-T1 es un Acm de ratón del isotipo IgG2a dirigido contra el antígeno CD6. Este anticuerpo monoclonal identifica una alta proporción de células T malignas en pacientes con CTCL y no induce la modulación edel antígeno. En el presente artículo reportamos la regresión de placas cutáneas limitadas en ytraes pacientes de CTCL que fueron tratados con una crema neutra hidrofilica que contenía 3 mg/g de IOR-T1. La crema fue aplicada tres veces al día durante un mes. En lesiones similares de estos pacientes, tratadas con un AcM anti antigeno carcinoembrionario, o placebo (solo crema), no se observó efecto alguno sobre las características de las lesiones. El diseño de este estudio y sus resultados indican que el IOR-T1 es absorbido a través de la piel y produce importantes cambios en las lesiones, compatibles con una respuesta antitumoral objetiva. Nuestros resultados sugieren la posibilidad de que la aplicación tópica de AcM pueda convertirse en una nueva modalidad terapéutica adyuvante en CTCL

Estudio de la modulación antigénica por los anticuerpos monoclonales (AcM) anti-células T / Antigenic modulation by anti T-cell monoclonal antibodies

En el presente trabajo se analizó el efecto de los anticuerpos monoclonales (AcM) anti-células T sobre la expresión de los antígenos T en los linfocitos de la sangre periférica, utilizando los AcM IOR-T1 (CD6), IOR-T3 (CD3), IOR-T3A (CD3), IOR-T4 (CD4) e IOR-T8 (CD8). Se encontró que los AcM IOR-T3 e IOR-T3A inducen pérdida de los receptores de membrana y este efecto no está asociado a la expresión de los antígenos reconocidos por los AcM IOR-T1, IOR-T4 e IOR-T8, dado que estos antígenos están presentes en las células moduladas T3 y T3A negativas. Se sugiere la utilidad de los AcM IOR-T3 e IOR-T3A como inmunosupresores, así como la posibilidad de emplear el AcM IOR-T1 en pacientes con cáncer

Anticuerpos monoclonales contra el antígeno carcinoembrionario en ensayos inmunohistoquímico e inmunoquimicos / Monoclonal antibodies against carcinoembryonic antigen in immunohistochemical and immunochemical assays

En el presente trabajo se reporta la obtención de cinco clones de hibridomas de ratón, secretores de anticuerpos monoclonales que reconocen una preparación de antígeno carcinoembrionario (CEA). Durante el proceso de tamizaje y selección de estos clones, se empleó fundamentalmente un sistema de radioinmunoensayo, donde se compararon los sobrenadantes de cultivo o los ascitis tumorales con un antisuero policlonal de referencia, con respecto a su enlazamiento y especificidad por 125I-CEA. Los anticuerpos monoclonales seleccionados pertenecen a las clases G y M de inmunoglobulinas de ratón, y dos de ellos manifestaron bajo o ningún reconocimiento del antígeno de reactividad cruzada no específico (NCA). Los anticuerpos IOR-CEA 3 (IgM) e IOR-CEA 5 (IgG1) se estudiaron para su reconocimiento de tejidos fetales humanos, lesiones benignas de la mama, y cánceres de mama, pulmón y colon. El IOR-CEA 3 puede ser utilizado para estudios de confirmación histológica diagnóstica por técnica de inmunofluorescencia indirecta en tejido fresco. Los anticuerpos IOR-CEA 1 (IgG1) e IOR-CEA 2 (IgM) se ensayaron mediante diferentes combinaciones en un sistema ELISA para conocer su capacidad de detectar CEA purificado. Los resultados preliminares indican un adecuado nivel de reconocimiento cuando se utiliza como primer anticuerpo el antisuero policlonal anti-CEA de referencia y el monoclonal IOR-CEA 1 como segundo anticuerpo