Genotipificación de aislados clínicos de Helicobacter pylori en base a genes asociados a virulencia cagA, vacA y babA2: Primer aislamiento de una cepa babA2 positiva en pacientes chilenos / Genotypying of clinical isolates of Helicobacter pylori by cagA, vacA and babA2 virulence associated genes: First detection of a babA2 positive strain in Chilean patients

Background: Helicobacter pylori-associated gastroduodenal diseases depends on host characteristics, environmental conditions and bacterial virulence factors, such as cagA, vacA y babA2 gene products. Moreover, peptic ulcer disease has been related with cagA+, vacAs1m1 strains, while metaplasia and gastric cancer has been associated to cagA+, vacAs1 and babA2+ H pylori strains. Gene babA2 has not yet been described in clinical isolates from Chilean patients. Aim: To investigate the presence of cagA, vacA (s and m) and babA2 genes in clinical isolates of H pylori from Chilean patients. Material and Methods: Sixty six isolates from 41 patients were genotyped by PCR, using primers for s1a, s1b, s2, m1, m2, cagA and babA2 genes as previously described. Results: cagA gene was detected in 16 isolates (24.2 percent) while vacAs1a, vacAs1b, vacAs2, vacAm1 and vacAm2 were detected in 28 (42.4 percent), 14 (21.2 percent), 17 (25.8 percent), 21 (31.8 percent) and 29 isolates (43.9 percent), respectively. One isolate (1.5 percent) was babA2 positive, being the first isolate with this genotype described in Chile. Besides the babA2+ genotype this clinical isolate also presented cagA+ and vacAs1a which has been related with metaplasia or gastric cancer. Five isolates showed an ulcerogenic profile cagA+, vacAs1m1. Conclusions: The results presented indicate the prevalence of vacAs1m1 genotype among the clinical isolates analyzed, and a low frequency of babA2 genotype.

Patrón pronóstico de invasión serosa (S2) en carcinoma gástrico / Prognostic pattern of serous invasion (S2) in gastric carcinoma

El pronóstico del cáncer gástrico depende de la invasión de la pared, compromiso de barreras ganglionares y de factores biológicos tumorales. El objetivo es comunicar nuestra experiencia es un patrón pronóstico asociado a subtipos de compromisos seroso gástrico. Cuarenta y cinco pacientes operados entre 1979 y 1998 cumplen las condiciones de ingreso: carcinoma avanzado, compromiso definitivo de la serosa (S2), gastrectomía total curativa, sin tratamiento complementario. Se establecen dos grupos: Grupo 1 (n:23), con invasión limitada a la membrana serosa. Grupo 2 (n:22), con invasión serosa, rotura y explosión hacia la cavidad peritoneal, pero sin invasión a órganos vecinos. Se analiza características generales y sobrevida según Kaplan-Meier, estimando diferencias con test de Wilcoxon. Las características generales de los grupos 1 y 2 son, respectivamente: Edad promedio: 61-59 años; Sexo (M/F): 16/7-13/9; ubicación tumoral (Zona A/M/C): 3/6/14 - 0/8/14; Clasificación de Bormann (I/II/III/IV): 0/4/810/1 - 0/0/9/9/4. El compromiso de barreras ganglionares (N1/N2): 15/5-13/2. Las principales complicaciones son de causa médica (22,2 por ciento, compartidas por ambos grupos uniformemente. El Grupo 2 tiene dos complicaciones quirúrgicas, tratadas en forma conservadora. Nohay mortalidad en la serie. La sobrevida a 5 años, para el grupo total (n:45) es 33,4 por ciento. La sobrevida del Grupo 1 y 2 es 47,5 por ciento, con diferencia significativa (p=0,05). En esta serie, el compromiso de serosa, abierta ala cavidad peritoneal, se comporta como un factor pronóstico negativo en la sobrevida del cáncer gástrico

Helicobacter pylori: análisis de cagA y genotipificación de vacA en Chile: detección de una cepa s2/m1 / Helicobacter pylori: cagA status and vacA genotyping in Chile, detection of a s2/m1 strain

Background: The genes cagA and vacA encode H pylori virulence factors. Aim: To genotype these genes in H pylori strains isolated from patients with upper gastrointestinal symptoms. Material and methods: We studied 50 patients who underwent an upper gastrointestinal endoscopy, with positive culture for H pylori. Detection of cagA and vacA gerotyping was done using polymerase chain reactions. Results: The gene cagA was detected in 19 samples (38 per cent). Signal sequences s1 and s2 of vacA gene were detected in 16 samples each (32 per cent). There was simultaneous amplification of s1 and s2 in 6 samples and they were not detected in 9 samples. The middle region of vacA was m1 in 9 samples, m2 in 29 samples and there was simultaneous amplification of m1 and m2 in 12 samples. In 16 samples (32 per cent), more than one type of signal sequence or medial region was detected. Of those patients in whom vacA was the only genotype detected, 15 were s2/m2, 7 were s1/m1, 4 were s1/m2 and 1 was s2/m1. Conclusions: In these patients, the infection with cagA- H pylori strains, predominates, the prevalence of infection with s1 or s2 strains is similar and the predominant medial region is m2

Susceptibilidad in vitro de cepas de helicobacter pylori: aislamiento de cepas resistentes a claritromicina / In vitro antimicrobial susceptibility of helicobacter pylori strains isolated in Chile

Background: Our laboratory has carried out an epidemiological surveillance of Helicobacter pylori antimicrobial susceptibility since 1997. Aim: To report the antimicrobial susceptibility of H pylori strains, isolated in Chile from August 1997 to August 2000. Material and methods: Ninety one H pylori strains, obtained from antral gastric biopsies during upper gastrointestinal endoscopies were studied. Susceptibility towards clarithromycin, amoxicillin, bismuth subcitrate and metronidazole was studied by an agar diffusion technique. Results: All strains were susceptible to amoxicillin and two strains were resistant to clarithromycin. Forty two percent of strains were resistant to metronidazole and 13 per cent were resistant to bismuth subcitrate. Conclusions: These results underscore the need to maintain an epidemiological surveillance of H pylori antimicrobial susceptibility, to modify its eradication therapy accordingly

Estudio de algunas propiedades inmunológicas de lipopolisacáridos extraídos de cepas de helicobacter pylori aisladas de biopsias gástricas / Lipopolysaccharide extracted from gastric biopsies isolated H. pylori strains, immunological properties

Helicobacter pylori es considerado el principal agente responsable de gastritis y úlcera duodenal en el hombre. La participación de factores de virulencia en este microorganismo no ha sido totalmente establecida. Sin embargo, se han descrito algunos determinantes de patogenicidad que serían responsables de la aparición de la enfermedad en humanos. El lipopolisacárido (LPS), ha sido un factor poco estudiado en este microorganismo, al que sólo en los últimos años se le ha conferido importancia en la infección por H. pylori. El objetivo de este estudio fue determinar la actividad linfoproliferativa y niveles de inducción de secreción de FNT alfa por LPS extraídos de cepas de H. pylori en células esplénicas de ratón. Para esto, se trabajó con cuatro cepas bacterianas a las que se les extrajo el LPS por el método fenol/agua en caliente descrito por Westphal y Jann. Se realizaron cultivos celulares los que fueron incubados con 1, 10 y 100 µg/ml de LPS en el ensayo mitogénico y con 10 µg/ml en la liberación de FNT alfa. La actividad linfoproliferativ se determinó por la captación de timidina tritiada por los linfocitos B y la determinación de FNT alfa se realizó en los sobrenadantes de los cultivos, a los que se les cuantificó por ELISA la citoquina liberada por los distintos LPS. Como controles se utilizó LPS comerciales rugoso y liso de salmonella typhimurium. Los resultados muestran que todas las preparaciones de LPS de H. pylori inducen actividad mitogénica y estimulan la síntesis de FNT alfa en células esplénicas de ratón. En conclusión, se sugiere un importante rol de LPS como factor de virulencia en esta especie el que estaría contribuyendo a su patogenicidad para el hombre

Estudio de susceptibilidad al vino tinto chileno y al resveratrol sobre cepas de helicobacter pylori / Helicobacter pylori strains susceptibility to chilean red wine and resveratrol

En los últimos años se han estudiado numerosas propiedades del vino tinto, algunas relacionadas con la salud humana. Así, se ha observado disminución de enfermedades cardiovasculares e infección por H. pylori en bebedores moderados, propiedad que podría estar condicionada a la presencia de resveratrol en el vino. En este trabajo, se investigó la actividad anti H. pylori de 16 vinos tintos chilenos (cepas Cabernet Sauvignon, Cabernet Merlot, Cabernet Orgánico y Pinot Noir) y de extractos activos de dos vinos seleccionados al azar, utilizando el método de difusión en agar. El 100 por ciento de los vinos tintos en estudio presentó algún grado de actividad antibacteriana sobre las seis cepas de H. pylori estudiadas. Por otra parte, las cepas fueron heterogéneas en su susceptibilidad frente a un mismo vino. El extracto activo (extracto diclorometánico) de los dos vinos seleccionados al azar demostró buena actividad sobre todas las cepas ensayadas, y el compuesto activo principal resultó ser el resveratrol. Sólo una de las seis cepas fue moderadamente resistente a 80 µg/ml del compuesto puro, obtenido comercialmente. Los resultados presentados indican que los vinos tintos chilenos tienen actividad antibacteriana sobre H. pylori, la cual depende principalmente de la presencia de resveratrol

Aspectos que afectan el análisis de contenido de ADN por citometría de flujo / Factors that affect DNA content analysis by flow cytometry

DNA ploidy and cell cycle analysis by flow cytometry is used to obtain additional information about the diagnosis and prognosis of different types of cancer. However, there are several disagreements among authors about the tissue source (fresh-frozen or paraffin embedded), cellular dissociation methods (mechanical, enzymatic or other), use of different dyes, lasers, analysis software with different mathematical models and interpretation of results. A discussion about the different aspects that affect the study of DNA ploidy and cell cycle and a consensus in publications is mandatory. A strict control of analysis processes and data interpretation is also necessary

Lesiones elevadas de la vesícula biliar / Upper injuries of the gallbladder

La prevalencia de lesiones elevadas de la mucosa vesicular (LEV) varía entre el 1 y 8,5 por ciento. Se presenta la experiencia en pacientes con LEV, con o sin patología litiásica agregada, y su relación con clínica de enfermedad biliar. Se trata de pacientes sometidos a colecistectomía entre el 1 de agosto de 1991 y el 1 de enero de 1997 (600 procedimientos). Se encuentran 43 LEV benignas (97,7 por ciento se intervienen por videolaparoscopia) y un adenocarcinoma intramucoso. 29 mujeres y 14 hombres, edad promedio 47,3 años (rango 15-79). El 69,8 por ciento se asocia a colelitiasis. 100 por ciento de los pacientes son sintomáticos. LEV más frecuente: pólipo de colesterol (60,5 por ciento) adenomioma (23,2 por ciento) pólipos hiperplásticos (16,3 por ciento). Respecto al número de lesiones, una lesión elevada: 48,8 por ciento, 25,6 por ciento dos o tres y 25,6 por ciento más de tres. La localización más frecuente es en el cuerpo (32,5 por ciento). Tamaño promedio: 5,0 mm (rango 1-16 mm) y 7 por ciento mayores a 10 mm. Patología vesicular agregada más frecuente: asociación colecistitis crónica y colesterolosis, independiente de la presencia de litiasis. En esta casuística la incidencia de LEV es 7,3 por ciento. De las 43 LEV, 2,3 por ciento es una lesión maligna. Al considerar: los síntomas, la condición de premalignidad de algunas (adenoma, adenomioma), los hallazgos macroscópicos de videolaparoscopia y del estudio histopatológico, creemos que son causas para proponer la colecistectomía como indicación para estas lesiones

Parámetros en el pronóstico del carcinoma gástrico avanzado: evaluación de clasificación tradicional y técnica fluocitométrica en el seguimiento de 32 casos / Parameters of the prognosis in advanced gastric carcinoma: evaluation of tradictional classification and flow cytometry technique in 32 cases

El objetivo es demostrar el valor del índice de ADN de proliferación celular (fase S) como factores de importancia pronóstica en el cáncer gástrico avanzado (CGA) frente a estudio tradicional (clasificación japonesa), comparando estadísticamente las curvas de sobrevida a 5 años (Kaplan-Meier) de 32 pacientes intervenidos entre 1979 y 1995, que cumplen con: gastrectomía total por CGA, resección curativa, sin tratamiento complementario; invasión hasta la serosa, compromiso hasta la segunda barrera ganglionar. Resultados de sobrevida: etapa I (C. Japonesa) = 63,3 por ciento, etapa II = 43,8 por ciento (p=0,3). Indice de ADN menor de 1,4=59,8 por ciento, índice de ADN mayor de 1,4=36,4 por ciento (p=0,3). Fase S menor de 35 por ciento = 71,6 por ciento, de manera similar a la clasificación tradicional, destacando la Fase S, indicando pronóstico en este grupo de pacientes con cáncer gástrico avanzado

Cáncer avanzado de la vesícula biliar: tratamiento combinado con cirugía y radioterapia: estudio prospectivo sobre 34 casos / Gallbladder advanced cancer: combined treatment by surgery and radiotherapy: prospective study about 34 cases

El cáncer vesicular en Chile es la primera causa de muertes por muertes por cáncer en mujeres, y su pésimo pronóstico a cinco años nada lo ha hecho variar. A partir de 1988, comenzamos un protocolo prospectivo de manejo del cáncer vesicular avanzado que compromete de muscular a serosa vesicular inclusive. El protocolo utilizado combina la colecistectomía con radioterapia más quimiosensibilización. Se seleccionaron para el estudio 34 pacientes con el siguiente criterio: pacientes a los que se les practicó una colecistectomia por enfermedad calculosa biliar y en quienes se encontró en la anatomía patológica del cáncer que puede comprometer desde la muscular a la serosa vesicular inclusive, y no tenían evidencias de enfermedad cancerosa extravesiculr. Veinte pacientes recibieron tratamiento complementario entre la tercera y sexta semana postcirugía consistente en: radioterapia abdomen total 2100 cG y más lecho vesicular 5400 cGy y quimiopotenciación con 5-FU 500 mg/m² y leucovorina 20 mg/m² en primera y última semana de la radioterapia. Catorce pacientes admitidos no pudieron acceder al tratamiento complementario y se transformaron, así, en nuestro grupo de control. La sobrevida global a cinco años (n=34) fue 48,7 por ciento. La sobrevida a cinco años para los pacientes con tratamiento completo (n=20) fue 62,5 por ciento. Sobrevida a cinco años para los pacientes con colecistectomia solamente (n=14) fue 28,6 por ciento. Las curvas de sobrevida entre los dos grupos establecen diferencias significativa. El estudio realizado, en que el paciente tratado en forma completa con menor seguimiento tiene 13 meses y el mayor 112 meses, con una media de 23,5 meses, y los resultados de sobrevida a cinco años de 62,5 por ciento nos permite proponer su aplicación para el manejo de pacientes portadores de cáncer vesicular así expuesto