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APMIS ; 123(11): 945-50, 2015 Nov.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-26332098

RESUMO

Acute bacterial meningitis causes high morbidity and mortality; the associated clinical symptoms often are insensitive or non-specific; and the pathogenic bacteria are geographically diverse. Clinical diagnosis requires a rapid and accurate methodology. This study aimed to develop a new multiplex polymerase chain reaction (mPCR) assay to detect simultaneously six major bacteria that cause adult bacterial meningitis in Taiwan: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, and Acinetobacter baumannii. Species-specific primers for the six bacteria were developed using reference strains. The specificities of the mPCRs for these bacteria were validated, and the sensitivities were evaluated via serial dilutions. The mPCR assay specifically detected all of the six pathogens, particularly with sensitivities of 12 colony forming units (CFU)/mL, 90 CFU/mL, and 390 CFU/mL for E. coli, S. pneumoniae, and K. pneumoniae, respectively. This mPCR assay is a rapid and specific tool to detect the six major bacterial pathogens that cause acute adult meningitis in Taiwan, particularly sensitive for detecting E. coli, S. pneumoniae, and K. pneumoniae. The assay may facilitate early diagnosis and guidance for antimicrobial therapy for adult patients with this deadly disease in Taiwan.


Assuntos
Meningites Bacterianas/diagnóstico , Meningites Bacterianas/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase Multiplex/métodos , Acinetobacter baumannii/genética , Acinetobacter baumannii/isolamento & purificação , Adulto , Técnicas Bacteriológicas/métodos , Técnicas Bacteriológicas/estatística & dados numéricos , Sequência de Bases , Primers do DNA/genética , DNA Bacteriano/genética , DNA Bacteriano/isolamento & purificação , Escherichia coli/genética , Escherichia coli/isolamento & purificação , Genes Bacterianos , Humanos , Klebsiella pneumoniae/genética , Klebsiella pneumoniae/isolamento & purificação , Meningite devida a Escherichia coli/diagnóstico , Meningite devida a Escherichia coli/microbiologia , Meningite Pneumocócica/diagnóstico , Meningite Pneumocócica/microbiologia , Dados de Sequência Molecular , Reação em Cadeia da Polimerase Multiplex/estatística & dados numéricos , Pseudomonas aeruginosa/genética , Pseudomonas aeruginosa/isolamento & purificação , Sensibilidade e Especificidade , Staphylococcus aureus/genética , Staphylococcus aureus/isolamento & purificação , Streptococcus pneumoniae/genética , Streptococcus pneumoniae/isolamento & purificação , Taiwan
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