RESUMO
In recent years, heat treatment has been used to prevent the development of chilling injury in fruits and vegetables. The acquired tolerance to chilling seen in treated fruit is related to the accumulation of heat shock proteins (HSPs). The positive effect of heat treatment has generally been verified for only a narrow range of treatment intensities and more reliable methods of determining optimal conditions are therefore needed. In this regard, quantitation of HSPs would seem to be an interesting tool for monitoring purposes. As a step toward the development of analytical methodology, the objective of this study was the isolation and characterization of relevant HSPs from plant tissues. Tomato fruits were exposed to a temperature of 38 degrees C for 0, 3, 20 and 27 h, and protein extracts from pericarp were analysed using SDS/PAGE. Analysis revealed the appearance of an intense 21 kDa protein band in treated samples. IEF of this band showed the presence of four major proteins (HSPC1, HSPC2, HSPC3 and HSPC4) with similar pI values. A monospecific polyclonal antiserum was raised in rabbits against purified HSPC1 protein, which cross-reacted with other small heat shock proteins. The major proteins were characterized by MS/MS analysis of tryptic peptides, all having blocked N-termini. The antiserum obtained proved suitable for detecting increased amounts of small heat shock proteins in tomatoes and grapefruits subjected to heat treatment for 24 and 48 h; these treatments were successful in preventing the development of chilling injury symptoms during cold storage. Our data are valuable for the future development of analytical methods to evaluate the optimal protection induced by heat treatment in different fruits.
Assuntos
Frutas/metabolismo , Proteínas de Choque Térmico Pequenas/metabolismo , Temperatura Alta , Proteínas de Plantas/metabolismo , Solanum lycopersicum/metabolismo , Sequência de Aminoácidos , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Proteínas de Choque Térmico Pequenas/química , Proteínas de Choque Térmico Pequenas/isolamento & purificação , Immunoblotting , Dados de Sequência Molecular , Proteínas de Plantas/química , Proteínas de Plantas/isolamento & purificação , Isoformas de Proteínas/química , Isoformas de Proteínas/isolamento & purificação , Isoformas de Proteínas/metabolismo , Análise de Sequência de Proteína/métodos , Espectrometria de Massas por Ionização por ElectrosprayRESUMO
La 5 ß reductasa (Rasa) aumenta después de la eclosión en tejidos esteroidogénicos de la gallina en desarrollo, especialmente en el ovario derecho. La sintetasa del ácido delta aminolevulínico (ALAs) es más activa en estos tejidos que en hígado durante la mayoría de los estadios embrionarios. Pero después de la eclosión sólo aumenta en forma aguda ALAs hepática y adrenal; en ovario izquierdo dicha enzima crece moderadamente y en ovario derecho desciende a valores muy bajos. Cierta relación entre las curvas de ALAs y Rasa durante el desarrollo embrionario del ovario izquierdo y la adrenal sugieren que la 5 ß pregnanediona fuera un inductor natural de la ALAs en estas glándulas endocrinas funcionantes, por lo menos durante sus estadios embrionarios
Assuntos
Embrião de Galinha , Animais , 5-Aminolevulinato Sintetase/metabolismo , Glândulas Suprarrenais/enzimologia , Desenvolvimento Fetal , Fígado/enzimologia , Ovário/enzimologia , Progesterona Redutase/metabolismo , GalinhasRESUMO
La 5 ß reductasa (Rasa) aumenta después de la eclosión en tejidos esteroidogénicos de la gallina en desarrollo, especialmente en el ovario derecho. La sintetasa del ácido delta aminolevulínico (ALAs) es más activa en estos tejidos que en hígado durante la mayoría de los estadios embrionarios. Pero después de la eclosión sólo aumenta en forma aguda ALAs hepática y adrenal; en ovario izquierdo dicha enzima crece moderadamente y en ovario derecho desciende a valores muy bajos. Cierta relación entre las curvas de ALAs y Rasa durante el desarrollo embrionario del ovario izquierdo y la adrenal sugieren que la 5 ß pregnanediona fuera un inductor natural de la ALAs en estas glándulas endocrinas funcionantes, por lo menos durante sus estadios embrionarios (AU)
