Abordagem citogenética e molecular em material de abortos espontâneos / Cytogenetic and molecular evaluation of spontaneous abortion samples

OBJETIVOS: avaliar o desempenho da citogenética e das técnicas de hibridização in situ fluorescente (FISH) e reação em cadeia da polimerase (PCR) no estudo das aneuploidias cromossômicas numéricas e na determinação do sexo fetal em amostras de abortos espontâneos. MÉTODOS: duzentos e dezenove amostras de produtos de abortos espontâneos foram submetidas a estudo citogenético. Deste total, 40 amostras foram também submetidas à técnica de PCR-nested para a determinação do sexo fetal: 32 foram selecionadas devido à falha de crescimento no estudo citogenético e oito foram escolhidas ao acaso. Vinte amostras foram selecionadas para detecção de aneuploidias cromossômicas pela técnica de FISH, utilizando-se sondas para os cromossomos 13, 18, 21, X e Y: 13 casos foram submetidos a FISH devido à falha de crescimento no estudo citogenético e sete foram escolhidos ao acaso. Foi calculada a taxa de sucesso (obtenção de cariótipo) de cada técnica. Para comparação das taxas de sucesso foi utilizado o teste de chi2, sendo considerados significantes resultados com p<0,05. Foi avaliado o índice de acerto entre os resultados das amostras submetidas a mais de um exame, tomando-se como padrão-ouro o resultado do estudo citogenético. RESULTADOS: houve crescimento celular em 84,9 por cento das amostras submetidas a análise citogenética. Em 51,1 por cento dos casos foram encontradas alterações cromossômicas: 65,2 por cento trissomias, 17,9 por cento triploidias, 9,4 por cento tetraploidias, 4,2 por cento monossomia do cromossomo X e 1,1 por cento trissomia dupla, tetrassomia e alteração estrutural. A trissomia mais freqüente foi a do cromossomo 16 (39 por cento). FISH e PCR tiveram taxa de sucesso de 90 por cento, não diferindo significativamente do exame citogenético. Em todos os casos submetidos a mais de um exame os resultados foram concordantes. Nas amostras com falha de crescimento celular no exame citogenético e submetidas a outra técnica, a PCR obteve sucesso em 87,5 por cento e a FISH em 84,6 por cento. CONCLUSAO: o estudo citogenético de restos ovulares de abortamentos espontâneos teve elevada taxa de sucesso e evidenciou anomalias cromossômicas em mais da metade dos casos. As técnicas de biologia molecular (PCR-nested e FISH) complementaram o estudo citogenético e permitiram a obtenção de resultados seguros na detecção de alterações cromossômicas numéricas e na determinação do sexo fetal

Linfócitos T formadores de rosácea estável e nível de receptor solúvel no sobrenadante de cultura de linfócitos de indivíduos normais e de pacientes urêmicos / T lymphocytes form stable rosettes and soluble receptor level in culture medium of lymphocytes of normal person and uremic patients

Em pacientes urêmicos observamos diminuiçäo do número de linfócitos T circulantes que formam rosácea estável a 37 graus (0,26 +- 0,1 linf./ml), em relaçäo ao grupo controle (0,42 +- 0,3 linf./ml). Tanto no grupo normal como de pacientes urêmicos, foi observado decréscimo significativo na porcentagem de dissociaçäo de rosáceas a 37 graus após a estimulaçäo de linfócitos com PHA, em relaçäo a linfócitos circulantes, porém näo foi observada diferença entre os grupos. Embora seja citado aumento no nível de receptor solúvel para E (Rs) em soros de pacientes urêmicos, como confirmado pelos testes preliminares com soro anti-receptor, näo foi observada diferença significativa entre o nível de Rs em sobrenadante de cultura de linfócitos estimulados entre o grupo normal (0,316 +- 0,02 mg/ml) e o grupo de pacientes urêmicos (0,288 +- 0,03 mg/ml). Esses resultados sugerem que o aumento no nível de Rs sérico em pacientes urêmicos, näo se deve ao aumento de linfócitos T circulantes, formadores de rosácea estável, ou mesmo maior liberaçäo de Rs pelos linfócitos estimulados, embora seja citado na literatura que os linfócitos estimulados, formadores de rosácea estável, liberem receptores