Isolation and characterization of mesenchymal stem cells from the yolk sacs of bovine embryos.

The yolk sac (YS) represents a promising source of stem cells for research because of the hematopoietic and mesenchymal cell niches that are present in this structure during the development of the embryo. In this study, we report on the isolation and characterization of YS tissue and mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bovine YSs. Our results show that the YS is macroscopically located in the exocoelomic cavity in the ventral portion of the embryo and consists of a transparent membrane formed by a central sac-like portion and two ventrally elongated projections. Immunohistochemistry analyses were positive for OCT4, CD90, CD105, and CD44 markers in the YS of both gestational age groups. The MSCs of bovine YS were isolated using enzymatic digestion and were grown in vitro for at least 11 passages to verify their capacity to proliferate. These cells were also subjected to immunophenotypic characterization that revealed the presence of CD90, CD105, and CD79 and the absence of CD45, CD44, and CD79, which are positive and negative markers of MSCs, respectively. To prove their multipotency, the cells were induced to differentiate into three cell types, chondrocytes, osteoblasts, and adipocytes, which were stained with tissue-specific dyes (chondrogenic: Alcian Blue, osteogenic: Alizarin Red, and adipogenic: Oil Red O) to confirm differentiation. Gene expression analyses showed no differences in the patterns of gene expression between the groups or passages tested, with the exception of the expression of SOX2, which was slightly different in the G1P3 group compared to the other groups. Our results suggest that YS tissue from bovines can be used as a source of MSCs, which makes YS tissue-derived cells an interesting option for cell therapy and regenerative medicine.

CONTRIBUTION AND PERSPECTIVES OF THE IMPACT OF PROTEOMICS IN STUDY OF PLACENTAS AND EMBRYONIC AND FETAL MEMBRANES / Contribuição e perspectivas do impacto da proteômica em estudo de placentas e membranas embrionárias e fetais.

Abordagens proteômicas revolucionaram a análise de amostras biológicas por permitir a identificação de padrões ainda não caracterizados de expressão de proteínas e/ou suas interações e modificações pós-traducionais em diferentes tecidos, como a placenta ou em embriões e fetos em diferentes estágios de desenvolvimento. Esta nova fronteira de conhecimento se constitui atualmente numa ferramenta fundamental para a elucidação de problemas biológicos, por fornecer informações que não podem ser obtidas por métodos mais focalizados, ou com alvos específicos. Essa revisão salienta as novas perspectivas geradas pela contribuição da proteômica baseada na eletroforese bidimensional (2D-PAGE) associada à espectrometria de massas (MS) para o estudo da placenta, das membranas embrionárias e do embrião, com ênfase nas comparações entre condições normais e aqueles provenientes de estados patológicos ou conseqüentes ao uso de biotecnologias reprodutivas. Summary  

Contribution and perspectives of the impact of proteomics in study of placentas and embryonic and fetal membranes / Contribuição e perspectivas do impacto da proteômica em estudo de placentas e membranas embrionárias e fetais

Proteomic approaches have revolutionized the analysis of biological samples by allowing the identification of non-characterized protein expression and its role on protein interactions and post-translational modifications during embryonic development or as a consequence of pathological states. This new frontier of knowledge is, nowadays, an essential contribution to the elucidation of biological problems, by providing information that cannot be obtained by other target driven methods. This review highlights the new perspectives of proteomics studies based on bidimensional eletrophoresis (2D-PAGE) associated to mass spectrometry (MS) analytical methods of placenta, embryonic membranes and embryo evaluation, with emphasis on comparisons between normal and diseased tissues consequence of reproductive biotechnology manipulation.

Abordagens proteômicas revolucionaram a análise de amostras biológicas por permitir a identificação de padrões ainda não caracterizados de expressão de proteínas e/ou suas interações e modificações pós-traducionais em diferentes tecidos, como a placenta ou em embriões e fetos em diferentes estágios de desenvolvimento. Esta nova fronteira de conhecimento se constitui atualmente numa ferramenta fundamental para a elucidação de problemas biológicos, por fornecer informações que não podem ser obtidas por métodos mais focalizados, ou com alvos específicos. Essa revisão salienta as novas perspectivas geradas pela contribuição da proteômica baseada na eletroforese bidimensional (2D-PAGE) associada à espectrometria de massas (MS) para o estudo da placenta, das membranas embrionárias e do embrião, com ênfase nas comparações entre condições normais e aqueles provenientes de estados patológicos ou conseqüentes ao uso de biotecnologias reprodutivas.