Simulation of intrafollicular conditions prevents GVBD in bovine oocytes: a better alternative to affect their developmental capacity after two-step culture.

To increase the developmental competence of bovine oocytes isolated from small, medium, and large follicles (2-3, 3-4, and 4-6 mm in diameter, respectively), we tried to modify the conditions for their in vitro culture. The first step involved conditions maintaining at least for 48 hr a reversible inhibition of the germinal vesicle breakdown (GVBD) and the second step stimulated the resumption of meiosis and completion of nuclear and cytoplasmic maturation during the subsequent 20-22 hr of culture. The effectiveness of this model depended mainly on the medium composition (reduced NaHCO3, substitution of serum with serum albumin, addition of antioxidants (curcumin), increased viscosity by agar, the reduction of oxygen concentration (within 6%-8%), the reduction of the proportion between the number of cumulus-oocyte complexes (COCs), and the reduction of the amount of a medium (within 6-7 mul per COC) to amplify the GVBD-inhibitory effect of oocyte surrounding granulosa cells. The COCs were incubated in clumps of 6-7 COCs. The effectiveness and reversibility of GVBD inhibition depended also on the duration of COCs isolation. The full reversibility of the GV block was controlled morphologically and also by measuring histone H1 and MAP kinase activities. The two-step versus one-step (24 hr) maturation technique was evaluated by the percentage of total and hatched blastocysts at day 9. When compared with one-step maturation, the two-step culture showed a slightly increased proportion of total and hatched blastocysts developed from growing follicles, mainly from the smallest category (13.9% vs. 7.1% and 9.2% vs. 3.3% for total blastocysts and hatched, respectively). However, the two-step culture of oocytes from large regressing follicles substantially reduced the blastocyst yield (9.7% vs. 39.1% and 4.9% vs. 26.7% for total blastocysts and hatched, respectively). The transfer of ten blastocysts (developed after two-step culture) to ten recipients resulted in seven pregnancies.

Concentración plasmática de progesterona y producción embrionaria, en vacas superovuladas bajo condiciones tropicales / Plasma progesterone concentrations and embryo yield in superovulated cows under tropical conditions in the state of Yucatan in Mexico

El presente estudio se realizó en condiciones de campo en tres ranchos de la zona centro del etado de Yucatán. El objetivo fue relacionar la respuesta ovárica y la producción embrionaria con la concentración plasmática de progesterona (P4) al día de inicio de la superovulación, al estro, y al día de la recolección embrionaria. Para ello, 11 días después del estro se superovularon 30 vacas con hormona foliculoestimulante (FSH-P) durante 4 días, a dosis decrecientes. La recolección embrionaria se efectuó 7 días después de la primera inseminación. Las donadoras con concentración plasmática de P4 > 3 ng/ml al iniciar la superovulación, tuvieron mayor promedio de cuerpos lúteos (CL: 12.4 vs. 10.2; P> 0.05); total de óvulos y embriones (TOE: 9.3 vs. 4.7; P< 0.01) y embriones transferibles (ET: 6.6 vs 3.0; P< 0.01) que las vacas con ó 3 ng/ml. Las donadoras con concentración plasmática de P4 ó ng/ml al estro, produjeron más TOE (6.9 vs. 3.0) y ET (4.6 vs. 0.0) que las vacas con > 1 ng/ml de P4. Las vacas con > 11 ng/ml de p4 al día de la recolección embrionaria tuvieron mayor promedio de CL (15.5 vs. 10.5; P> 0.05), TOE (10.0 vs. 5.9; P< 0.05) y ET (7.9 vs. 4.6; P< 0.05) que las donadoras con menor concentración plasmática de P4 (ó 11 ng/ml). Se concluye que las donadoras con concentración plasmática de P4 > 3 ng/ml al iniciar la superovulación, ó 1 ng/ml al estro y > 11 ng/ml al día de la recolección embrionaria, presentaron mejor respuesta superovulatoria y produjeron más embriones. Bajo condiciones tropicales, la concentración plasmática de progesterona, antes del inicio de la superovulación, puede ser utilizada como un indicador para seleccionar a las donadoras con mayor rendimiento potencial

Respuesta superovulatoria en ganado Bos indicus y Bos taurus bajo condiciones tropicales, y efecto del desarrollo y calidad del embrión sobre el porcentaje de gestación / Superovulatory response in Bos indicus and Bos taurus cattle under tropical conditions, and effect of embryo development and quality on pregnancy rate

El presente estudio se realizó en condiciones de campo en 4 ranchos de la zona centro del estado de Yucatán. Los objetivos fueron, en primer lugar; evaluar la respuesta superovulatoria entre ganado Bos indicus y Bos taurus, y entre vacas y novillas; en segundo lugar, investigar el efecto del desarrollo y la calidad de los embriones transferidos sobre el porcentaje de gestación de las receptoras. Para esto, se superovularon 30 animales con hormona foliculoestimulante (FSH-P) y se transfirieron 88 embriones a un número igual de receptoras. El 83.3 por ciento de las donadoras (n=25), respondió satisfactoriamente al tratamiento superovulatorio, de éstas, se obtuvo en promedio 8.2 ñ 5.3 embriones recuperados por donadora, de los cuales 6.9 ñ 4.1 fueron embriones transferibles. Los animales Bos indicus presentaron un mayor promedio de embriones recuperados (p<0.10) y embriones transferibles por donadora (p>0.05) (11.6 ñ 7.9 y 7.8 ñ 4.2, respectivamente), que los animales Bos taurus (7.1 ñ3.6 y 6.6 ñ4.1, respectivamente). Al evaluar estos indicadores entre vacas y novillas, no se encontró diferencia en el promedio de los embriones recuperados por donadora (8.0 ñ 6.7 vs 8.3 ñ3.2, respectivamente: P>0.05); sin embargo, se observó cierta superioridad de las novillas en el promedio de embriones transferibles (7.9 ñ 3.8 vs 6.6 ñ 4.2, respectivamente), sin que esta diferencia sea significativa (P>0.05). El porcentaje global de gestación para las 88 receptoras fue de 51.1 por ciento (n=45), el porcentaje de gestación fue mayor cuando se transfirieron embriones en estadio de blastocisto (53.3 por ciento) que cuando se transfirieron en estadio de mórula (38.4 por ciento) (P>0.05), y también cuando se transfirieron embriones de calidad excelente (63.4 por ciento), comparados con los embriones de calidad buena, regular (44.8 por ciento y 44.4 por ciento, respectivamente: P>0.05) y mala (22.2 por ciento: P>0.05)

Influencia del nivel de progesterona plasmática sobre el porcentaje de preñez en hembras bovinas receptoras de embriones / Influence of plasma progesterone level on pregnancy rates in bovine embryo transfer recipients

Se obtuvieron muestras sanguíneas de 84 hembras bovinas receptoras de embriones el día de la transferencia y se determinó el nivel de progesterona para conocer si había diferencia entre el nivel promedio de progesterona de las receptoras que lograron una gestación y aquellas que no lo lograron. También se estudió la relación entre diversos niveles de progesterona y el porcentaje de preñez. La transferencia de los embriones se realizó 7 días después del estro por el método no quirúrgico. La sangre se recolectó inmediatamente después de la transferencia, se centrifugó y el plasma se congeló; la concentración de progesterona se determinó por radioinmunoanálisis. El diagnóstico de preñez se realizó por palpación transrectal 42 días después de la transferencia. El analisis estadístico reveló que el nivel promedio de progesterona plasmática de las receptoras que quedaron gestantes (3.005 ñ 0.96 ng/ml) no fue diferente significativamente (P > 0.05) del nivel promedio de las receptoras no gestantes (3.218 ñ 1.08 ng/ml). Tampoco se encontró diferencia entre el porcentaje de preñez de los 3 diferentes grupos de progesterona estudiados. Las receptoras con ó ng/ml de progesterona tuvieron 47.3 por ciento de preñez, las que tuvieron entre 2.5 y 4.9 ng/ml, un 60 por ciento y las que tuvieron 5 ng/ml, un 40 por ciento. En este estudio no se encontró evidencia de que la concentración de progesterona plasmática de la receptora al momento de la transferencia, sea una causa que influya sobre el porcentaje de preñez