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J Virol ; 81(14): 7371-9, 2007 Jul.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-17494075

RESUMO

Direct functional screening of a cDNA expression library derived from primary porcine alveolar macrophages (PAM) revealed that CD163 is capable of conferring a porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)-permissive phenotype when introduced into nonpermissive cells. Transient-transfection experiments showed that full-length CD163 cDNAs from PAM, human U937 cells (histiocytic lymphoma), African green monkey kidney cells (MARC-145 and Vero), primary mouse peritoneal macrophages, and canine DH82 (histocytosis) cells encode functional virus receptors. In contrast, CD163 splice variants without the C-terminal transmembrane anchor domain do not provide PRRSV receptor function. We established several stable cell lines expressing CD163 cDNAs from pig, human, and monkey, using porcine kidney (PK 032495), feline kidney (NLFK), or baby hamster kidney (BHK-21) as the parental cell lines. These stable cell lines were susceptible to PRRSV infection and yielded high titers of progeny virus. Cell lines were phenotypically stable over 80 cell passages, and PRRSV could be serially passed at least 60 times, yielding in excess of 10(5) 50% tissue culture infective doses/ml.


Assuntos
Antígenos CD/imunologia , Antígenos de Diferenciação Mielomonocítica/imunologia , Suscetibilidade a Doenças/imunologia , Vírus da Síndrome Respiratória e Reprodutiva Suína/imunologia , Receptores de Superfície Celular/imunologia , Animais , Antígenos CD/genética , Antígenos de Diferenciação Mielomonocítica/genética , Sequência de Bases , Linhagem Celular , Clonagem Molecular , Primers do DNA , Genótipo , Humanos , Glicoproteínas de Membrana/genética , Síndrome Respiratória e Reprodutiva Suína/imunologia , Síndrome Respiratória e Reprodutiva Suína/prevenção & controle , Vírus da Síndrome Respiratória e Reprodutiva Suína/fisiologia , RNA Mensageiro/genética , Receptores de Superfície Celular/genética , Receptores Imunológicos/genética , Lectina 1 Semelhante a Ig de Ligação ao Ácido Siálico , Suínos , Transfecção , Replicação Viral
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