Human Fallopian Tube - Derived Mesenchymal Stem Cells Inhibit Experimental Autoimmune Encephalomyelitis by Suppressing Th1/Th17 Activation and Migration to Central Nervous System.

Mesenchymal stem cells comprise a natural reservoir of undifferentiated cells within adult tissues. Given their self-renewal, multipotency, regenerative potential and immunomodulatory properties, MSCs have been reported as a promising cell therapy for the treatment of different diseases, including neurodegenerative and autoimmune diseases. In this study, we investigated the immunomodulatory properties of human tubal mesenchymal stem cells (htMSCs) using the EAE model. htMSCs were able to suppress dendritic cells activation downregulating antigen presentation-related molecules, such as MHCII, CD80 and CD86, while impairing IFN-γ and IL-17 and increasing IL-10 and IL-4 secretion. It further correlated with milder disease scores when compared to the control group due to fewer leukocytes infiltrating the CNS, specially Th1 and Th17 lymphocytes, associated with increased IL-10 secreting Tr1 cells. Conversely, microglia were less activated and infiltrating mononuclear cells secreted higher levels of IL-4 and IL-10 and expressed reduced chemokine receptors as CCR4, CCR6 and CCR8. qPCR of the spinal cords revealed upregulation of indoleamine-2,3-dioxygenase (IDO) and brain derived neurotrophic factor (BDNF). Taken together, here evidenced the potential of htMSCs as an alternative for the treatment of inflammatory, autoimmune or neurodegenerative diseases.

Murine endometrial-derived mesenchymal stem cells suppress experimental autoimmune encephalomyelitis depending on indoleamine-2,3-dioxygenase expression.

Cellular therapy with mesenchymal stem cells (MSCs) is a huge challenge for scientists, as little translational relevance has been achieved. However, many studies using MSCs have proved their suppressive and regenerative capacity. Thus, there is still a need for a better understanding of MSCs biology and the establishment of newer protocols, or to test unexplored tissue sources. Here, we demonstrate that murine endometrial-derived MSCs (meMSCs) suppress Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE). MSC-treated animals had milder disease, with a significant reduction in Th1 and Th17 lymphocytes in the lymph nodes and in the central nervous system (CNS). This was associated with increased Il27 and Cyp1a1 expression, and presence of IL-10-secreting T CD4+ cells. At EAE peak, animals had reduced CNS infiltrating cells, histopathology and demyelination. qPCR analysis evidenced the down-regulation of several pro-inflammatory genes and up-regulation of indoleamine-2,3-dioxygenase (IDO). Consistently, co-culturing of WT and IDO-/- meMSCs with T CD4+ cells evidenced the necessity of IDO on the suppression of encephalitogenic lymphocytes, and IDO-/- meMSCs were not able to suppress EAE. In addition, WT meMSCs stimulated with IL-17A and IFN-γ increased IDO expression and secretion of kynurenines in vitro, indicating a negative feedback loop. Pathogenic cytokines were increased when CD4+ T cells from AhR-/- mice were co-cultured with WT meMSC. In summary, our research evidences the suppressive activity of the unexplored meMSCs population, and shows the mechanism depends on IDO-kynurenines-Aryl hydrocarbon receptor (AhR) axis. To our knowledge this is the first report evidencing that the therapeutic potential of meMSCs relying on IDO expression.

Human Tubal-Derived Mesenchymal Stromal Cells Associated with Low Level Laser Therapy Significantly Reduces Cigarette Smoke-Induced COPD in C57BL/6 mice.

Cigarette smoke-induced chronic obstructive pulmonary disease is a very debilitating disease, with a very high prevalence worldwide, which results in a expressive economic and social burden. Therefore, new therapeutic approaches to treat these patients are of unquestionable relevance. The use of mesenchymal stromal cells (MSCs) is an innovative and yet accessible approach for pulmonary acute and chronic diseases, mainly due to its important immunoregulatory, anti-fibrogenic, anti-apoptotic and pro-angiogenic. Besides, the use of adjuvant therapies, whose aim is to boost or synergize with their function should be tested. Low level laser (LLL) therapy is a relatively new and promising approach, with very low cost, no invasiveness and no side effects. Here, we aimed to study the effectiveness of human tube derived MSCs (htMSCs) cell therapy associated with a 30mW/3J-660 nm LLL irradiation in experimental cigarette smoke-induced chronic obstructive pulmonary disease. Thus, C57BL/6 mice were exposed to cigarette smoke for 75 days (twice a day) and all experiments were performed on day 76. Experimental groups receive htMSCS either intraperitoneally or intranasally and/or LLL irradiation either alone or in association. We show that co-therapy greatly reduces lung inflammation, lowering the cellular infiltrate and pro-inflammatory cytokine secretion (IL-1ß, IL-6, TNF-α and KC), which were followed by decreased mucus production, collagen accumulation and tissue damage. These findings seemed to be secondary to the reduction of both NF-κB and NF-AT activation in lung tissues with a concomitant increase in IL-10. In summary, our data suggests that the concomitant use of MSCs + LLLT may be a promising therapeutic approach for lung inflammatory diseases as COPD.

Human fallopian tube mesenchymal stromal cells enhance bone regeneration in a xenotransplanted model.

We have recently reported that human fallopian tubes, which are discarded during surgical procedures of women submitted to sterilization or hysterectomies, are a rich source of human fallopian tube mesenchymal stromal cells (htMSCs). It has been previously shown that human mesenchymal stromal cells may be useful in enhancing the speed of bone regeneration. This prompted us to investigate whether htMSCs might be useful for the treatment of osteoporosis or other bone diseases, since they present a pronounced capacity for osteogenic differentiation in vitro. Based on this prior knowledge, our aim was to evaluate, in vivo, the osteogenic capacity of htMSCs to regenerate bone through an already described xenotransplantation model: nonimmunosuppressed (NIS) rats with cranial defects. htMSCs were obtained from five 30-50 years old healthy women and characterized by flow cytometry and for their multipotenciality in vitro capacity (osteogenic, chondrogenic and adipogenic differentiations). Two symmetric full-thickness cranial defects on each parietal region of seven NIS rats were performed. The left side (LS) of six animals was covered with CellCeram (Scaffdex)-a bioabsorbable ceramic composite scaffold that contains 60% hydroxyapatite and 40% ß-tricalciumphosphate-only, and the right side (RS) with the CellCeram and htMSCs (10(6) cells/scaffold). The animals were euthanized at 30, 60 and 90 days postoperatively and cranial tissue samples were taken for histological analysis. After 90 days we observed neobone formation in both sides. However, in animals euthanized 30 and 60 days after the procedure, a mature bone was observed only on the side with htMSCs. PCR and immunofluorescence analysis confirmed the presence of human DNA and thus that human cells were not rejected, which further supports the imunomodulatory property of htMSCs. In conclusion, htMSCs can be used successfully to enhance bone regeneration in vivo, opening a new field for future treatments of osteoporosis and bone reconstruction.

Biological effects and dose-response assessment of diesel exhaust particles on in vitro early embryo development in mice.

An increased risk of early pregnancy loss in women briefly exposed to high levels of ambient particulate matter during the preconceptional period was recently observed. The effects of this exposure on early embryo development are unknown. This study was designed to assess the dose-response and biological effects of diesel exhaust particles (DEP) on in vitro embryo development using the in vitro fertilization (IVF) mouse model. Zygotes obtained from superovulated mice after IVF were randomly cultured in different DEP concentrations (0, 0.2, 2, and 20 microg/cm(2)) for 5 days and observed for their capacity to attach and develop on a fibronectin matrix until day 8. Main outcome measures included blastocyst rates 96 and 120 h after insemination, hatching discriminatory score, total cell count, proportion of cell allocation to inner cell mass (ICM) and trophectoderm (TE), ICM morphology, attachment rate and outgrowth area, apoptosis and necrosis rates, and Oct-4 and Cdx-2 expression. Multivariate analysis showed a negative dose-dependent effect on early embryo development and hatching process, blastocyst cell allocation, and ICM morphology. Although blastocyst attachment and outgrowth were not affected by DEP, a significant impairment of ICM integrity was observed in day 8 blastocysts. Cell death through apoptosis was significantly higher after DEP exposure. Oct-4 expression and the Oct-4/Cdx-2 ratio were significantly decreased in day 5 blastocysts irrespective of DEP concentration. Results suggest that DEP appear to play an important role in disrupting cell lineage segregation and ICM morphological integrity even at lower concentrations, compromising future growth and viability of the blastocyst.

Impact of short-term preconceptional exposure to particulate air pollution on treatment outcome in couples undergoing in vitro fertilization and embryo transfer (IVF/ET).

PURPOSE: To assess the potential effects of short-term exposure to particulate air pollution during follicular phase on clinical, laboratory, and pregnancy outcomes of women undergoing IVF/ET. METHODS: Retrospective cohort study of 400 first IVF/ET cycles of women exposed to ambient particulate matter during follicular phase. Particulate matter (PM) was categorized into quartiles (Q(1): < or =30.48 microg/m(3), Q(2): 30.49-42.00 microg/m(3), Q(3): 42.01-56.72 microg/m(3), and Q(4): >56.72 microg/m(3)). RESULTS: Clinical, laboratory, or treatment variables were not affected by follicular phase PM exposure periods. Women exposed to Q(4) period during the follicular phase of conception cycles had a higher risk of miscarriage (odds ratio, 5.05; 95% confidence interval: 1.04-25.51) when compared to women exposed to Q(1-3) periods. CONCLUSION: Our results show an association between brief exposure to high levels of ambient PM during the preconceptional period and early pregnancy loss, although no effect of this exposure on clinical, laboratory, and treatment outcomes was observed.

Effects of exposure to high levels of particulate air pollution during the follicular phase of the conception cycle on pregnancy outcome in couples undergoing in vitro fertilization and embryo transfer.

The objective of this retrospective cohort study was to assess the potential effects of preconceptional short-term exposure to particulate air pollution in a real-world situation on pregnancy outcome in infertile women evaluating the possible role of IVF/embryo transfer treatment on this outcome using women who had conceived naturally for the first time during the same time frame as a matched control group. The study provides evidence for an association between brief exposure to high levels of ambient particulate matter (aerodynamic diameter

Human fallopian tube: a new source of multipotent adult mesenchymal stem cells discarded in surgical procedures.

BACKGROUND: The possibility of using stem cells for regenerative medicine has opened a new field of investigation. The search for sources to obtain multipotent stem cells from discarded tissues or through non-invasive procedures is of great interest. It has been shown that mesenchymal stem cells (MSCs) obtained from umbilical cords, dental pulp and adipose tissue, which are all biological discards, are able to differentiate into muscle, fat, bone and cartilage cell lineages. The aim of this study was to isolate, expand, characterize and assess the differentiation potential of MSCs from human fallopian tubes (hFTs). METHODS: Lineages of hFTs were expanded, had their karyotype analyzed, were characterized by flow cytometry and underwent in vitro adipogenic, chondrogenic, osteogenic, and myogenic differentiation. RESULTS: Here we show for the first time that hFTs, which are discarded after some gynecological procedures, are a rich additional source of MSCs, which we designated as human tube MSCs (htMSCs). CONCLUSION: Human tube MSCs can be easily isolated, expanded in vitro, present a mesenchymal profile and are able to differentiate into muscle, fat, cartilage and bone in vitro.

In vitro fertilization, embryo development, and cell lineage segregation after pre- and/or postnatal exposure of female mice to ambient fine particulate matter.

OBJECTIVE: To evaluate effects of pre- and/or postnatal exposure to ambient fine particulate matter on fertilization, embryo development, and cell lineage segregation in preimplantation blastocysts using the IVF mouse model. DESIGN: Animal model. SETTING: Academic institution. ANIMAL(S): Six-week-old, superovulated mice. INTERVENTION(S): Pre- and postnatal exposure to filtered air (FA-FA), filtered-ambient air (FA-AA), or ambient air (AA-AA) in exposure chambers 24 hours a day for 9 weeks. MAIN OUTCOME MEASURE(S): Gestation length, litter size, sex ratio, ovarian response to superovulation, fertilization rate, embryo development, blastocyst and hatching rates, total cell count, and proportion of cell allocation to inner-cell mass (ICM) and trophectoderm (TE). RESULT(S): Gestation length, litter size and birth weight, live-birth index, and sex ratio were similar among exposure groups. Ovarian response was not affected by the exposure protocol. A multivariate effect for pre- and/or postnatal exposure to ambient fine particulate matter on IVF, embryo development, and blastocyst differential staining was found. Cell counts in ICM and ICM/TE ratios in blastocysts produced in the FA-FA protocol were significantly higher than in blastocysts produced in the FA-AA and AA-AA protocols. No difference in total cell count was observed among groups. CONCLUSION(S): Our study suggests that exposure to ambient fine particulate matter may negatively affect female reproductive health by disrupting the lineage specification at the blastocyst stage without interfering in early development of the mouse embryo.

In vitro embryo development after pre- and/ orpostnatal exposure of five-month-old Swiss Albino female mice to particulate air pollution / Desenvolvimento embrionário in vitro após a exposição pré e/oupós-natal de fêmeas de camundongo da linhagem Swiss Albinocom cinco meses de idade à poluição ambiental particulada

Objective: to evaluate the effects of pre- and/or postnatal exposure to particulate air pollution on fertilization, embryo development, and cell lineage segregation in preimplantation blastocysts during late-life reproductive period, using the in vitro fertilization (IVF) mouse model. Materials and methods: five-month-old mice underwent superovulation and were pre- and/or postnatally exposed to filtered air (FA-FA), filtered-ambient air (FA-AA), or ambient air (AA-AA) in exposure chambers, 24 hours per day, during six months. Results: ovarian response was not affected by the exposure protocol. A multivariate effect for pre- and/or postnatal exposure to ambient air on blastocyst differential staining, but not on IVF and embryo development, was found. Cell counts in inner cell mass (ICM) and ICM/trophectoderm ratios in blastocysts produced in FA-FA protocol were significantly higher than in blastocysts produced in FA-AA and AA-AA protocols. Conclusions: our study suggests that the exposure to particulate air pollution of a large urban center does not affect ovarian function but may negatively affect the female reproductive health in the late-life period by disrupting the lineage specification at the blastocyst stage.

Objetivo: avaliar os efeitos da exposição pré e/ou pós-natal ao ar ambiente no final da vida reprodutiva sobre a fertilização, desenvolvimento embrionário e segregação das linhagens celulares em blastocistos pré-implantacionais, utilizando o modelo de fertilização in vitro (FIV) de camundongo. Material e métodos: fêmeas de camundongo com idade de cinco meses tiveram a ovulação estimulada e, no período pré e/ou pós-natal, foram expostas ao arfiltrado (AF-AF), ar filtrado-ar ambiente (AF-AA) ou ar ambiente-ar ambiente (AA-AA) em câmaras de exposição, 24 horas por dia durante seis meses. Resultados: a resposta ovariana não foi afetada pelo protocolo de exposição. Um efeito multivariável para a exposição pré e/ou pós-natal ao material particulado fino ambiente sobre coloração diferencial dos blastocistos, mas não sobre a FIV e o desenvolvimento embrionário, foi observado. A contagem celular na massa celular interna (MCI) e a razão MCI/trofoectoderma dos blastocistos produzidos no protocolo AF-AF foram significativamente maioresdo que aquelas em blastocistos produzidos nos protocolos FA-AA e AA-AA. Conclusões: nosso estudo sugere que a exposição à poluição ambiental particulada de um grande centro urbano não altera a função ovariana, mas pode afetar negativamente a saúde reprodutiva feminina no período final do menacme, em razão da alteração da especificação das linhagens celulares do embrião no estágio de blastocisto.

Comparison of the efficacy of two commercially available media for culturing one-cell embryos in the in vitro fertilization mouse model.

OBJECTIVE: To examine the effects of two commercial media on the development of mouse ova fertilized in vitro to the blastocyst stage. DESIGN: Animal model. SETTING: Academic institution. ANIMAL(S): Eight-week old, superovulated mice. INTERVENTION(S): One-cell embryos cultured in vitro up to the blastocyst stage in potassium-enriched simplex optimized medium (KSOM) or G1/G2 medium. MAIN OUTCOME MEASURE(S): Blastocyst and hatching rates, total cell number count, and proportion of allocation of cells to the inner cell mass (ICM) and trophectoderm (TE). RESULT(S): The percentage of zygotes that developed to the blastocyst stage 96 and 120 hours after insemination was statistically significantly higher in the KSOM group. The percentage of blastocysts that partially or completely hatched by day 5 of culture was 84% and 71% for the KSOM and G1/G2 groups, respectively, showing a statistically significant difference between the groups. The mean number of ICM cells was 11.7 +/- 4.0 and 9.2 +/- 5.2 for the zygotes cultured in KSOM and G1/G2 media, respectively, revealing a statistically significantly higher cell number in the ICM of blastocysts derived from culture in KSOM medium. The ICM/TE ratio in the blastocysts cultured in KSOM or G1/G2 media was similar in both groups. CONCLUSION(S): Commercially available KSOM medium is superior to sequential G1/G2 media for culturing one-cell embryos up to the blastocyst stage in the mouse IVF model.

O emprego do citrato de clomifeno e gonadotrofina de mulher menopausada como alternativa de hiperestimulaçäo ovariana em pacientes com resposta idiopática inadequada na fertilizaçäo in vitro / Clomiphene citrate and gonadotropins of woman in menopause as an alternative approach to ovarian hyperstimulation in idiopatic poor response for in vitro fertilization

OBJETIVO: Avaliar os efeitos do esquema de estimulaçäo ovariana com citrato de clomifeno (CC)/gonadotrofina de mulher menopausada (hMG) nos resultados da fertilizaçäo in vitro e transferência de embriöes (FIVETE) em um grupo de pacientes que apresentaram resposta ovariana inadequada em ciclos prévios de FIVETE estimulados com um análogo do GnRH e gonadotrofinas (protocolo longo). MÉTODO: Os resultados de FIVETE em ciclos estimulados com CC/hMG e com o protocolo longo de uma mesma paciente foram comparados. Oito pacientes (grupo I) que apresentaram uma resposta ovariana idiopática inadequada (idade: < 38 anos, FSH<15 mU/mL, E2<60pg/mL, ciclos menstruais regulares e ausência de cirurgia ovariana) ao protocolo longo em 11 ciclos de FIVETE (grupo Ia), foram estimuladas com CC/hMG em 20 ciclos (grupo Ib). Administrou-se CC 100 mg/dia por 5 dias a partir do 3§ dia do ciclo e o hMG 150 UI/dia foi iniciado no 5§ dia, sendo a dose modificada de acordo com a resposta da paciente. Dezenove ciclos de 15 pacientes com resposta ovariana adequada ao protocolo longo, durante o mesmo intervalo de tempo, foram incluídas neste estudo como grupo controle (grupo II). Casais com fator masculino de infertilidade foram excluídos. RESULTADOS: As pacientes avaliadas näo apresentaram diferença em termos de idade, duraçäo da infertilidade e do índice de massa corpórea. Embora a duraçäo do estímulo ovariano tenha sido similar nos 3 grupos: 10,1 + 0,76, 10,9 + 0,34 e 10,3 + 0,21 dias para os grupos Ia, Ib e II, respectivamente, o número médio de ampolas de hMG utilizado no grupo Ib (13,6 + 1,36) foi significativamente menor (p<0.001) quando comparado aos grupos Ia e II (49,9 + 3,20, 43,7 + 2,73; respectivamente). A taxa de cancelamento foi de 36,4 por cento, 25,0 por cento e 0 por cento (grupos Ia, Ib e II; respectivamente), näo revelando diferença entre os grupos Ia e Ib. Os números médios de oócitos MII inseminados e fertilizados foram de 4,9 + 0,8 e 1,3 + 0,4 no grupo Ia e de 4,4 + 0,3 e 2,1 + 0,2 no grupo Ib, näo mostrando diferença entre os grupos. Contudo, os números médios de oócitos MII inseminados e fertilizados no grupo II, 11,4 + 2,0 (p<0.01) e 7,9 + 2,0 (p=0.01), respectivamente, foram significativamente maiores quando comparados aqueles do grupos Ia e Ib...

Efeitos da anestesia endovenosa total com alfentanil e/ou propofol utilizada para a aspiraçäo folicular dirigida por ultra-sonografia transvaginal sobre os oócitos humanos em ciclos de fertilizaçäo in vitro e transferência de embriöes / The effects of total intravenous anesthesia with alfentanil and/or propofol for transvaginal untrasound-guided oocyte retrieval on the outcome of in vitro fertilization of human oocytes

OBJETIVO: Comparar os efeitos de dois protocolos de anestesia (grupo A: alfentanil/propofol; grupo B: propofol), utilizados para a aspiraçao folicular dirigida por ultra-sonografia transvaginal, nos resultados de um programa ambulatorial de fertilizaçao in vitro e tranasferência de embrioes (FIVETE). MÉTODO: Trinta e seis pacientes submetidas ao seu primeiro ciclo de FIVETE foram selecionadas. Casais com fator masculino de infertilidade foram excluídos. A estimulaçao ovariana foi realizada utilizando-se o protocolo longo de inibiçao com um análogo do GnRH (GnRH-a) seguido da administraçao de FSH/hMG. A aspiraçao folicular ocorreu cerca de 35 a 36 horas após a administraçao do hCG. A anestesia foi induzida com alfentanil 20 a 60 mg/Kg e propofol 2,5 mg/Kg em 17 pacientes (grupo A) e propofol 2,5 mg/Kg em 19 pacientes (grupo B). No grupo A, a anestesia foi mantida através da administraçao de doses de alfentanil de 7 a 15 mg/Kg e de propofol de 0,2 a 0,4 mg/Kg a cada 10 minutos. No grupo B, a anestesia foi mantida através da administraçao de doses de propofol de 0,4 a 0,8 mg/Kg a cada 10 minutos. A seleçao do protocolo de anestesia nao foi randomizada, mas resultado da preferência do anestesista em cada caso. RESULTADOS: As pacientes dos dois grupos nao revelaram diferença em termos de idade, duraçao da infertilidade, índice de massa corpórea, número de ampolas de FSH/hMG utilizadas e da duraçao da estimulaçao ovariana. O tempo total de anestesia foi de 34,9 + 3,4 (média+desvio padrao) minutos para o grupo A e 9,9+1,0 minutos para o grupo B (p<0.001). Contudo, a dose total de propofol utilizada foi similar nos dois grupos: 204,4+16,2 mg e 233,2+24,0 mg para os grupos A e B, respectivamente. O número total de oócitos MII inseminados foi 179 e 156 para os grupos A e B, respectivamente, nao revelando diferença entre os grupos. As taxas de fertilizaçao normal e de clivagem foram de 36,3 por cento (65/179) e 47,7 por cento (31/65) para o grupo A e, 77,6 por cento (121/156) e 84,3 por cento (102/121) para o grupo B, revelando uma diferença estatisticamente significativa entre os grupos (p<0.001; p=0.03, respectivamente). O grau embrionário médio (classificaçao de Veeck) e o número médio de embrioes transferidos foram de 2,3+1,20 e 2,1+0,23 para o grupo A e de 1,6+0,99 e 4,2+0,77 para o grupo B (p=0.01; p=0.02, respectivamente). As taxas de implantaçao/embriao transferido e de gestaçao clínica/ciclo com transferência no grupo A foram de 5,3 por cento e...

Padröes de desenvolvimento folicular em ciclos espontâneos e induzidos de pacientes inférteis portadoras de endometriose pélvica leve / Follicle growth patterns in spontaneous and induced cycles in infertili women with mild endometriosis

OBJETIVOS: avaliar os padroes de desenvolvimento folicular em ciclos espontâneos (CE) e os efeitos da hiperestimulaçao ovariana controlada com citrato de clomifeno (CC) e/ou gonadotrofina de mulher menopausada (HMG) e gonadotrofina coriônica humana (HCG) sobre a foliculogênese e taxas de gestaçao de pacientes inférteis portadoras de endometriose leve. MÉTODO: A avaliaçao sonográfica transvaginal seriada da dinâmica folicular foi realizada em 88 ciclos (CE, 21; CC/HMG/hCG, 29; HMG/HCG, 38) de 19 pacientes inférteis portadoras de endometriose pélvica (grupo de estudo) em comparaçao com 98 ciclos (CE, 27; CC/hMG/ hCG, 42; hMG/hCG, 29) de 21 casais portadores de infertilidade masculina (grupo controle). RESULTADOS: Foliculogênese normal foi observada em 50 (56.8 por cento) ciclos do grupo de estudo e em 88 (89.8 por cento) ciclos do grupo controle (p

Potencial ovulatório e reprodutivo de um coorte de folículos ovarianos no dia da administraçåo da gonadotrofina coriônica humana (HCG) em ciclos induzidos com citrato de clomifeno (CC) e/ou gonadotrofina de mulher menopausada / Ovulatory and reproductive potential of a cohort of follicles at the time of human chorionic gonadotropin (hCG) administration in clomiphene citrate and/or human menopausal gonadotropin-stimulated cycles

O presente estudo tem como objetivos comparar os parâmetros ultra-sonográficos do desenvolvimento folicular e endometrial, avaliar o potencial ovulatório de cada folículo ovariano de acordo com seu respectivo diâmetro médio (DFM) em resposta à gonadotrofina coriônica humana (HCG) e analisar a possível influência de cada um desses parâmetros nas taxas de gestaçåo de ciclos induzidos com o citrato de clomifeno (CC) e/ou gonadotrofina de mulher menopausada (HMG). Cento e três pacientes normoestrogênicas inférteis foram submetidas a 125 ciclos de hiperestimulaçåo ovariana controlada e foram divididas em dois grupos de acordo com o protocolo de estimulaçåo utilizado: grupo A (n=48) - HMG/HCG e grupo B (n=56) - CC/HMG/HCG. Verificou-se uma reduçåo de 36,4 por cento do núemro de ampolas de HMG utilizadas no grupo B (p<0,001), quando comparado ao grupo A. A distribuiçåo dos diagnósticos de infertilidade nåo revelou diferença entre os grupos. A Ultra-sonografia transvaginal seriada foi realizada diariamente, com o objetivo de avaliar o crescimento folicular, a espessura endometrial e as taxas de ovulaçåo por DFM no dia da administraçåo do HCG. As taxas de gestaçåo foram comparadas entre os grupos. As porcentagens de folículos medindo 12mm, 13-14mm, 15-16mm, 17-18mm, 19-20mm e > 20mm no dia da administraçåo do HCG, que subseqüentemente ovularam, foram 0 por cento e 0 por cento; 19,4 por cento e 23,2 por cento; 38,5 por cento e 66,1 por cento; 72,2 por cento e 91,7 por cento; 88,6 por cento e 97,6 por cento; 100 por cento e 92,3 por cento para os grupos A e B, respectivamente, nåo se observando diferença entre os dois grupos. As taxas de ovulaçåo foram significativamente menores (p<0,002, p<0,05; grupos A e B, respectivamente) para os folículos com DFM 16mm, quando comparados estes àqueles com DFM 17mm. O número total de folículos, ovulaçöes e espessura endometrial no dia da confirmaçåo da ovulaçåo nåo apresentou diferença quando ciclos com ou sem gestaçåo foram comparados. Considerando-se os ciclos com gestaçåo dos dois grupos, a distribuiçåo do DFM no dia da administraçåo do HCG, dos folículos que ovularam, foi significativamente diferente (p<0,001). A incidência de folículos com DFM 17mm no dia da administraçåo do HCG foi significativamente maior (p=0,01) nos ciclos de gestaçåo do grupo A quando comparados a estes ciclos do grupo B. Gestaçöes clínicas foram observadas em 17 (29,3 por cento) e 11 (16,4 por cento) ciclos dos grupos A e B, respectivamente, nåo se verificando diferença estatística entre os dois grupos (p=0,08). Os autores concluem que: (1) DFM 17mm no dia da administraçåo do HCG correlaciona-se com altas taxas de ovulaçåo em protocolos de hiperestimulaçåo ovariana controlada que utilizam CC e/ou HMG; (2) uma vez que nåo há diferença significativa nas taxas de gestaçåo entre os dois grupos e que o número de ampolas de HMG utilizadas em protocolo CC/HMG é menor, esta associaçåo represaenta uma opçåo atraente como primeira escolha em ciclos de hiperestimulaçåo ovariana controlada, independenetmente do diagnóstico da infertilidade; (3) o atraso na administraçåo do HCG pode ser necessário naqueles pacientes que recebem CC/HMG com a finalidade de aumentar o número de folículos com DFM 17mm e, talvez, as taxas de gestaçåo deste grupo

Desencadeamento do mecanismo ovulatório através do uso de um análogo do fator de liberaçäo de gonadotrofinas / Ovulation triggering by a gonadotropin-releasing hormone analogue

O estudo dos efeitos neuroendócrinos dos anlálogos do fator de liberaçäo de gonadotrofinas (GnRH-a) revelou que a sua administraçäo seria capaz de induzir inicialmente a um aumento do número de receptores GnRH e à liberaçäo de FSH e LH hipofis rios, e posteriormente a uma inibiçäo e dessensibilizaçäo destes receptores (ausência de liberaçäo das gonadotrofinas). Baseando-se nestes efeitos, o presente estudo analisou o papel de um GnRH-a (acetato de leuprolide) no desencadeamento do pico endógeno de LH/FSH e da ovulaçäo em 11 ciclos de 10 pacientes portadoras de infertilidade primária e disfunçäo ovulatória, que näo responderam previamente à administraçäo de gonadotrofina coriônica humana (HCG). A idade das enfermas variou de 24 a 38 anos (média: 29,9 anos) e a duraçäo média da infertilidade foi de 28,8 meses (variando entre seis e 96 meses). O índice de massa corpórea variou de 19 a 24,6 (média: 21,4), näo revelando diferença (p = 0,62) entre as enfermas. A induçäo da ovulaçäo foi realizada utilizando-se gonadotrofina de mulher menopausada (HMG), iniciada no terceiro dia do ciclo menstrual com uma dose fixa diária de 150 UI, durante cinco dias, e entäo individualizada de acordo com a resposta da paciente, até que pelo menos um folículo atingisse 18 mm de diâmetro médio. Neste momento, 1 mg de acetato de leuprolide, dividido em duas doses, foi administrado por via subcutânea. Todas as enfermas foram orientadas para manter atividade sexual 36 e 60 horas após a administraçäo da primeira dose do GnRH-a. O suporte hormonal da fase lútea näo foi realizado. A ovulaçäo foi detectada em nove (81,8 por cento) dos 11 ciclos. A duraçäo da fase folicular no grupo ovulatório (n = 9) foi de 11,9 + 1,41 dias (média + desvio-padräo), näo se observando diferença (p = 0,68) entre os ciclos. Vinte folículos dominantes (média: 2,2 folíulos dominantes/ciclo) foram identificados no dia da administraçäo do GnHR-a e 19 (95 por cento) dos 20 folículos pré-ovulatórios mostraram sinais inequívocos de ovulaçäo . A duraçäo média da fase lútea no grupo ovulatório foi de 11,5 + 2,79 dias (variando de sete a 16 dias) e um quadro de insuficiência da fase lútea (duraçäo < 11 dias) foi verificado em cinco (55,5 por cento) ciclos. A síndrome de hiperestimulaçäo ovariana de grau moderado foi observada em dois (22,2 por cento) dos nove ciclos ovulatórios. Nenhum caso de gestaçäo ocorreu neste estudo. Os autores concluem que o GnHR-a pode induzir a ovulaçäo de maneira adequada em um grupo...

Aspiraçäo transvaginal de endometrioma ovariano e fertilizaçäo in vitro: relato de caso / Transvaginal aspiration of an ovarian endometrioma and in vitro fertilization: case report

A presença de cistos ovarianos näo-funcionais em ciclos de fertilizaçäo in vitro e a transferência de embriöes (FIVETE) têm um impacto negativo em suas taxas de sucesso. Os autores relatam a evoluçäo e o resultado de um ciclo de FIVETE, durante o qual a paciente foi submetida a aspiraçäo transvaginal de um endometrioma ovariano sob controle ultrasonográfico transvaginal, sugerindo esta técnica como forma alternativa de tratamento de cistos ovarianos näo-funcionais em casos selecionados.

Previsäo do dia da ovulaçäo através da análise de regressäo linear dos parâmetros ultra-sonográficos do desenvolvimento folicular / Ovulation prediction through linear regression analysis of sonographic parameters of follicular development

A análise de regressäo linear dos parâmetros ultra-sonogr ficos do desenvolvimento folicular foi realizada com a finalidade de prever o dia da ovulaçäo, em 10 pacientes normais, submetidas à induçäo da ovulaçäo com citrato de clomifeno. O crescimento do diâmetro folicular médio do folículo dominante mostrou uma forte relaçäo linear (r2 = 0,98) em funçäo do tempo, até o momento da ovulaçäo. A taxa de crescimento folicular (C) e o dia provável do início do desenvolvimento folicular (Di) foram obtidos a partir da equaçäo de regressäo linear de cada paciente. O período total de crescimento do folículo (PTC) foi calculado através do valores de Di e C, uma vez que estes parâmetros apresentaram uma corelaçäo estatisticamente significativa (p < 0,001; r2 = 0,92). O dia menstrual da ovulaçäo (DMov) foi calculado através da fórmula DMov = (6,26 x C) + (0,33 x PTC) + 10,221, fornecendo um desvio padräo de 0,87 dia. Os DMov médios observados e previstos foram 15,46 +/- 0,93 e 15,45 +/- 0,53, respectivamente, apresentando correlaçäo linear estatisticamente significativa (p < 0,04; r2 = 0,32). A previsäo da ovulaçäo com uma variaçäo de +/- 20,9 horas (0,87 dia) tem aplicaçäo clínica imediata em procedimentos que necessitem da determinaçäo precisa do dia ovulatório, tais como inseminaçäo artificial e fertilizaçäo in vitro/transferência de embriöes.