Bacterias resistente a los antibióticos en aguas mineromedicinales “Santagua Chachimbiro”, Ecuador / Antibiotic resistant bacteria in mineral medicinal waters “Santagua Chachimbiro”, Ecuador

La biodiversidad bacteriana en las aguas mineromedicinales y sus perfiles de resistencia a los antibióticos es un tema en desarrollo en Ecuador. El objetivo del trabajo fue conocer la microbiota bacteriana y la resistencia a los antibióticos en aguas del balneario “Termas de Santagua Chachimbiro”, Provincia de Imbabura-Ecuador. Se recolectaron 16 muestras de agua. El aislamiento de las colonias bacterianas se obtuvo por la técnica de filtración en membrana, utilizando diferentes medios de cultivos. La identificación se realizó de acuerdo con los esquemas propuestos por MacFaddin (2003), complementados con las pruebas de las galerías Microgen. El perfil de resistencia a los antibióticos se determinó por el método de difusión en placas de Kirby y Bauer (1966). Se aislaron e identificaron 85 cepas bacterianas de las cuales el 61 % resultaron Gram negativas y 39 % Gram positivas. Las especies identificadas fueron Aeromonas caviae, Aeromonas eucrenophila, Aeromonas hydróphila, Aeromonas media, Aeromonas salmonicida, Aeromonas schubertii, Bacillus subtilis, Bacillus mycoides, Bacillus spp, Burkholderia cepacia, Citrobacter freundii, Comamonas spp, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas putida, Pseudomonas stutzeri, Ralstonia pickettii, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus lugdenensis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus spp, Staphylococcus warneri y Staphylococcus xylosus. En cuanto a la resistencia antimicrobiana la mayoría de las Gram negativas fueron resistentes a las penicilinas y cefalosporinas. Las Gram positivas a la oxacilina y penicilinas. El 66,67 % resultaron multirresistentes a más de tres antibióticos. El balneario “Termas de Santagua de Chachimbiro” presenta diversidad de especies bacteriana y la presencia de resistomas ambientales.(AU)

Bacterial biodiversity in mineral medicinal waters and the antibiotic resistance profiles, is a developing topic in Ecuador. The objective of the work was to know the bacterial microbiota and its resistance profiles to antibiotics of the mineral medicinal waters of the Santagua Chachimbiro spa, located in the Province of Imbabura-Ecuador. 16 water samples were collected. The isolation of the bacterial species was carried out by the membrane filtration technique, using different types of culture media. The identification was carried out according to the schemes proposed by MacFaddin (2003), complemented with the tests of the Microgen galleries. The antibiotic resistance profile was determined by the Kirby and Bauer (1966) plate diffusion method. 85 strains were isolate of which 61% were Gram negative and 39% Gram positive. The main species identified were Aeromonas caviae, Aeromonas eucrenophila, Aeromonas hydrophila, Aeromonas media, Aeromonas salmonicida, Aeromonas schubertii, Bacillus subtilis, Bacillus mycoides, Bacillus spp, Burkholderia cepacia, Citrobacter freundii, Comamonas spp, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescenscens, Pseudomonas putida, Pseudomonas stutzeri, Ralstonia pickettii, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus lugdenensis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus spp, Staphylococcus warneri and Staphylococcus xylosus. Regarding antimicrobial resistance, most of the Gram negative strains were resistant to penicillin and cephalosporins. Gram positive to oxacillin and penicillin 66,67% were multiresistant to more than three antibiotics. The “Termas de Santagua de Chachimbiro” spa presents a diversity of bacterial species and the presence of environmental resistomes.(AU)

Diversidad y perfiles de resistencia a los antibióticos en especies de Aeromonas aisladas de ecosistema acuático del ecuador / Diversity and profiles of resistance to antibiotics in species of Aeromonas isolated from the aquatic ecosystem of ecuador

Introducción: En Ecuador se desconoce la diversidad de especies de Aeromonas y sus perfiles de resistencia a los antibióticos en la mayoría de ecosistemas acuáticos. Objetivo: Conocer la diversidad de especies del género Aeromonas y sus perfiles de resistencia a los antibióticos presentes en el balneario de aguas mineromedicinales “Santagua de Chachimbiro” y en el agua del lago volcánico cratérico Cuicocha. Metodología: Se analizaron muestras de agua del balneario “Santagua de Chachimbiro” y del lago volcánico cratérico Cuicocha, ubicados en la provincia de Imbabura-Ecuador. El aislamiento de las especies de Aeromonas se realizó por la técnica de siembra en profundidad y por filtración en membrana utilizando como medio de cultivo el agar R2A y el agar almidón ampicilina. Las bacterias se identificaron siguiendo el esquema propuesto Longa et al., (1997), complementadas con pruebas de las galerías Microgen. El perfil de resistencia a los antibióticos se determinó por el método de difusión en placas de Kirby y Bauer (1966) interpretándose según el CLSI (2019). Resultados: Se lograron identificar un total de 19 cepas del género Aeromonas pertenecientes a 6 especies. Los perfiles de resistencia a los antibióticos muestran diferentes patrones para cada una de las especies, aunque prevalecen las especies multiresistentes a los antibióticos amoxicilina, amoxicilina/ácido clavulánico, aztreonam, eritromicina y tetraciclina. Conclusiones: Se demuestra la presencia de diversas especies de Aeromonas en ambientes acuáticos del Ecuador con variados perfiles de resistencias y multiresistencia a los antibióticos. (AU)

Introduction: In Ecuador, the diversity of Aeromonas species and their resistance profiles to antibiotics in most aquatic ecosystems are unknown. Objective: To know the diversity of species of the genus Aeromonas and their resistance profiles to antibiotics present in the mineralmedicinal water spa “Santagua de Chachimbiro” and in the water of the Cuicocha crater volcanic lake. Methodology: Water samples from the “Santagua de Chachimbiro” spa and from the volcanic crater lake Cuicocha, located in the province of Imbabura-Ecuador, were analyzed. The isolation of the Aeromonas species was carried out by the deep seeding technique and by membrane filtration using R2A agar and ampicillin starch agar as the culture medium. The bacteria were identified following the schemes proposed by Longa et al., (1997), complemented with tests of the Microgen galleries. The antibiotic resistance profile was determined by the plate diffusion method of Kirby and Bauer (1966) interpreted according to the CLSI (2019). Results: A total of 19 strains of the genus Aeromonas belonging to 6 species were identified. Antibiotic resistance profiles show different patterns for each of the species, although species multi-resistant to antibiotics amoxicillin, amoxicillin/clavulanic acid, aztreonam, erythromycin and tetracycline prevail. Conclusions: The presence of various species of Aeromonas in aquatic environments of Ecuador with varied profiles of resistance and multi-resistance to antibiotics is demonstrated. (AU)

COMPONENTES QUÍMICOS Y ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEL ACEITE ESENCIAL DE Lasiocephalus ovatus (Asteraceae) QUE CRECE EN ECUADOR / Chemical components and antimicrobial activity of the essential oil of Lasiocephalus ovatus (Asteraceae) that grows in Ecuador

RESUMEN Ecuador es uno de los países más ricos en biodiversidad y endemismo del mundo, y cerca de 3200 especies de plantas tienen usos medicinales. El objetivo de esta investigación fue evaluar la composición química y el efecto antimicrobiano del aceite esencial de Lasiocephalus ovatus Schltdl. (Asteraceae) colectada en la provincia de Chimborazo, Ecuador. Las partes aéreas de L. ovatus fueron sometidas a hidrodestilación para obtener el aceite esencial, el cual fue analizado mediante cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas. La actividad fue evaluada frente a cinco bacterias y una levadura usando la técnica de microdilución en caldo en microplacas de 96 pozos. El rendimiento del aceite fue de 0,05 % y 27 compuestos fueron identificados, representando 95,45 % de la composición total con un elevado contenido de monoterpenos oxigenados (52,17 %). Los compuestos mayoritarios fueron alcanfor (40,48 %) y 1,2,5,5-tetrametil-1,3-ciclopentadieno (11,90 %), seguido por p-menta-1,5-dien-8-ol (5,23 %) y 1,6-dimetilhepta-1,3,5-trieno (4,69 %). Las bacterias más sensibles a la acción del aceite fueron Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Escherichia coli ATCC 25922 con concentraciones mínimas inhibitorias de 200-400 µg/mL y bactericidas de 800 µg/mL. La inhibición antimicrobiana frente a las bacterias Enterococcus faecalis ATCC 29212, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 y la levadura Candida albicans ATCC 10231 fue baja, con un rango de concentración mínima inhibitoria de 800 a 6400 µg/ mL. Este reporte representa un primer análisis de la actividad antimicrobiana del aceite de L. ovatus, por lo tanto, una contribución importante al estudio del género Lasiocephalus.

ABSTRACT Ecuador is one of the richest countries in biodiversity and endemism in the world, and nearly 3200 plant species have medicinal uses. The aim of this investigation was to evaluate the chemical composition and the antimicrobial effect of essential oil of Lasiocephalus ovatus Schltdl. (Asteraceae) collected at Chimborazo Province, Ecuador. The aerial parts of L. ovatus were subjected to hydrodistillation to obtain essential oil, which was analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry. The activity was evaluated against five bacteria and one yeast using the broth microdilution technique in 96-well microplates. The oil yield was of 0.05 %, and 27 compounds were identified, representing 95.45 % of the total composition with a high content of oxygenated monoterpenes (52.17%). The main compounds were camphor (40.48 %) and 1,2,5,5-tetramethyl-1,3-cyclopentadiene (11.90 %) followed by p-mentha-1,5-dien-8-ol (5.23 %) and 1,6-dimethylhepta-1,3,5-triene (4.69 %). The antimicrobial effect of the essential oil was major against Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Escherichia coli ATCC 25922 with minimum inhibitory concentrations of 200-400 µg/mL and bactericidal of 800 µg/mL. Antimicrobial inhibition against the bacteria Enterococcus faecalis ATCC 29212, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 and the yeast Candida albicans ATCC 10231 was low, with minimum inhibitory concentration ranging from 800 to 6400 µg/mL. This report represents a first study of the chemical composition and antimicrobial activity of the oil of L. ovatus, therefore, an important contribution to the study of the genus Lasiocephalus.