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EMBO J ; 19(14): 3683-93, 2000 Jul 17.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-10899122

RESUMO

The CCAAT box transcription factor (CBTF) is a multimeric transcription factor that activates expression of the haematopoietic regulatory factor, GATA-2. The 122 kDa subunit of this complex, CBTF(122), is cytoplasmic in fertilized Xenopus eggs and subsequently translocates to the nucleus prior to activation of zygotic GATA-2 transcription at gastrulation. Here we present data suggesting both a role for CBTF(122) prior to its nuclear translocation and the mechanism that retains it in the cytoplasm before the midblastula transition (MBT). CBTF(122) and its variant CBTF(98) are associated with translationally quiescent mRNP complexes. We show that CBTF(122) RNA binding activity is both necessary and sufficient for its cytoplasmic retention during early development. The introduction of an additional nuclear localization signal to CBTF(122) is insufficient to overcome this retention, suggesting that RNA binding acts as a cytoplasmic anchor for CBTF(122). Destruction of endogenous RNA by microinjection of RNase promotes premature nuclear translocation of CBTF(122). Thus, the nuclear translocation of CBTF(122) at the MBT is likely to be coupled to the degradation of maternal mRNA that occurs at that stage.


Assuntos
Citoplasma/metabolismo , Proteínas de Ligação a DNA/metabolismo , RNA Mensageiro/metabolismo , Proteínas de Ligação a RNA/metabolismo , Fatores de Transcrição/metabolismo , Xenopus laevis/embriologia , Regiões 5' não Traduzidas/genética , Sequência de Aminoácidos , Animais , Sequência de Bases , Transporte Biológico , Blastocisto/citologia , Blastocisto/metabolismo , Proteínas Estimuladoras de Ligação a CCAAT , Núcleo Celular/metabolismo , Clonagem Molecular , Proteínas de Ligação a DNA/química , Proteínas de Ligação a DNA/genética , Fator de Transcrição GATA2 , Regulação da Expressão Gênica no Desenvolvimento , Imuno-Histoquímica , Dados de Sequência Molecular , Sinais de Localização Nuclear , Isoformas de Proteínas/química , Isoformas de Proteínas/genética , Isoformas de Proteínas/metabolismo , Proteínas de Ligação a RNA/química , Proteínas de Ligação a RNA/genética , Ribonucleases/metabolismo , Ribonucleoproteínas/metabolismo , Alinhamento de Sequência , Fatores de Transcrição/química , Fatores de Transcrição/genética , Proteínas de Xenopus , Xenopus laevis/genética
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