RESUMO
Functional enzyme assays to detect sublethal poisoning of Neotropical fish are paramount. Accordingly, we assayed a glutathione S-transferase (GST) activity in liver and kidney cytosols from Piaractus mesopotamicus injected with methyl parathion or benzo[a]pyrene using the substrate 1-chloro-2,4-dinitrobenzene (CDNB), which is the usual substrate for assaying a known general activity of GST. Since the most reactive substrate is required to reveal specific changes in enzyme activity, we also used two alternative substrates, 1,2-dichloro-4-nitrobenzene (DCNB) and ethacrynic acid (ETHA). Activities with CDNB or ETHA did not change. However, assays with DCNB showed that methyl parathion caused a decrease in GST activity in the liver on the 24th, 48th and 96th hour after the injection. DCNB also revealed that GST activity in the liver increased seven days after benzo[a]pyrene injection, coming down to normal after fourteen days. Benzo[a]pyrene, but not methyl parathion, increased the activities with DCNB in cytosol from the kidney seven and fourteen days after the injection. Thus, a decreased liver GST activity assayed with DCNB corresponded to contamination of P. mesopotamicus with methyl parathion. The increase of this GST activity in the liver and the kidney correlates to pacu contamination with polycyclic aromatic hydrocarbons.
Ensaios práticos de enzimas para detectar contaminação subletal de peixes neotropicais são da maior importância. Assim, ensaiamos a atividade da glutationa S-transferase (GST) em citosóis de fígado e de rim de Piaractus mesopotamicus injetados com metilparation ou benzo[a]pireno usando 1-cloro-2,4-dinitrobenzeno (CDNB), o substrato usual para ensaiar uma denominada atividade geral de GST. Desde que para indicar alterações na atividade de uma isoenzima, é necessário o substrato mais reativo, também usamos dois substratos alternativos, o 1,2-dicloro-4-nitrobenzeno (DCNB) e o ácido etacrínico (ETHA). As atividades com CDNB ou ETHA não mudaram. Entretanto, ensaios com DCNB mostraram que metilparation decresceu a atividade de GST no fígado em 24, 48 e 96 horas depois da injeção. O DCNB também revelou que sete dias depois da injeção de benzo[a]pireno a atividade da GST aumentou no fígado, normalizando depois de 14 dias. Benzo[a]pireno, mas não metilparation, aumentou as atividades com DCNB no citosol dos rins sete e 14 dias depois da injeção. Assim, uma atividade de GST ensaiada com DCNB diminuída no fígado correspondeu à contaminação de P. mesopotamicus com metilparation. O aumento dessa atividade de GST no fígado e nos rins está correlacionada com contaminação do pacu por hidrocarbonetos policíclicos aromáticos.