RESUMO
Background: The success of fertilization is directly associated with semen quality and the sperm preparation. Considering the common use of cryopreserved spermatozoa, there is a need to develop strategies for sperm preparation in order to achieve a sperm sample of high quality through a rigorous selection of sperm. Thus, sperm cells are being more extensively investigate. This study aimed evaluating the influence of different sperm selection techniques on ram sperm parameters in semen preparation.Materials, Methods & Results: Frozen-thawed commercial semen from 10 Santa Inês rams was subjected to either: swim-up, Percoll, mini-Percoll, sperm washing by centrifugation or a control group. After each technique, samples were incubated at 37C for 1 h, 2 h and 3 h. At post-selection moment (0 h) and at each interval, sperm recovery rate, motility, capacitation and plasma membrane (PM) integrity were analyzed. The lowest (P 0.05) recovery rate was recorded after swim-up (1.0 ± 0.3%), whilst the others were similar (P > 0.05). Most part of motility parameters were not affected (P > 0.05) by the technique at 0 h; just swim-up obtained higher (P 0.05) values for VSL (41.8 ± 11.1) and VAP (46.9 ± 11.2). Overall, swim-up presented higher (P 0.05) values for most of motility parameters over time of incubation. The control group led to more (P 0.05) capacitated
RESUMO
Background: The success of fertilization is directly associated with semen quality and the sperm preparation. Considering the common use of cryopreserved spermatozoa, there is a need to develop strategies for sperm preparation in order to achieve a sperm sample of high quality through a rigorous selection of sperm. Thus, sperm cells are being more extensively investigate. This study aimed evaluating the influence of different sperm selection techniques on ram sperm parameters in semen preparation.Materials, Methods & Results: Frozen-thawed commercial semen from 10 Santa Inês rams was subjected to either: swim-up, Percoll, mini-Percoll, sperm washing by centrifugation or a control group. After each technique, samples were incubated at 37C for 1 h, 2 h and 3 h. At post-selection moment (0 h) and at each interval, sperm recovery rate, motility, capacitation and plasma membrane (PM) integrity were analyzed. The lowest (P 0.05) recovery rate was recorded after swim-up (1.0 ± 0.3%), whilst the others were similar (P > 0.05). Most part of motility parameters were not affected (P > 0.05) by the technique at 0 h; just swim-up obtained higher (P 0.05) values for VSL (41.8 ± 11.1) and VAP (46.9 ± 11.2). Overall, swim-up presented higher (P 0.05) values for most of motility parameters over time of incubation. The control group led to more (P 0.05) capacitated
RESUMO
Background: The success of fertilization is directly associated with semen quality and the sperm preparation. Considering the common use of cryopreserved spermatozoa, there is a need to develop strategies for sperm preparation in order to achieve a sperm sample of high quality through a rigorous selection of sperm. Thus, sperm cells are being more extensively investigate. This study aimed evaluating the influence of different sperm selection techniques on ram sperm parameters in semen preparation.Materials, Methods & Results: Frozen-thawed commercial semen from 10 Santa Inês rams was subjected to either: swim-up, Percoll, mini-Percoll, sperm washing by centrifugation or a control group. After each technique, samples were incubated at 37C for 1 h, 2 h and 3 h. At post-selection moment (0 h) and at each interval, sperm recovery rate, motility, capacitation and plasma membrane (PM) integrity were analyzed. The lowest (P 0.05) recovery rate was recorded after swim-up (1.0 ± 0.3%), whilst the others were similar (P > 0.05). Most part of motility parameters were not affected (P > 0.05) by the technique at 0 h; just swim-up obtained higher (P 0.05) values for VSL (41.8 ± 11.1) and VAP (46.9 ± 11.2). Overall, swim-up presented higher (P 0.05) values for most of motility parameters over time of incubation. The control group led to more (P 0.05) capacitated
RESUMO
Background: The success of fertilization is directly associated with semen quality and the sperm preparation. Considering the common use of cryopreserved spermatozoa, there is a need to develop strategies for sperm preparation in order to achieve a sperm sample of high quality through a rigorous selection of sperm. Thus, sperm cells are being more extensively investigate. This study aimed evaluating the influence of different sperm selection techniques on ram sperm parameters in semen preparation.Materials, Methods & Results: Frozen-thawed commercial semen from 10 Santa Inês rams was subjected to either: swim-up, Percoll, mini-Percoll, sperm washing by centrifugation or a control group. After each technique, samples were incubated at 37C for 1 h, 2 h and 3 h. At post-selection moment (0 h) and at each interval, sperm recovery rate, motility, capacitation and plasma membrane (PM) integrity were analyzed. The lowest (P 0.05) recovery rate was recorded after swim-up (1.0 ± 0.3%), whilst the others were similar (P > 0.05). Most part of motility parameters were not affected (P > 0.05) by the technique at 0 h; just swim-up obtained higher (P 0.05) values for VSL (41.8 ± 11.1) and VAP (46.9 ± 11.2). Overall, swim-up presented higher (P 0.05) values for most of motility parameters over time of incubation. The control group led to more (P 0.05) capacitated
RESUMO
Background: The success of fertilization is directly associated with semen quality and the sperm preparation. Considering the common use of cryopreserved spermatozoa, there is a need to develop strategies for sperm preparation in order to achieve a sperm sample of high quality through a rigorous selection of sperm. Thus, sperm cells are being more extensively investigate. This study aimed evaluating the influence of different sperm selection techniques on ram sperm parameters in semen preparation.Materials, Methods & Results: Frozen-thawed commercial semen from 10 Santa Inês rams was subjected to either: swim-up, Percoll, mini-Percoll, sperm washing by centrifugation or a control group. After each technique, samples were incubated at 37C for 1 h, 2 h and 3 h. At post-selection moment (0 h) and at each interval, sperm recovery rate, motility, capacitation and plasma membrane (PM) integrity were analyzed. The lowest (P 0.05) recovery rate was recorded after swim-up (1.0 ± 0.3%), whilst the others were similar (P > 0.05). Most part of motility parameters were not affected (P > 0.05) by the technique at 0 h; just swim-up obtained higher (P 0.05) values for VSL (41.8 ± 11.1) and VAP (46.9 ± 11.2). Overall, swim-up presented higher (P 0.05) values for most of motility parameters over time of incubation. The control group led to more (P 0.05) capacitated
RESUMO
Background: The success of fertilization is directly associated with semen quality and the sperm preparation. Considering the common use of cryopreserved spermatozoa, there is a need to develop strategies for sperm preparation in order to achieve a sperm sample of high quality through a rigorous selection of sperm. Thus, sperm cells are being more extensively investigate. This study aimed evaluating the influence of different sperm selection techniques on ram sperm parameters in semen preparation.Materials, Methods & Results: Frozen-thawed commercial semen from 10 Santa Inês rams was subjected to either: swim-up, Percoll, mini-Percoll, sperm washing by centrifugation or a control group. After each technique, samples were incubated at 37C for 1 h, 2 h and 3 h. At post-selection moment (0 h) and at each interval, sperm recovery rate, motility, capacitation and plasma membrane (PM) integrity were analyzed. The lowest (P 0.05) recovery rate was recorded after swim-up (1.0 ± 0.3%), whilst the others were similar (P > 0.05). Most part of motility parameters were not affected (P > 0.05) by the technique at 0 h; just swim-up obtained higher (P 0.05) values for VSL (41.8 ± 11.1) and VAP (46.9 ± 11.2). Overall, swim-up presented higher (P 0.05) values for most of motility parameters over time of incubation. The control group led to more (P 0.05) capacitated
RESUMO
The aim of this study was to evaluate the effect of a 20% increase in dietary energy during short-term estrus induction treatment on the reproductive parameters of Santa Inês ewes. Females (n=43) were allocated into two experimental groups according to the amount of energy inclusion in the diet: maintenance diet or maintenance diet plus 20% energy. Ultrasound examinations were performed in order to detect ovulation. To assess sexual behavior, ewes were teased and further mated. Blood samples were collected for the determination of glucose and insulin concentrations. There was no difference (P>0.05) between groups in the following categories: ovulation rate (80.00% vs. 60.00%), largest follicle diameter (6.00 ± 0.20 vs. 5.90 ± 0.60), interval from device removal to ovulation (52.80 ± 14.87 vs. 59.01 ± 8.34 hours), animals in estrus (75.00% vs. 65.21%), interval from device removal to estrus (30.00 ± 15.49 vs. 30.00 ± 13.35 hours) and conception rate (50.00% vs. 21.73%). There were differences (P<0.05) in the concentrations of insulin and glucose. It can be concluded that the 20% increase in energy in the diet during short-term estrus induction treatment did not affect the reproductive parameters studied.(AU)
O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do aumento em 20% da energia da dieta durante um protocolo curto de sincronização do estro sobre os parâmetros reprodutivos e metabólicos em ovelhas da raça Santa Inês. As ovelhas (n=43) foram distribuídas em dois grupos experimentais de acordo com a quantidade de energia incluída na dieta, onde foram utilizadas uma dieta de manutenção e uma dieta de manutenção acrescida em 20% de energia. Exames ultrassonográficos foram realizados para detectar a ovulação, bem como o diâmetro dos folículos. Para avaliação do comportamento sexual as ovelhas foram rufiadas. Foram coletadas amostras de sangue para determinação das concentrações plasmáticas de glicose e insulina. Não houve diferença (P>0,05) entre os grupos para: taxa de animais ovulando (80% vs 60%), diâmetro do maior folículo (6,00 ± 0,20 vs 5,90 ± 0,60), intervalo da retirada do implante à ovulação (52,80 ± 14,87 vs 59,01 ± 8,34 horas), animais em estro (75,00% vs 65,21%), intervalo da retirada do implante ao estro (30,00 ± 15,49 vs 30,00 ± 13,35 horas) e taxa de concepção (50,00% vs 21,73%). Houve diferença (P<0,05) nas concentrações de insulina e glicose. Pode-se concluir que o aumento em 20% da energia da dieta durante um protocolo curto de sincronização do estro não alterou os parâmetros reprodutivos.(AU)
Assuntos
Animais , Ovinos , Suplementos Nutricionais/análise , Reprodução , Estro , Glucose , InsulinaRESUMO
The aim of this study was to evaluate the effect of a 20% increase in dietary energy during short-term estrus induction treatment on the reproductive parameters of Santa Inês ewes. Females (n=43) were allocated into two experimental groups according to the amount of energy inclusion in the diet: maintenance diet or maintenance diet plus 20% energy. Ultrasound examinations were performed in order to detect ovulation. To assess sexual behavior, ewes were teased and further mated. Blood samples were collected for the determination of glucose and insulin concentrations. There was no difference (P>0.05) between groups in the following categories: ovulation rate (80.00% vs. 60.00%), largest follicle diameter (6.00 ± 0.20 vs. 5.90 ± 0.60), interval from device removal to ovulation (52.80 ± 14.87 vs. 59.01 ± 8.34 hours), animals in estrus (75.00% vs. 65.21%), interval from device removal to estrus (30.00 ± 15.49 vs. 30.00 ± 13.35 hours) and conception rate (50.00% vs. 21.73%). There were differences (P<0.05) in the concentrations of insulin and glucose. It can be concluded that the 20% increase in energy in the diet during short-term estrus induction treatment did not affect the reproductive parameters studied.
O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do aumento em 20% da energia da dieta durante um protocolo curto de sincronização do estro sobre os parâmetros reprodutivos e metabólicos em ovelhas da raça Santa Inês. As ovelhas (n=43) foram distribuídas em dois grupos experimentais de acordo com a quantidade de energia incluída na dieta, onde foram utilizadas uma dieta de manutenção e uma dieta de manutenção acrescida em 20% de energia. Exames ultrassonográficos foram realizados para detectar a ovulação, bem como o diâmetro dos folículos. Para avaliação do comportamento sexual as ovelhas foram rufiadas. Foram coletadas amostras de sangue para determinação das concentrações plasmáticas de glicose e insulina. Não houve diferença (P>0,05) entre os grupos para: taxa de animais ovulando (80% vs 60%), diâmetro do maior folículo (6,00 ± 0,20 vs 5,90 ± 0,60), intervalo da retirada do implante à ovulação (52,80 ± 14,87 vs 59,01 ± 8,34 horas), animais em estro (75,00% vs 65,21%), intervalo da retirada do implante ao estro (30,00 ± 15,49 vs 30,00 ± 13,35 horas) e taxa de concepção (50,00% vs 21,73%). Houve diferença (P<0,05) nas concentrações de insulina e glicose. Pode-se concluir que o aumento em 20% da energia da dieta durante um protocolo curto de sincronização do estro não alterou os parâmetros reprodutivos.
Assuntos
Animais , Estro , Glucose , Insulina , Ovinos , Reprodução , Suplementos Nutricionais/análiseRESUMO
The objective was to evaluate if supplemental LH given at the end of FSH treatment would synchronize the time of ovulation and increase the ovulation rate and embryo yield in Santa Ines ewes. Twenty superovulatory (SOV) programs were accomplished in cross-over design (60d interval). On D0, a CIDR device was inserted, and the device was replaced with a new one 7 days later, when 37.5µg of d-cloprostenol was administered. On D12, we started the SOV treatment, administering 256mg of pFSH 8 times, 12h apart. On D14, the CIDR was removed, and 200IU of eCG and 37.5µg of d-cloprostenol were administered. On D15, the ewes were allocated into one of two groups, a Control group (n=10) that received no supplemental LH and a LH group (n=10) treated with 7.5mg of LH 24h after CIDR removal. Artificial inseminations (AI) were performed 42 and 48h after CIDR removal. The ovarian structures were evaluated by laparoscopy immediately before each AI and 5 days later (D21) when the embryos were collected. The LH ewes ovulated more frequently (P=0.05) before 42h than between 42 and 48h. Treatment with LH tended to increase the frequency of CL and to decrease the anovulatory follicles (P=0.08). The supplemental LH increased the frequency of ewes with a high SOV response (11 CL; P=0.05). In conclusion, supplemental LH increased the frequency of ewes with high SOV response and ovulating prior to 42h, however, there was no synchrony between ovulations. The supplemental LH also decreased the frequency of anovulatory follicles, although the ovulation rate and embryo yield were unaffected.
O objetivo deste trabalho foi avaliar se a suplementação com LH ao final do tratamento gonadotrófico sincroniza o tempo das ovulações e incrementa a taxa de ovulação e produção de embriões em ovelhas Santa Inês. Vinte programas de superovulação (SOV) foram realizados em delineamento cross-over (intervalo de 60 dias). No D0, um CIDR foi inserido, sendo trocado por um novo sete dias após, quando 37,5µg de d-cloprostenol foram administradas. No D12, iniciou-se o tratamento com 256mg de pFSH em 8 administrações (12/12h). No D14, o CIDR foi retirado, 200UI de eCG e 37,5µg de d-cloprostenol foram administradas. No D15, as ovelhas foram alocadas em um dos dois grupos: Controle (n=10), sem suplementação com LH, e LH (n=10), tratado com 7,5mg de LH, 24h após a remoção do CIDR. Inseminações artificiais (IA) foram realizadas 42 e 48h após a remoção do CIDR. As estruturas ovarianas foram avaliadas por laparoscopia imediatamente antes de cada IA e 5 dias após, quando os embriões foram colhidos. As ovelhas que receberam o LH tiveram maior frequência de ovulações antes de 42h (P=0,05). O tratamento com LH tendeu em incrementar a frequência de CL e diminuir a de folículos anovulatórios (P=0,08). A suplementação com LH incrementou (P=0,05) a frequência de ovelhas com alta resposta superovulatória (11 CL; P=0,05). Em conclusão, a suplementação com LH incrementou a frequência de ovelhas com alta resposta e ovulações antes de 42h depois da remoção do CIDR, entretanto, não houve sincronia entre as ovulações. A suplementação diminuiu a frequência de folículos anovulatórios, embora a taxa de ovulação e a produção de embriões permaneceram inalteradas.
RESUMO
The objective was to evaluate if supplemental LH given at the end of FSH treatment would synchronize the time of ovulation and increase the ovulation rate and embryo yield in Santa Ines ewes. Twenty superovulatory (SOV) programs were accomplished in cross-over design (60d interval). On D0, a CIDR device was inserted, and the device was replaced with a new one 7 days later, when 37.5µg of d-cloprostenol was administered. On D12, we started the SOV treatment, administering 256mg of pFSH 8 times, 12h apart. On D14, the CIDR was removed, and 200IU of eCG and 37.5µg of d-cloprostenol were administered. On D15, the ewes were allocated into one of two groups, a Control group (n=10) that received no supplemental LH and a LH group (n=10) treated with 7.5mg of LH 24h after CIDR removal. Artificial inseminations (AI) were performed 42 and 48h after CIDR removal. The ovarian structures were evaluated by laparoscopy immediately before each AI and 5 days later (D21) when the embryos were collected. The LH ewes ovulated more frequently (P=0.05) before 42h than between 42 and 48h. Treatment with LH tended to increase the frequency of CL and to decrease the anovulatory follicles (P=0.08). The supplemental LH increased the frequency of ewes with a high SOV response (11 CL; P=0.05). In conclusion, supplemental LH increased the frequency of ewes with high SOV response and ovulating prior to 42h, however, there was no synchrony between ovulations. The supplemental LH also decreased the frequency of anovulatory follicles, although the ovulation rate and embryo yield were unaffected.
O objetivo deste trabalho foi avaliar se a suplementação com LH ao final do tratamento gonadotrófico sincroniza o tempo das ovulações e incrementa a taxa de ovulação e produção de embriões em ovelhas Santa Inês. Vinte programas de superovulação (SOV) foram realizados em delineamento cross-over (intervalo de 60 dias). No D0, um CIDR foi inserido, sendo trocado por um novo sete dias após, quando 37,5µg de d-cloprostenol foram administradas. No D12, iniciou-se o tratamento com 256mg de pFSH em 8 administrações (12/12h). No D14, o CIDR foi retirado, 200UI de eCG e 37,5µg de d-cloprostenol foram administradas. No D15, as ovelhas foram alocadas em um dos dois grupos: Controle (n=10), sem suplementação com LH, e LH (n=10), tratado com 7,5mg de LH, 24h após a remoção do CIDR. Inseminações artificiais (IA) foram realizadas 42 e 48h após a remoção do CIDR. As estruturas ovarianas foram avaliadas por laparoscopia imediatamente antes de cada IA e 5 dias após, quando os embriões foram colhidos. As ovelhas que receberam o LH tiveram maior frequência de ovulações antes de 42h (P=0,05). O tratamento com LH tendeu em incrementar a frequência de CL e diminuir a de folículos anovulatórios (P=0,08). A suplementação com LH incrementou (P=0,05) a frequência de ovelhas com alta resposta superovulatória (11 CL; P=0,05). Em conclusão, a suplementação com LH incrementou a frequência de ovelhas com alta resposta e ovulações antes de 42h depois da remoção do CIDR, entretanto, não houve sincronia entre as ovulações. A suplementação diminuiu a frequência de folículos anovulatórios, embora a taxa de ovulação e a produção de embriões permaneceram inalteradas.
RESUMO
Baseando-se nos mecanismos de interrupção da síntese de PGF2a em bovinos, objetivou-se com este estudo avaliar osefeitos do flunixin meglumine (FM) sobre o comprimento do ciclo estral e sobre os níveis de progesterona, em novilhas e vacasmestiças. Após sincronização dos estros, os animais foram divididos em grupos: controle (cinco vacas e quatro novilhas) etratado (seis vacas e seis novilhas), sendo submetidos à colheita diária de sangue, até o estro subseqüente. Do 13o ao 18o dia,aplicou-se nos animais do grupo tratado 1,65 mg/kg intramuscular de FM, e nos do grupo controle, mesmo volume de soluçãofisiológica. A determinação da concentração sérica de progesterona foi realizada por RIA. Os resultados do comprimento dociclo estral foram comparados entre os grupos e entre animais, pelo teste t de Student, enquanto a concentração de progesteronafoi normalizada em relação à luteólise, e analisada entre os grupos pelo teste t de Tukey (SAS). Não se observou diferença(P>0,05) no comprimento do ciclo estral entre grupos e entre novilhas e vacas, tratadas e não tratadas. O dia do ciclo estral emrelação à concentração de progesterona máxima e inferior a 1,0ng/mL, e a concentração sérica de progesterona entre osanimais do grupo controle e tratado, também foram semelhantes entre os grupos (P>0,05). No entanto, observou-se diferença(P 0,05) na curva que evidencia a queda da proges
RESUMO
Avaliou-se a influência do número de ordenhas diárias sobre o desempenho reprodutivo de 63 vacas mestiças (Holandês-Zebu) com boa condição corporal ao parto, distribuídas em três grupos (G) experimentais: GI vacas ordenhadas uma vez aodia; GII vacas ordenhadas duas vezes ao dia; GIII vacas ordenhadas alternadamente a cada 14 dias, uma ou duas vezesao dia. O retorno ao estro (84,3 dias; 81,7 dias e 71,2 dias); a taxa de manifestação de estro (80,9%; 80,90% e 80,90%); operíodo de serviço (99,0 dias; 114,0 dias e 93,1 dias) e a taxa de gestação até 120 dias pós-parto (66,7%; 57,1%; 66,7%) nãoforam influenciados (P>0,05) pelo aumento do número de ordenhas diárias.
RESUMO
Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito da administração da gonadotrofina coriônica humana (hCG) no quinto e vigésimo dia do ciclo estral sobre a taxa de gestação de cabras da raça Alpina e Saanen, durante a estação de acasalamento induzida por fotoperíodo artificial. Foram utilizados 151 animais, sendo 85 da raça Alpina e 66 da Saanen. Do total, 110 foram submetidas à monta natural e 41 à inseminação artificial. Após a identificação do estro e acasalamento ou inseminação, as fêmeas foram divididas ao acaso, em dois tratamentos:T1 = 1mL de solução salina intramuscular no quinto e vigésimo dia após a cobertura e T2 = 250 UI de hCG no mesmo esquema. A gestação foi verificada por ultra-sonografia trans-retal aos 35 dias após a cobertura. Não houve efeito da administração do hCG sobre a taxa de gestação, taxa de parição e número de fetos nascidos (P>0,05). As diferentes raças empregadas neste estudo também não influenciaram os parâmetros estudados. Independentemente da aplicação do hCG, houve decréscimo significativo na taxa de gestação quando se empregou a inseminação artificial (P
RESUMO
Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito da administração da gonadotrofina coriônica humana (hCG) no quinto e vigésimo dia do ciclo estral sobre a taxa de gestação de cabras da raça Alpina e Saanen, durante a estação de acasalamento induzida por fotoperíodo artificial. Foram utilizados 151 animais, sendo 85 da raça Alpina e 66 da Saanen. Do total, 110 foram submetidas à monta natural e 41 à inseminação artificial. Após a identificação do estro e acasalamento ou inseminação, as fêmeas foram divididas ao acaso, em dois tratamentos:T1 = 1mL de solução salina intramuscular no quinto e vigésimo dia após a cobertura e T2 = 250 UI de hCG no mesmo esquema. A gestação foi verificada por ultra-sonografia trans-retal aos 35 dias após a cobertura. Não houve efeito da administração do hCG sobre a taxa de gestação, taxa de parição e número de fetos nascidos (P>0,05). As diferentes raças empregadas neste estudo também não influenciaram os parâmetros estudados. Independentemente da aplicação do hCG, houve decréscimo significativo na taxa de gestação quando se empregou a inseminação artificial (P
RESUMO
O conhecimento da ultra-estrutura de embriões bovinos, dentro das diferentes sub-espécies permite estabelecer características inerentes a cada uma delas, possibilitando o desenvolvimento de métodos eficientes para estocagem e conservação desses embriões. Diante disso, 17 embriões bovinos, da raça Nelore, foram preparados para análise ultra-estrutural, sob microscopia eletrônica. O processamento dos embriões foi realizado no Departamento de Reprodução Animal da UNESP Jaboticabal. Para tanto, os embriões foram lavados, sucessivas vezes para remoção do SFB, utilizado no meio de transporte, fixados em solução de glutaraldeído a 1% em tampão cacodilato de sódio 0,15M e pH 7,6, desidratados em soluções com concentrações crescentes de álcool etílico, pré-incluídos, incluídos em cápsulas BEEM (Better equipment for electron microscopy), contendo resina EPON-812, submetidos em estufa à temperatura de 60oC por 72 horas, para polimerização, e seccionados. Devido às pequenas dimensões, os embriões inicialmente foram submetidos a secções semifinas (0,5 mm), para que a linha de corte propiciasse visualização do trofoblasto (TF) e massa celular interna (MCI). Após a triagem dos cortes, realizaram-se secções ultrafinas (60-70 nm), que foram colhidas em grades de cobre, coradas com acetato de uranila e citrato de chumbo e observadas ao microscópio eletrônico. Dos embriões processados 64,71 % f