RESUMO
Este artigo descreve a anteriormente desconhecida diversidade molecular de amostras brasileiras de Coronavírus canino (CCoV). Vinte e duas amostras foram submetidas à análise da sequência parcial do gene codificador da proteína de membrana, sendo 12 classificadas como CCoV Tipo II e 10 como CCoV Tipo I e uma possível sublinhagem tipicamente brasileira foi encontrada para o CCoV Tipo II.
Assuntos
Animais , Coronavirus Canino/patogenicidade , Filogenia , Cães/classificaçãoRESUMO
Este artigo descreve a anteriormente desconhecida diversidade molecular de amostras brasileiras de Coronavírus canino (CCoV). Vinte e duas amostras foram submetidas à análise da sequência parcial do gene codificador da proteína de membrana, sendo 12 classificadas como CCoV Tipo II e 10 como CCoV Tipo I e uma possível sublinhagem tipicamente brasileira foi encontrada para o CCoV Tipo II.(AU)
Assuntos
Animais , Filogenia , Coronavirus Canino/patogenicidade , Cães/classificaçãoRESUMO
This study investigated the occurrence of rotavirus infections in ostriches (Struthio camelus) reared in Northern Paraná, Brazil. Fecal (n=66) and serum (n=182) samples from nine farms located in four different cities were analyzed by silver stained-polyacrylamide gel electrophoresis (ss-PAGE), RT-PCR assay, virus isolation, and counterimmunoelectroosmophoresis (CIE). Rotavirus group A seropositivity occurred in 5.49% (10/182) of serum samples of ostriches originated from two farms. Only 9.09% (6/66) of fecal samples from ostriches with diarrhea maintained in one farm were positive by ss-PAGE, RT-PCR, and virus isolation. The G (VP7) and P (VP4) genotypes of rotavirus wild strains isolated in cell culture were determined by multiplex-nested PCR. The genotyping identified two rotavirus strains: G6P[1] and G10P[1]. In three rotavirus strains it was only possible to identify the P type; one strain being P[1] and two strains that presented the combination of P[1]+P[7]. These findings might represent the first characterization of rotavirus in ostriches, and the finding of porcine and bovine-like rotavirus genotypes in ostriches might suggest virus reassortment and possible interspecies transmission.
Assuntos
Doenças das Aves/virologia , Fezes/virologia , Rotavirus/isolamento & purificação , Struthioniformes , Animais , Anticorpos Antivirais/química , Genótipo , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Rotavirus/classificaçãoRESUMO
Com o objetivo de se determinar a diversidade intra-genotípica de rotavírus circulantes em criações de suínos de diferentes municípios localizados no Estado de São Paulo, Brasil, um total de 3 amostras de rotavírus pertencentes ao genotipo G[5] foram submetidas ao sequenciamento parcial do gene codificador da proteína VP7. Analogamente, outras 4 amostras P[6], tiveram o gene codificador da proteína VP4 parcialmente definidas. A identidade nucleotídica entre as amostras G[5] variou de 93,1% a 99,4%, e em termos de aminoácidos de 97,5% a 100%. Quanto ao genotipo P[6] as amostras variaram de 93% a 98,7% e 95 a 100% para as identidades de nucleotídeos e aminoácidos, respectivamente. Adicionalmente, inferências filogenéticas feitas a partir de aminoácidos, usando o critério de distância com algoritmo Neighbor-Joining e correção de Poisson como modelo de substituição, demonstraram que as amostras G[5] aqui definidas agruparam-se exclusivamente com amostras homólogas descritas previamente em suínos, enquanto que as P[6] demonstraram relacionamento tanto com amostras humanas e suínas. Em face destes achados
RESUMO
Relata-se o isolamento de rotavírus, a partir de material fecal de dois cães assintomáticos, no Brasil. A ocorrência de rotavírus foi pesquisada em amostras fecais de nove cães assintomáticos, provenientes do Centro de Controle de Zoonoses do município de Osasco, SP. Duas das nove amostras analisadas, por eletroforese em gel de poliacrilamida, foram positivas. O isolamento de rotavírus foi realizado em linhagem de células MA-104, com adição de 10,0µg/mL de tripsina ao meio de manutenção, e confirmado pelo eletroferótipo característico de grupo A.(AU)
Assuntos
Animais , Rotavirus/isolamento & purificação , Fezes/virologia , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida/métodos , Cães , BrasilRESUMO
An outbreak of diarrhea in adult cattle from a dairy herd of Lavras county, MG, was described. From a herd of 10 cows, seven became ill. The diarrhea lasted six to 10 days, being more prolonged, intense, and with blood in lacting cows. Other signs included apathy, reduced appetite and milk production, and serous nasolacrimal discharge. Bovine coronavirus was detected in fecal samples from the five cattle tested by nested-RT-PCR.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Diarreia/diagnóstico , Diarreia/epidemiologia , Coronavirus Bovino/isolamento & purificação , Fezes/virologia , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Brasil/epidemiologiaRESUMO
Com o objetivo de monitorar a imunidade passiva em bezerros alimentados com colostro de vacas imunizadas e não imunizadas com vacina contra rotavírus, foram determinados títulos de anticorpos em amostras de sangue e colostro de 26 vacas da raça Holandesa no dia do parto e de seus bezerros, à zero, às 24, 48 horas e aos sete, 14, 21, 28 dias de idade, pelo ensaio imunoenzimático. Tanto no soro sangüíneo como no colostro, os títulos dos isótipos IgG, IgG1 e IgG2 foram mais elevados no grupo dos animais vacinados, porém somente no colostro o aumento foi significativo. Os bezerros alimentados com o colostro das vacas vacinadas apresentaram títulos mais altos dos isótipos IgG, IgG1, IgG2, IgA e IgM, após a ingestão do colostro, sendo constatado aumento significativo apenas para os títulos do isótipo IgG2. Amostras positivas para rotavírus foram detectadas nos dois grupos experimentais a partir dos sete dias de idade. A vacinação materna não protegeu efetivamente os bezerros das infecções naturais por rotavírus, pois, apesar de aumentar os títulos séricos de anticorpos anti-rotavírus nos animais vacinados, não foi capaz de impedir a ocorrência da rotavirose nos bezerros alimentados com o colostro das vacas imunizadas.(AU)
Passive immune response in calves fed colostrum from immunized and nonimmunized cows by anti-rotavirus vaccine was monitored. Titers of antibodies were determined by immunoenzymatic assay in blood and colostrum sampled at parturition day from 26 Holstein cows as well as in blood from their calves collected at 0, 24, and 48 hours and seven, 14, 21, and 28 days after birth. In serum and colostrum, IgG, IgG1, and IgG2 antibody titers were higher in vaccinated animals; however, this increase was only significant in colostrum. The calves fed colostrum from vaccinated cows showed higher IgG, IgG1, IgG2, IgA, and IgM isotypes titers after the ingestion of colostrum, being evidenced significant increase only for IgG2 titers. Positive samples for rotavirus were detected in both experimental groups since seven days after birth. Results showed that maternal vaccine failed to protect effectively the calves from natural infections by rotavirus, though it increased the anti-rotavirus antibody titers in vaccinated animals, but was not capable to impair the occurrence of rotaviruses in the calves fed colostrum from immunized cows.(AU)
Assuntos
Animais , Imunização Passiva/métodos , Técnicas Imunoenzimáticas/métodos , Colostro/metabolismo , Soro , Rotavirus/imunologia , BovinosRESUMO
Com o objetivo de monitorar a imunidade passiva em bezerros alimentados com colostro de vacas imunizadas e não imunizadas com vacina contra rotavírus, foram determinados títulos de anticorpos em amostras de sangue e colostro de 26 vacas da raça Holandesa no dia do parto e de seus bezerros, à zero, às 24, 48 horas e aos sete, 14, 21, 28 dias de idade, pelo ensaio imunoenzimático. Tanto no soro sangüíneo como no colostro, os títulos dos isótipos IgG, IgG1 e IgG2 foram mais elevados no grupo dos animais vacinados, porém somente no colostro o aumento foi significativo. Os bezerros alimentados com o colostro das vacas vacinadas apresentaram títulos mais altos dos isótipos IgG, IgG1, IgG2, IgA e IgM, após a ingestão do colostro, sendo constatado aumento significativo apenas para os títulos do isótipo IgG2. Amostras positivas para rotavírus foram detectadas nos dois grupos experimentais a partir dos sete dias de idade. A vacinação materna não protegeu efetivamente os bezerros das infecções naturais por rotavírus, pois, apesar de aumentar os títulos séricos de anticorpos anti-rotavírus nos animais vacinados, não foi capaz de impedir a ocorrência da rotavirose nos bezerros alimentados com o colostro das vacas imunizadas.
Passive immune response in calves fed colostrum from immunized and nonimmunized cows by anti-rotavirus vaccine was monitored. Titers of antibodies were determined by immunoenzymatic assay in blood and colostrum sampled at parturition day from 26 Holstein cows as well as in blood from their calves collected at 0, 24, and 48 hours and seven, 14, 21, and 28 days after birth. In serum and colostrum, IgG, IgG1, and IgG2 antibody titers were higher in vaccinated animals; however, this increase was only significant in colostrum. The calves fed colostrum from vaccinated cows showed higher IgG, IgG1, IgG2, IgA, and IgM isotypes titers after the ingestion of colostrum, being evidenced significant increase only for IgG2 titers. Positive samples for rotavirus were detected in both experimental groups since seven days after birth. Results showed that maternal vaccine failed to protect effectively the calves from natural infections by rotavirus, though it increased the anti-rotavirus antibody titers in vaccinated animals, but was not capable to impair the occurrence of rotaviruses in the calves fed colostrum from immunized cows.
Assuntos
Animais , Bovinos , Colostro/metabolismo , Imunização Passiva/métodos , Rotavirus/imunologia , Soro , Técnicas Imunoenzimáticas/métodosRESUMO
Descreve-se a pesquisa de BCoV e rotavírus em 13 mostras fecais de vacas de surtos de disenteria utilizando uma nested PCR dirigida ao gene RdRp e PAGE, respectivamente. Todas as amostras fecais foram positivas para BCoV e nenhuma delas apresentou-se positiva para rotavírus em PAGE. O encontro de coronavírus bovino em amostras fecais de vacas com disenteria sugere que este vírus possa ser o agente primário envolvido na etiologia dos casos aqui relatados(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Adulto , Bovinos , Coronavirus Bovino/patogenicidade , Infecções por Coronavirus/epidemiologia , Infecções por Coronavirus/etiologia , Disenteria/diagnóstico , Disenteria/veterinária , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Bovinos/virologiaRESUMO
Descreve-se a pesquisa de BCoV e rotavírus em 13 mostras fecais de vacas de surtos de disenteria utilizando uma nested PCR dirigida ao gene RdRp e PAGE, respectivamente. Todas as amostras fecais foram positivas para BCoV e nenhuma delas apresentou-se positiva para rotavírus em PAGE. O encontro de coronavírus bovino em amostras fecais de vacas com disenteria sugere que este vírus possa ser o agente primário envolvido na etiologia dos casos aqui relatados
Assuntos
Animais , Feminino , Adulto , Bovinos , Bovinos/virologia , Coronavirus Bovino/patogenicidade , Disenteria/diagnóstico , Disenteria/veterinária , Infecções por Coronavirus/epidemiologia , Infecções por Coronavirus/etiologia , Reação em Cadeia da Polimerase/métodosRESUMO
ABSTRACT This article describes the role of bovine coronavirus, rotavirus and Cryptosporidium parvum in an outbreak of beef calf diarrhea in Presidente Epitácio, São Paulo State. Two out 9 fecal samples were positive to BCoV, 6 to C. parvum and 6 to rotavirus, with 4 rotavirus-C. parvumco-infections, 1 BCoV-C. parvumco-infection and 1 rotavirus-BCoV co-infection. These results show the need for a detailed survey of the etiology of diarrheas, aiming to evaluate the agents spread in a flock, allowing the design of prophylactic measures against gastroenteritis outbreaks.
RESUMO Estudou-se a participação de coronavírus bovino (BCoV) rotavírus e Cryptosporidium parvum em um surto de diarréia em bezerros de corte no Município de Presidente Epitácio, Estado de São Paulo. Das 9 amostras colhidas, 2 foram positivas para BCoV, 6 para C. parvum e 6 para rotavírus, sendo 4 co-infecções por rotavírus e C. parvum, 1 coinfecção por BCoV e C. parvume 1 co-infecção por rotavírus e coronavírus. Estes resultados reiteram a necessidade de que se pesquise de um modo abrangente a etiologia de diarréias, com o intuito de se avaliarem os agentes circulantes no rebanho, o que possibilita uma abordagem profilática mais exata para impedir o aparecimento de surtos epidêmicos de gastroenterites.
RESUMO
Bovine coronavirus (BCoV) causes enteric and respiratory dis- orders in calves and dysentery in cows. In this study, 51 stool samples of calves from 10 Brazilian dairy farms were analysed by an RT-PCR that amplifies a 488-bp fragment of the hypervariable region of the spike glycoprotein gene. Maximum parsimony genealogy with a heuristic algorithm using sequences from 15 field strains studied here and 10 sequences from GenBank and bredavirus as an outgroup virus showed the existence of two major clusters (1 and 2) in this viral species, the Brazilian strains segregating in both of them. The mean nucleotide identity between the 15 Brazilian strains was 98.34%, with a mean amino acid similarity of 98%. Strains from cluster 2 showed a deletion of 6 amino acids inside domain II of the spike protein that was also found in human coronavirus strain OC43, supporting the recent proposal of a zoonotic spill- over of BCoV. These results contribute to the molecular characterization of BCoV, to the prediction of the efficiency of immunogens, and to the definition of molecular markers useful for epidemiologic surveys on coronavirus-caused diseases.
Assuntos
Coronavirus Humano OC43/genética , Coronavirus Bovino/genética , Genoma Viral , Glicoproteínas de Membrana/genética , Deleção de Sequência , Proteínas do Envelope Viral/genética , Sequência de Aminoácidos , Animais , Brasil , Bovinos , Doenças dos Bovinos/virologia , Análise por Conglomerados , Infecções por Coronavirus/veterinária , Infecções por Coronavirus/virologia , Coronavirus Bovino/classificação , Coronavirus Bovino/isolamento & purificação , Fezes/virologia , Humanos , Glicoproteínas de Membrana/química , Dados de Sequência Molecular , Estrutura Secundária de Proteína , RNA Viral/genética , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Homologia de Sequência de Aminoácidos , Homologia de Sequência do Ácido Nucleico , Glicoproteína da Espícula de Coronavírus , Proteínas do Envelope Viral/químicaRESUMO
ABSTRACT Coronaviruses are of special interest in diarrhea of horses, once they cause disease in foals and in the adult. This study aimed to evaluate the existence of coronavirus, rotavirus, protozoa and bacteria in stool of a 3-day old foal suffering from acute diarrhea. A nested PCRassay for the RNA-dependent RNA-polymerase gene was applied to coronavirus detection and PAGE, sucrose flotation test and classical bacteriology for rotavirus, protozoa and bacteria detection, respectively. An enteric group II coronavirus was found with no concurrent infections. The role of coronavirus in this clinical case is discussed, as well as possible transmission routes.
RESUMO Coronavírus têm um interesse especial em cavalos, uma vez que causam doenças em potros e adultos. Este estudo objetivou avaliar a existência de coronavírus, rotavírus, protozoários e bactérias em fezes de um potro com 3 dias de idade sofrendo de diarréia aguda. Uma reação de nested-RT-PCR para o gene da RNA-polimerase RNA-dependente foi aplicada para a detecção de coronavírus e as provas de PAGE, teste de flutuação em sacarose e bacteriologia clássica foram aplicadas para a pesquisa de rotavírus, protozoários e bactérias, respectivamente. Um coronavírus entérico do grupo II foi encontrado, sem outras infecções ou infestações simultâneas. O papel dos coronavírus neste caso clínico é discutido no presente artigo, bem como as possíveis vias de transmissão.
RESUMO
A peritonite infecciosa dos felinos (PIF) é uma doença geralmente fatal de felinos selvagens e domésticos. O agente etiológico da PIF (Feline Infectious Peritonitis Virus, FIPV) é um coronavírus; um RNA vírus envelopado de fita simples da família Coronaviridae. O presente artigo relata a padronização e a aplicação de um método de diagnóstico de PIF baseado em PCR do gene codificador da proteína S do FIPV. Amostras de efusão pleural ou peritonial de 11 gatos e 1 leoa e amostras de soro sangüíneo de 10 gatos com efusão cavitária foram enviadas ao Laboratório de Virologia da FMVZ-USP. Das 22 amostras testadas, apenas uma, referente a uma efusão pleural, mostrou-se positiva pela PCR. Hipóteses ligadas ao diagnóstico clínico, à dinâmica da infecção viral e a características intrínsecas das amostras podem ser utilizadas para explicar o número de amostras negativas. A técnica de PCR aqui descrita apresenta-se como uma alternativa para o diagnóstico da peritonite infecciosa dos felinos. Aliada aos diagnósticos sorológico e histopatológico, é uma ferramenta que vem ajudar a esclarecer a etiologia e a epidemiologia da doença em diversas espécies, permitindo um entendimento da cadeia de transmissão e da dinâmica e patogenia virais e da necessidade de vacinas.PALAVRAS-CHAVE: Peritonite. Felina. Diagnóstico. PCR.
RESUMO
To determine the incidence of rotavirus infection among dairy herds in the State of São Paulo, Brazil, 576 faecal samples obtained from calves aged 1-45 days with and without diarrhoea, reared on 63 dairy cattle farms, were analyzed. Polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) identified 28 samples positive for group A rotavirus, while four samples, two diarrhoeic and two non-diarrhoeic, showed a bisegmented genome with a typical picobirnavirus pattern. Electron microscopy revealed spherical virus particles with a diameter of 37 nm and without a defined surface structure. The present study is the first report of a bisegmented virus identified in cattle in Brazil.
Assuntos
Doenças dos Bovinos/virologia , Picobirnavirus/isolamento & purificação , RNA de Cadeia Dupla/isolamento & purificação , Animais , Brasil , Bovinos , Diarreia/veterinária , Diarreia/virologia , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida/veterinária , Fezes/virologia , Microscopia EletrônicaRESUMO
Determinou-se a prevalência de rotavírus durante surto de diarréia em bezerros de um rebanho de corte, criado em regime semi-intensivo de produçäo. Analisaram-se, por meio de técnicas de eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA) e ensaio imunoenzimático (kit EIARA - Fiocruz), 69 amostras de fezes de bezerros, entre 30 e 60 dias de idade, colhidas em três estaçöes de pariçäo consecutivas (agosto a novembro/1999, janeiro a abril e agosto a novembro/2000). Pelo EIARA foram detectadas 63,8 por cento (44/69) de amostras positivas. Na primeira estaçäo de pariçäo foi detectado rotavírus em 82,4 por cento (14/17) dos bezerros que apresentaram quadro clínico de diarréia. No ano de 2000 a presença de rotavírus foi detectada em 41,7 por cento (5/12) e 62,5 por cento (25/40) do total de amostras examinadas. A análise do perfil eletroforético do genoma indicou grande diversidade, com quatro eletroferótipos distintos, todos com perfil longo, característico de rotavírus do grupo A.
Assuntos
Animais , Masculino , Bovinos , RotavirusRESUMO
Determinou-se a prevalência de rotavírus durante surto de diarréia em bezerros de um rebanho de corte, criado em regime semi-intensivo de produção. Analisaram-se, por meio de técnicas de eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA) e ensaio imunoenzimático (kit EIARA - Fiocruz), 69 amostras de fezes de bezerros, entre 30 e 60 dias de idade, colhidas em três estações de parição consecutivas (agosto a novembro/1999, janeiro a abril e agosto a novembro/2000). Pelo EIARA foram detectadas 63,8 por cento (44/69) de amostras positivas. Na primeira estação de parição foi detectado rotavírus em 82,4 por cento (14/17) dos bezerros que apresentaram quadro clínico de diarréia. No ano de 2000 a presença de rotavírus foi detectada em 41,7 por cento (5/12) e 62,5 por cento (25/40) do total de amostras examinadas. A análise do perfil eletroforético do genoma indicou grande diversidade, com quatro eletroferótipos distintos, todos com perfil longo, característico de rotavírus do grupo A.(AU)
During three successive seasons of calving (August to November 1999, January to April and August to November 2000) 69 fecal samples were collected from calves between 30 and 60 days of age presenting diarrhea, to account for the detection and prevalence of rotavirus. Samples were submited to an immunoenzymatic assay for rotavirus and adenovirus (kit EIARA-Fiocruz) and polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). Of the 69 samples tested, 63.8% (44/69) were positive by EIARA. At the first calving season rotavirus was detected in feces from 14 of 17 calves (82.4%) with clinical signals of diarrhea. For the year 2000 seasons, rotavirus was detected in 5 of 12 (41.7%) and 25 of 40 (62.5%) of samples, respectively. The analysis of the eletrophoretic pattern of the positive samples showed four distinct group A rotavirus genome eletropherotypes.(AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Bovinos , Rotavirus , Fezes , DiarreiaRESUMO
Foi realizado um estudo para determinar a ocorrência de infecçäo por rotavírus em rebanhos bovinos leiteiros. Foram analisadas 375 amostras de fezes de bezerros, na faixa etária 1 a 45 dias, provenientes de animais pertencentes a nove propriedades rurais, situadas em seis municípios da regiäo nordeste do Estado de Sao Paulo. Destas, 193 pertenciam a animais com diarréia e 182 foram obtidas de animais clinicamente sadios. As técnicas utilizadas para a detecçäo de rotavírus foram o ensaio imunoenzimático (EIE) e a eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA). Por meio do EIE foram detectadas 11,2 por cento (42/375) de amostras positivas, 15 por cento delas (29/193) obtidas de animais com diarréia e 7,1 por cento (13/182) colhidas de animais sem diarréia. A análise do perfil do genoma indicou a presença de seis eletroferótipos distintos, característicos de rotavírus do grupo A. Um único eletroferótipo foi detectado em três rebanhos, o qual permaneceu constante durante o período de amostragem. Em dois rebanhos diferentes eletroferótipos foram detectados, embora com maior prevalência de um dado perfil. A caracterizaçäo das amostras positivas em subgrupos foi realizada por meio do EIE com "duplo sanduíche", utilizando-se anticorpos monoclonais (MAb) específicos para antígenos de subgrupo (I e II). Foram caracterizadas como subgrupo I 52,4 por cento (22/42) das amostras testadas, nenhuma reagiu com MAb de subgrupo II, enquanto as demais, 47,6 por cento (20/42), näo reagiram com nenhum dos dois subgrupos