RESUMO
Os processos de reparo da polpa dentária frente a procedimentosconservadores passam, em geral, pelo confronto entre possíveismicrorganismos presentes na área da exposição e as células responsáveispela diferenciação e produção de tecido mineralizado. Entretanto, a literaturaainda necessita de informações sobre o efeito direto de produtos bacterianossobre este processo. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos dolipopolissacarídeo (LPS) bacteriano (E. coli) sobre células progenitoras dapolpa dental, utilizando-se condições basais e com mineralização préinduzidapor meio osteogênico. Para isso, células progenitoras caracterizadas foram submetidas a diferentes concentrações de LPS bacteriano (com ou sem indutor da mineralização [lM]), para observação da atividade de fosfatase alcalina (ALP). A concentração mínima de 200 ng/ml,para se verificar alteração de atividade enzimática de ALP, foi usada para seobservar os efeitos funcionais de mineralização (pelo alizarin vermelho -ARS), expressão das citocinas IL-1β e TNF-α, além da expressão dos genesDSPP e DMP-1. Os dados quantitativos foram analisados por ANOVA e testede Tukey. As células em meio osteogênico com as diferentes concentrações de LPS apresentaram baixa atividade da ALP no curto prazo, comparadas às tratadas com meio α-MEM. Estas apresentaram alta atividade, comparadas ao controle. 200 ng/ml do LPS afetaram o processo de mineralização ao longo do tempo, reduzindo a ação de mineralização dos grupos que o associaram ao indutor de mineralização. Houve expressão de IL-1β e TNF-α para todos os grupos em todos os tempos, além disso, para a IL-1β, o grupo que associou os 200ng/ml de LPS com o meio indutor após 7 diasapresentou maior expressão. Houve expressão do gene DMP-1 e nãoexpressão de DSPP e ocorreu uma maior expressão gênica nos grupostratados com meio indutor da mineralização no gene DMP-1. Esses achados sugerem que o potencial inflamatório do LPS sobre as células progenitoras da polpa..
Dental pulp repair processes due to conservative procedures are, in general,affected by the conflicts between possible microorganisms at the area ofexposure and cells responsible for differentiation and production ofmineralized tissue. However, the literature still lacks information on howbacterial products affect these processes directly. The purpose of this studywas to evaluate the bacterial lipopolysaccharide (E. coli LPS) effects on dental pulp progenitor cells, regarding the expression of differentiation genesand function of mineralization, using basal conditions and pre-inducedmineralization by osteogenic media. Characterized progenitor cells wasinitially submitted to different LPS concentrations (with or without osteogenic medium [lM]), to observe alkaline phosphatase activity (ALP). The minimal concentration (200 ng/ml) to observe phosphatase enzymatic activity was used to assess the functional mineralization effects (by alizarin red staining - ARS), cytokine production (IL-1β e TNF-α), besides the gene expression for odontoblast differentiation markers (DSPP and DMP-1). Quantitative data will be statistically analyzed by ANOVA and Tukeys test. Cells in osteogenic medium with different concentrations of LPS showed low ALP activity shortterm compared to those treated with α-MEM. These showed high activity, compared to control. 200 ng/ml of LPS did affect the mineralization process over time, reducing the action of mineralization of the groups that haveassociated LPS with the IM. There was expression of IL-1β and TNF-α for allgroups at all times, additionally, IL-1β for the group that has associated 200ng/ml of LPS with osteogenic media after 7 days showed higher expression.There was expression of DMP-1 and DSPP genes and the expression ingroups treated with IM was greater in DMP-1. These findings suggest that theinflammatory potential of LPS on the pulp progenitor cells contribute to anearly mineralization ...
