RESUMO
Pleurotus ostreatus ("shimeji") is produced in Brazil on a commercial scale using various lignocellulosic residues. Efforts have been made to reuse the culture residue to obtain products of greater aggregate value such as enzymes or in processes of bioremediation. We evaluated the Remazol brilliant blue R (RBBR) degradation potential of extracts from solid substrate colonized by P. ostreatus and extracts from residue of the "shimeji" mushroom yield. Colonized substrates and residue were provided by Toyobo do Brasil Ltda. Extraction was performed with sodium acetate buffer (50 mM, pH 4.6). RBBR decolorization was monitored at 592 nm and peroxidase and laccase activities were measured by monitoring the oxidation of ABTS. Horseradish peroxidase was used as reference. The time of growth of P. ostreatus influenced RBBR degradation and peroxidase and laccase activities. Concentration of 1 mM H2O2 and pH 4.0 were the best for RBBR decolorization. Complete RBBR decolorization was obtained with the addition of only one aliquot of 50 µL of 1 mM H2O2. The stability of the extracts was higher when they were kept under refrigeration than when stored frozen. The potential application of the ligninolytic complex derived from P. ostreatus and mushroom residue for xenobiotic degradation was demonstrated.
Pleurotus ostreatus ("shimeji") é produzido no Brasil em escala comercial empregando-se vários resíduos lignocelulósicos. Esforços têm sido feitos para reaproveitamento do resíduo do cultivo em produtos de maior valor agregado, como enzimas ou sua aplicação em processos de biorremediação. Foi feita avaliação do potencial de degradação do azul brilhante de remazol (RBBR) por extratos obtidos de substratos sólidos colonizados por P. ostreatus e por extratos do resíduo da produção do cogumelo "shimeji". Substratos colonizados e o resíduo foram fornecidos pela Toyobo do Brasil Ltda. Extração foi feita com tampão acetato de sódio (50 mM, pH 4,6). Descoloração do RBBR foi acompanhada a 592 nm e atividades de peroxidases e lacase pela oxidação do ABTS. Peroxidase da raiz forte (HRP) foi usada como referência. O tempo de crescimento de P. ostreatus influenciou a degradação do RBBR e a produção das atividades enzimáticas de peroxidases e de lacase. Concentração de 1 mM de H2O2 e pH 4,0 mostraram-se ótimos para descoloração do RBBR. Descoloração total do RBBR foi obtida com adição de apenas uma alíquota de 50 µL de H2O2 (1 mM). Maior estabilidade dos extratos foi obtida por refrigeração que por congelamento. Foi evidenciado o potencial de aplicação de extratos enzimáticos de Pleurotus ostreatus e do resíduo da produção do cogumelo para a degradação de compostos xenobióticos.
RESUMO
Fifty-five isolates of filamentous fungi were studied regarding their ability to decolorize Remazol brilliant blue R dye. The fungi were isolated from soil in the Baixada Santista region, which is contaminated with industrial residues containing a mixture of organochlorine compounds, mainly hexachlorobenzene. The fungi were grown in liquid malt extract medium with 0.02% of dye and shaken at 200 rpm for 14 days at 28 ± 2ºC. Two types of behavior regarding the dye were observed: adsorption and degradation. Eupenicillium baarnenseSsp1951 and Ssp1952 and Eupenicilliumcrustaceum SSP1953 presented high RBBR decolorization and were then analyzed regarding their ability to degrade 14C-hexachlobenzene (4138.31 mg HCB per kg soil) during a 56 days culture at 28 ± 2ºC. Eupenicillium crustaceum SSP1953 was able to reduce n-hexane soluble 14C-compounds (24.6%) and to form non-extractable 14C-residues (20.5%). The same behavior was also observed in the two E. baarnense strains (Ssp1951 and Ssp1952) but the percentages were lower than those obtained for Eupenicilliumcrustaceum. The main action of Eupenicillium spp on HCB is to transform it into non-extractable 14C-residues as confirmed by the gas chromatography results.
Cinqüenta e cinco isolados de fungos filamentosos foram avaliados quanto a capacidade de descolorir o corante remazol brilliant blue R. Estes fungos foram isolados de solos da Região da Baixada Santista contaminados com resíduos industriais contendo uma mistura de organoclorados, principalmente hexaclorobenzeno. O crescimento dos fungos foi realizado em meio líquido de extrato de malte contendo 0,02% do corante, sob agitação de 200 rpm, durante 14 dias a 28ºC ± 2. Foi possível verificar, entre os fungos avaliados, dois comportamentos em relação ao corante: adsorção e degradação. Eupenicillium baarnense SSp1951 e sSp1952 e Eupenicilliumcrustaceum SSP1953 apresentaram altas porcentagens de descoloração do RBBR. Estes fungos foram, então, avaliados quanto a sua capacidade de degradar 14C-hexaclorobenzeno (4138,31 mg de hexaclorobenzeno kg-1 de solo) durante 56 dias a 28ºC ± 2. Eupenicillium crustaceum SSP1953 foi capaz de reduzir em 24,6% os 14C-compostos solúveis em n-hexano e formar 20,5% de 14C-resíduos não extraíveis. As duas linhagens de E. baarnense (Ssp1951 e Ssp1952) também apresentaram o mesmo comportamento, porém com porcentagens inferiores à observada para Eupenicillium crustaceum. A principal ação de Eupenicillium spp sobre hexaclorobenzeno foi transformá-lo em 14C-resíduos não extraíveis, como comprovaram os resultados da cromatografia gasosa.