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Elife ; 82019 04 29.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-31033442

RESUMO

After Salmonella is phagocytosed, it resides in an acidic vacuole. Its cytoplasm acidifies to pH 5.6; acidification activates pathogenicity island 2 (SPI-2). SPI-2 encodes a type three secretion system whose effectors modify the vacuole, driving endosomal tubulation. Using super-resolution imaging in single bacterial cells, we show that low pH induces expression of the SPI-2 SsrA/B signaling system. Single particle tracking, atomic force microscopy, and single molecule unzipping assays identified pH-dependent stimulation of DNA binding by SsrB. A so-called phosphomimetic form (D56E) was unable to bind to DNA in live cells. Acid-dependent DNA binding was not intrinsic to regulators, as PhoP and OmpR binding was not pH-sensitive. The low level of SPI-2 injectisomes observed in single cells is not due to fluctuating SsrB levels. This work highlights the surprising role that acid pH plays in virulence and intracellular lifestyles of Salmonella; modifying acid survival pathways represents a target for inhibiting Salmonella.


Assuntos
Ácidos/farmacologia , Proteínas de Bactérias/metabolismo , Concentração de Íons de Hidrogênio , Proteínas de Membrana/metabolismo , Conformação Molecular/efeitos dos fármacos , Salmonella typhimurium/efeitos dos fármacos , Salmonella typhimurium/metabolismo , Fatores de Transcrição/metabolismo , Proteínas de Bactérias/efeitos dos fármacos , Citoplasma , Proteínas de Ligação a DNA/efeitos dos fármacos , Proteínas de Ligação a DNA/metabolismo , Regulação Bacteriana da Expressão Gênica , Histidina Quinase/metabolismo , Proteínas de Membrana/efeitos dos fármacos , Regiões Promotoras Genéticas , Salmonella typhimurium/citologia , Salmonella typhimurium/genética , Transativadores/metabolismo , Fatores de Transcrição/efeitos dos fármacos , Vacúolos/metabolismo , Virulência
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