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Nat Commun ; 12(1): 2847, 2021 05 14.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-33990554

RESUMO

Single molecule localization microscopy offers in principle resolution down to the molecular level, but in practice this is limited primarily by incomplete fluorescent labeling of the structure. This missing information can be completed by merging information from many structurally identical particles. In this work, we present an approach for 3D single particle analysis in localization microscopy which hugely increases signal-to-noise ratio and resolution and enables determining the symmetry groups of macromolecular complexes. Our method does not require a structural template, and handles anisotropic localization uncertainties. We demonstrate 3D reconstructions of DNA-origami tetrahedrons, Nup96 and Nup107 subcomplexes of the nuclear pore complex acquired using multiple single molecule localization microscopy techniques, with their structural symmetry deducted from the data.


Assuntos
Substâncias Macromoleculares/química , Substâncias Macromoleculares/ultraestrutura , Imagem Individual de Molécula/métodos , Algoritmos , Linhagem Celular , Simulação por Computador , DNA/química , DNA/ultraestrutura , Humanos , Imageamento Tridimensional , Conformação Molecular , Poro Nuclear/química , Poro Nuclear/ultraestrutura , Complexo de Proteínas Formadoras de Poros Nucleares/química , Complexo de Proteínas Formadoras de Poros Nucleares/ultraestrutura , Razão Sinal-Ruído , Imagem Individual de Molécula/estatística & dados numéricos
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