RESUMO
KlICL1, encoding the isocitrate lyase of Kluyveromyces lactis, was isolated by complementation of the Saccharomyces cerevisiae icl1 deletion mutant. Sequence analysis revealed an open reading frame of 1626 nucleotides encoding a protein with 542 amino acids. The deduced protein shows extensive homologies to isocitrate lyases from various organisms, with an overall identity of 69% to the enzyme from S. cerevisiae. The KlICL1 gene has two major transcription start-points, located at -113 bp and -95 bp relative to the ATG translation start codon. The gene is expressed on ethanol medium only in respiratory-competent cells. Transcription is repressed by glucose. Mutants carrying a Klcat8 deletion lack the ability to derepress KlICL1 transcription. A Klicl1 deletion mutant does not grow on ethanol medium and lacks any isocitrate lyase activity. A strain lacking the gene KlFBP1, which encodes the gluconeogenic enzyme fructose 1,6-bisphosphatase, lacks the ability to grow on non-fermentable carbon sources. This implies that K. lactis does not contain additional isoenzymes catalyzing either of the reactions. Enzyme assays revealed that neither KlIcl1p nor KlFbp1p are subject to catabolite inactivation. However, the respective enzymes from S. cerevisiae are efficiently inactivated when expressed in K. lactis. Thus, despite the extensive sequence similarities of the enzymes involved, non-fermentative carbohydrate metabolism in the two yeasts displays distinct regulatory properties.
Assuntos
Glucose/metabolismo , Isocitrato Liase/antagonistas & inibidores , Kluyveromyces/enzimologia , Ácido Acético/metabolismo , Sequência de Aminoácidos , Ativação Enzimática/genética , Etanol/metabolismo , Proteínas Fúngicas/genética , Proteínas Fúngicas/metabolismo , Deleção de Genes , Regulação Fúngica da Expressão Gênica , Vetores Genéticos , Glicerol/metabolismo , Isocitrato Liase/genética , Kluyveromyces/genética , Dados de Sequência Molecular , Regiões Promotoras Genéticas , Saccharomyces cerevisiae/genética , Alinhamento de Sequência , Homologia de Sequência do Ácido NucleicoRESUMO
La introducción del LAAM en el tratamiento farmacológico de la dependencia a opiáceos, supone un avance importante, al poder diversificar el uso de opioides que hasta el momento, en nuestro país, se había reducido a la metadona.El objetivo de este trabajo ha sido la identificación de nuevos perfiles de uso del LAAM , teniendo en cuenta aspectos farmacocinéticos y posibles interacciones con otros fármacos y apoyado por los resultados obtenidos sobre niveles plasmáticos de metadona y su posible aplicación al LAAM. En el momento actual, su perfil de uso sólo ha sido para pacientes en metadona estabilizados, con buena respuesta al tratamiento, y a los que se deseaba flexibilizar y espaciar la administración diaria . En este artículo se proponen otros perfiles de uso, tales como programas de alto umbral orientados al cambio con desintoxicación y posterior paso a programa libre de drogas y sobre todo pacientes en metadona que pierden estabilidad y presentan síndrome de abstinencia a opiáceos, con disminución de los niveles plasmáticos de metadona, debido a interacciones medicamentosas o a otros motivos. Será necesario realizar estudios con los perfiles propuestos, que amplíen el uso del LAAM para pacientes que tienen problemas con la metadona, como una alternativa terapeútica, complementada con la monitorización en plasma como un instrumento de ayuda y evaluación que mejore la eficacia de los mismos. (AU)
