Desenvolvimento embrionário in vitro de embriões bovinos após a criopreservação pelo método one step, utilizando o etilenoglicol associado com a sacarose

Foram utilizadas oito novilhas mestiças Holandês x Zebu como doadoras de embriões, no intuito de avaliar a capa. cidade de desenvolvimento. embrionário após o procedimento de reidratação one step, utilizando o etilenoglicolassociado à sacarose como crioprotetores. Os embriões, coletados entre o sexto e o sétimo dia após o estro, foramavaliados morfologicamente, distribuídos aleatoriamente em dois tratamentos. Os embriões foram cultivados in vitroem monocamada de células da tuba uterina. Após 48 horas de cultivo in vitro, os embriões foram avaliados quantoao grau de desenvolvimento embrionário e número de células. Não foram observadas diferenças (p > 0,05} na taxade desenvolvimento embrionário e no número de células entre os tratamentos. Estes resultados sugerem que acongelação e descongelação pelo método one step utilizando o etilenoglicol associado à sacarose, conforme procedimentosdefinidos no experimento, é um método viável, e que poderia ser utilizado na rotina de tecnologia deembriões.

Sincronização do estro em bovinos de acordo com a fase do ciclo estral

Utilizaram-se 133 novilhas mestiças holandês-zebu,como receptoras, num programa de transferência deembrião. Esses animais tiveram o estro sincronizado com0,375 mg de cloprostenol sádico intravulvar em duas fasesdo ciclo estral. No grupo 1 (T1) foram feitas 79 aplicaçõesdo tratamento entre o 5º e 8º dia do ciclo estral e nogrupo 2 (T2) 128 aplicações entre o 9º e 17º dia. Os animaisforam mantidos em piquetes com rufiões e tiveram oestro observado três vezes ao dia (30 min. cada). A eficiênciade sincronização foi de 63,4% para T1 contra 80,2%para T2 (p 0,05). O tempo decorrido entre a aplicação eo início do estro foi de 57,44 ± 1 O, 13 h para T1 e 71 ,87 ±22,02 h para T2 (p 0,01 ). Concluiu-se que a fase do cicloestral, na qual se aplicou o tratamento, influenciou no intervaloaté o estro (maior em T2) e na eficiência da sincronização(maior em T2).

Avaliação da morfologia de oócitos imaturos de bovinos criopreservados em diferentes concentrações de 1 ,2 propanediol

O objetivo deste trabalho foi estudar a morfologia de oócitos imaturos de bovinos abatidos em matadouro, frente àcriopreservação clássica com dois gradientes de concentração diferentes de crioprotetor. No tratamento 1, utilizou-se1 ,6M de 1 ,2 propanediol, onde os oócitos foram desidratados em 3 etapas crescentes (0,53; 1 ,06 e 1 ,6M), à temperaturaambiente e congelados utilizando-se o método clássico. A descongelação foi realizada em banho Maria a 37C por30" e reidratação em três etapas decrescentes (1 ,6; 1,06 e 0,53M), acrescidos de 0,25M de sacarose cada. No tratamento2 foi utilizado 2,0M de 1,2 propanediol, de maneira semelhante ao tratamento 1, com desidratação contendo 0,7;1,4 e 2,0M e reidratação 2,0; 1,4 e 0,7M. Após a reidratação os oócitos foram lavados em meio TCM 199 e levados paramaturação in vitro. O grupo controle foi constituído de oócitos recém-colhidos, colocados para maturação por 24h emmeio TCM 199 com 10% de SVC e FSH em co-cultura, com 5% C02 no ar a 39C. Os resultados foram semelhantes(P>0.05) para as duas concentrações de propanediol utilizadas, após a descongelação e reidratação sendo que69,5% (n=308) dos oócitos apresentaram morfologia considerada normal, 5,2% (n=308) de desnudos e 25,3% (n=308)de degenerados. Entretanto, após maturação in vitro, 19,15 % (n=308) oócitos apresentaram rompimento da "zonapelúcida".

Sincronização do estro em bovinos de acordo com a fase do ciclo estral

Utilizaram-se 133 novilhas mestiças holandês-zebu,como receptoras, num programa de transferência deembrião. Esses animais tiveram o estro sincronizado com0,375 mg de cloprostenol sádico intravulvar em duas fasesdo ciclo estral. No grupo 1 (T1) foram feitas 79 aplicaçõesdo tratamento entre o 5º e 8º dia do ciclo estral e nogrupo 2 (T2) 128 aplicações entre o 9º e 17º dia. Os animaisforam mantidos em piquetes com rufiões e tiveram oestro observado três vezes ao dia (30 min. cada). A eficiênciade sincronização foi de 63,4% para T1 contra 80,2%para T2 (p 0,05). O tempo decorrido entre a aplicação eo início do estro foi de 57,44 ± 1 O, 13 h para T1 e 71 ,87 ±22,02 h para T2 (p 0,01 ). Concluiu-se que a fase do cicloestral, na qual se aplicou o tratamento, influenciou no intervaloaté o estro (maior em T2) e na eficiência da sincronização(maior em T2).

Avaliação da morfologia de oócitos imaturos de bovinos criopreservados em diferentes concentrações de 1 ,2 propanediol

O objetivo deste trabalho foi estudar a morfologia de oócitos imaturos de bovinos abatidos em matadouro, frente àcriopreservação clássica com dois gradientes de concentração diferentes de crioprotetor. No tratamento 1, utilizou-se1 ,6M de 1 ,2 propanediol, onde os oócitos foram desidratados em 3 etapas crescentes (0,53; 1 ,06 e 1 ,6M), à temperaturaambiente e congelados utilizando-se o método clássico. A descongelação foi realizada em banho Maria a 37C por30" e reidratação em três etapas decrescentes (1 ,6; 1,06 e 0,53M), acrescidos de 0,25M de sacarose cada. No tratamento2 foi utilizado 2,0M de 1,2 propanediol, de maneira semelhante ao tratamento 1, com desidratação contendo 0,7;1,4 e 2,0M e reidratação 2,0; 1,4 e 0,7M. Após a reidratação os oócitos foram lavados em meio TCM 199 e levados paramaturação in vitro. O grupo controle foi constituído de oócitos recém-colhidos, colocados para maturação por 24h emmeio TCM 199 com 10% de SVC e FSH em co-cultura, com 5% C02 no ar a 39C. Os resultados foram semelhantes(P>0.05) para as duas concentrações de propanediol utilizadas, após a descongelação e reidratação sendo que69,5% (n=308) dos oócitos apresentaram morfologia considerada normal, 5,2% (n=308) de desnudos e 25,3% (n=308)de degenerados. Entretanto, após maturação in vitro, 19,15 % (n=308) oócitos apresentaram rompimento da "zonapelúcida".

Desenvolvimento embrionário in vitro de embriões bovinos após a criopreservação pelo método one step, utilizando o etilenoglicol associado com a sacarose

Foram utilizadas oito novilhas mestiças Holandês x Zebu como doadoras de embriões, no intuito de avaliar a capa. cidade de desenvolvimento. embrionário após o procedimento de reidratação one step, utilizando o etilenoglicolassociado à sacarose como crioprotetores. Os embriões, coletados entre o sexto e o sétimo dia após o estro, foramavaliados morfologicamente, distribuídos aleatoriamente em dois tratamentos. Os embriões foram cultivados in vitroem monocamada de células da tuba uterina. Após 48 horas de cultivo in vitro, os embriões foram avaliados quantoao grau de desenvolvimento embrionário e número de células. Não foram observadas diferenças (p > 0,05} na taxade desenvolvimento embrionário e no número de células entre os tratamentos. Estes resultados sugerem que acongelação e descongelação pelo método one step utilizando o etilenoglicol associado à sacarose, conforme procedimentosdefinidos no experimento, é um método viável, e que poderia ser utilizado na rotina de tecnologia deembriões.