RESUMO
Cysteine is the preferred reducing agent used in the preparation of culture media for the growth of many strictly anaerobic microorganisms; however, redox potential reduction of cysteine is very slow, making it inconvenient if the medium is needed immediately or in large quantity. The time required to reduce culture medium containing resazurin (an indicator of reducing conditions) was dramatically shortened when the medium, after being injected with the reducing agent cysteine, was irradiated with incandescent light from a halogen lamp. Light intensity had an effect upon reduction time: tubes kept in the dark took more than 12 h to achieve the desired degree of anaerobiosis (measured spectrophotometrically by the bleaching of the indicator, resazurin) while tubes subjected to ordinary laboratory illumination were reduced in about 2 h. When exposed to maximum light intensity (equivalent to a regular 100 watt bulb lamp) tubes could be made anaerobic in less than 20 min. Cysteine was essential for the bleaching of resazurin. Evidence that adequate anaerobiosis was achieved by light irradiation was provided by the fact that four Clostridium strains and one Thermoanaerobacter strain displayed similar growth (measured by lag time, growth rate, and extent of growth) in media reduced under high intensity light or under normal laboratory illumination.
A cisteína é o agente redutor preferido para o preparo de meios de cultura para muitos microrganismos estritamente anaeróbicos; no entanto, a ação redutora do potencial redox da cisteína é muito lenta, tornando-a inconveniente, para o uso imediato do meio ou em grande quantidade. O tempo requerido para reduzir o meio de cultura contendo resazurina (um indicador redox) foi bastante encurtado quando o meio, após ter sido injetado com o agente redutor cisteína, foi irradiado com luz incandescente proveniente de duas lâmpadas de halogênio. A intensidade da iluminação afetou o tempo gasto na redução: tubos mantidos no escuro alcançaram o nível desejado de anaerobiose (medido espectrofotometricamente pela descoloração do indicador, a resazurina) somente após 12 h, enquanto os tubos mantidos sob iluminação, encontrada em um laboratório comum, levaram cerca de 2 h. Por outro lado, os tubos irradiados com máxima intensidade de luz (equivalente a uma lâmpada normal de 100 watt) tornaram-se totalmente incolores em menos de 20 min. A cisteína mostrou-se ser um reagente indispensável para que a redução da resazurina ocorresse. Evidências de que a anaerobiose do meio de cultura, acelerada pela alta irradiação de luz artificial, foi alcançada, foram fornecidas pelo fato de que quatro cepas de Clostridium e uma de Thermoanaerobacter mostraram crescimento similar (medido através de tempo de duração da fase lag, velocidade de crescimento e crescimento máximo) em meio de cultura reduzido através de exposição a alta intensidade luminosa ou em meio preparado de maneira convencional.