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Biotechniques ; 48(1): 61-4, 2010 Jan.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-20078429

RESUMO

We describe a rapid, simple, and efficient method for recovering glutathione S-transferase (GST)- and His6-tagged maltose binding protein (MBP) fusion proteins from inclusion bodies. Incubation of inclusion bodies with 10% sarkosyl effectively solubilized >95% of proteins, while high-yield recovery of sarkosyl-solubilized fusion proteins was obtained with a specific ratio of Triton X-100 and CHAPS. We demonstrate for the first time that this combination of three detergents significantly improves binding efficiency of GST and GST fusion proteins to gluthathione (GSH) Sepharose.


Assuntos
Glutationa Transferase/isolamento & purificação , Corpos de Inclusão/química , Proteínas Periplásmicas de Ligação/isolamento & purificação , Proteínas Recombinantes de Fusão/isolamento & purificação , Ácidos Cólicos , Escherichia coli/genética , Glutationa Transferase/análise , Glutationa Transferase/genética , Proteínas Ligantes de Maltose , Octoxinol , Proteínas Periplásmicas de Ligação/análise , Proteínas Periplásmicas de Ligação/genética , Dobramento de Proteína , Proteínas Recombinantes de Fusão/análise , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética , Sarcosina/análogos & derivados , Solubilidade
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