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Appl Microbiol Biotechnol ; 63(5): 549-52, 2004 Feb.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-12827321

RESUMO

The cyclohexanone monooxygenase ( CHMO) gene of Acinetobacter sp. NCIMB 9871 was simultaneously expressed with the genes encoding molecular chaperones and foldases in Escherichia coli. While the expression of the CHMO gene alone resulted in the formation of inclusion bodies, coexpression of the chaperone or foldase genes remarkably increased the production of soluble CHMO enzyme in recombinant E. coli. Furthermore, it was found that molecular chaperones were more beneficial than foldases for enhancing active CHMO enzyme production. The recombinant E. coli strain simultaneously expressing the genes for CHMO, GroEL/GroES and DnaK/DnaJ/GrpE showed a specific CHMO activity of 111 units g(-1) cell protein, corresponding to a 38-fold enhancement in CHMO activity compared with the control E. coli strain expressing the CHMO gene alone.


Assuntos
Proteínas de Escherichia coli , Escherichia coli/genética , Chaperonas Moleculares/metabolismo , Oxigenases/genética , Proteínas Recombinantes/biossíntese , Proteínas Recombinantes/metabolismo , Acinetobacter/enzimologia , Acinetobacter/genética , Proteínas de Bactérias/biossíntese , Proteínas de Bactérias/genética , Proteínas de Bactérias/metabolismo , Chaperonina 10/biossíntese , Chaperonina 10/genética , Chaperonina 10/metabolismo , Chaperonina 60/biossíntese , Chaperonina 60/genética , Chaperonina 60/metabolismo , Clonagem Molecular , Escherichia coli/metabolismo , Expressão Gênica , Genes Bacterianos , Proteínas de Choque Térmico HSP40 , Proteínas de Choque Térmico HSP70/biossíntese , Proteínas de Choque Térmico HSP70/genética , Proteínas de Choque Térmico HSP70/metabolismo , Proteínas de Choque Térmico/biossíntese , Proteínas de Choque Térmico/genética , Proteínas de Choque Térmico/metabolismo , Chaperonas Moleculares/genética , Oxigenases/biossíntese , Oxigenases/metabolismo , Isomerases de Dissulfetos de Proteínas/biossíntese , Isomerases de Dissulfetos de Proteínas/genética , Isomerases de Dissulfetos de Proteínas/metabolismo , Proteínas Recombinantes/química , Solubilidade
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