RESUMO
CaBo is a mannose/glucose-specific lectin purified from seeds of Canavalia bonariensis. In the present work, we report the CaBo crystal structure determined to atomic resolution in the presence of X-man, a specific ligand. Similar to the structural characteristics of other legume lectins, CaBo presented the jellyroll motif, a metal binding site occupied by calcium and manganese ions close to the carbohydrate-recognition domain (CRD). In vitro test of CaBo cytotoxicity against glioma cells demonstrated its ability to decrease the cellular viability and migration by induction of autophagy and cell death. Molecular docking simulations corroborate previous data indicating that the lectin's biological activities occur mostly through interactions with glycoproteins since the lectin interacted favorably with several N-glycans, especially those of the high-mannose type. Together, these results suggest that CaBo interacts with glycosylated cell targets and elicits a remarkable antiglioma activity.
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Antineoplásicos/química , Autofagia/efeitos dos fármacos , Canavalia/química , Metilmanosídeos/química , Neuroglia/efeitos dos fármacos , Lectinas de Plantas/química , Motivos de Aminoácidos , Animais , Antineoplásicos/isolamento & purificação , Antineoplásicos/farmacologia , Sítios de Ligação , Cálcio/química , Cálcio/metabolismo , Sequência de Carboidratos , Cátions Bivalentes , Linhagem Celular Tumoral , Movimento Celular/efeitos dos fármacos , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Cristalografia por Raios X , Manganês/química , Manganês/metabolismo , Metilmanosídeos/metabolismo , Simulação de Acoplamento Molecular , Neuroglia/patologia , Lectinas de Plantas/isolamento & purificação , Lectinas de Plantas/farmacologia , Ligação Proteica , Domínios e Motivos de Interação entre Proteínas , Multimerização Proteica , Estrutura Secundária de Proteína , Ratos , Especificidade por SubstratoRESUMO
Leishmaniasis is a vector-borne disease transmitted by phlebotomine sand fly. Susceptibility and refractoriness to Leishmania depend on the outcome of multiple interactions that take place within the sand fly gut. Promastigote attachment to sand fly midgut epithelium is essential to avoid being excreted together with the digested blood meal. Promastigote and gut sand fly surface glycans are important ligands in this attachment. The purpose of the present study was to evaluate the interaction of three lectins isolated from leguminous seeds (Diocleinae subtribe), D-glucose and D-mannose-binding, with glycans on Lutzomyia migonei midgut. To study this interaction the lectins were labeled with FITC and a fluorescence assay was performed. The results showed that only Dioclea violacea lectin (DVL) was able to interact with midgut glycans, unlike Cratylia floribunda lectin (CFL) and Canavalia gladiata lectin (CGL). Furthermore, when DVL was blocked with D-mannose the interaction was inhibited. Differences of spatial arrangement of residues and volume of carbohydrate recognition domain (CRD) may be the cause of the fine specificity of DVL for glycans in the surface on Lu. migonei midgut. The findings in this study showed the presence of glycans in the midgut with glucose/mannose residues in its composition and these residues may be important in interaction between Lu. migonei midgut and Leishmania.
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Canavalia , Dioclea , Absorção Gastrointestinal/fisiologia , Lectinas de Plantas/metabolismo , Psychodidae , Animais , Lectinas/isolamento & purificação , Lectinas/metabolismo , Lectinas de Plantas/isolamento & purificação , SementesRESUMO
BACKGROUND: The potential edematogenic effect and the pharmacological characterization of a glucose-mannose-binding lectin from Dioclea violacea (DvL) were investigated. METHODS: Paw edema was induced with DvL in control animals, and in animals pretreated with glucocorticoid or with blockers of histamine, nitric oxide synthase, cyclooxygenase, platelet activating factor (PAF), bradykinin and lipoxygenase. RESULTS: DvL-induced paw edema paralleled with an increase in vascular permeability and myeloperoxidase (MPO) activity. DvL-induced edema could be prevented by pre-treatment with the lectin-binding sugar α-D-methyl mannoside. Dexamethasone, meclizine and Nω-nitro-L-arginine methyl ester hydrochloride (L-NAME) inhibited this effect. CONCLUSIONS: DvL induces edema, increase in vascular permeability and neutrophil infiltration. The edematogenic activity involves the lectin mannose-binding sites and is associated with histamine, cytokines and nitric oxide, since it could be treated with meclizine, dexamethasone and L-NAME.
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Dioclea/química , Edema/induzido quimicamente , Lectina de Ligação a Manose/toxicidade , Infiltração de Neutrófilos/efeitos dos fármacos , Animais , Anti-Inflamatórios/farmacologia , Sítios de Ligação , Citocinas/metabolismo , Dexametasona/farmacologia , Modelos Animais de Doenças , Edema/prevenção & controle , Feminino , Histamina/metabolismo , Lectina de Ligação a Manose/isolamento & purificação , Meclizina/farmacologia , NG-Nitroarginina Metil Éster/farmacologia , Neutrófilos/metabolismo , Óxido Nítrico/metabolismo , Peroxidase/metabolismo , Ratos , Ratos WistarRESUMO
Lectins from Diocleinae subtribe belong to the family of legume lectins and are characterized by high identity between their amino acids sequences. It has been shown that punctual differences in amino acid sequences, such as one single amino acid or an alternative conformation, represent changes in biological activities caused by these lectins. Therefore, a more detailed understanding of three-dimensional structures of these proteins is essential for accurate analyzing the relationship between structure and function. In this study lectins purified from the seeds of Dioclea violacea (DVL) and Dioclea rostrata (DRL) were compared with regard to crystal structure and vasorelaxant properties. Differences in structure of lectins were found to be reflected in differences in vasorelaxant effects based on their high specificity and selectivity for cell glycans. Binding activity was related to the position of specific residues in the carbohydrate recognition domain (CRD). DVL complexed structure was solved by X-ray crystallography and was compared to native DVL and DRL. Therefore, DVL was co-crystallized with X-Man, and a molecular modeling with X-Man complexed with DVL was done to compare the complexed and native forms adjusted fit. The relatively narrow and deep CRD in DVL promotes little interaction with carbohydrates; in contrast, the wider and shallower CRD in DRL favors interaction. This seems to explain differences in the level of relaxation induced by DVL (43%) and DRL (96%) in rat aortic rings.
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Dioclea/química , Lectinas de Plantas/química , Lectinas de Plantas/farmacologia , Vasodilatadores/química , Vasodilatadores/farmacologia , Sequência de Aminoácidos , Animais , Aorta/efeitos dos fármacos , Aorta/fisiologia , Cristalografia por Raios X , Técnicas In Vitro , Masculino , Manose/química , Manose/metabolismo , Simulação de Acoplamento Molecular , Dados de Sequência Molecular , Lectinas de Plantas/metabolismo , Estrutura Quaternária de Proteína , Estrutura Terciária de Proteína , Ratos , Ratos Wistar , Especificidade da Espécie , Vasodilatadores/metabolismoRESUMO
Este trabalho apresenta uma revisão dos recentes avanços na análise e pesquisa farmacêutica empregando a técnica de eletrodo íon-seletivo. Eletrodos íon-seletivos constituem-se num dos mais importantes sensores potenciométricos usados não só em análise biomédica e inorgânica como também no campo farmacêutico. Análises farmacêuticas com eletrodos íon-setetivos são atrativas pela facilidade de manuseio, seletividade para o fármaco de interesse e baixo custo.
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Eletrodos Seletivos de Íons , Preparações Farmacêuticas , FarmacologiaRESUMO
Este trabalho apresenta uma revisão das diferentes técnicas analíticas utilizadas para a quantificação da furosemida em medicamentos, fluidos biológicos e estudos de estabilidade.
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Furosemida , Eletrodos Seletivos de Íons , Preparações Farmacêuticas , EspectrofotometriaRESUMO
O objetivo do trabalho foi desenvolver um método de doseamento de cumarina (1,2-benzopirano) em extrato fluido e tintura de guaco (Mikania glomerata Sprengel). O método desenvolvido foi por espectrofotometria derivada de primeira ordem, que se mostrou preciso, exato, reprodutível e de fácil execução
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Medicina Herbária , Mikania , Extratos Vegetais , Plantas Medicinais , Corantes , EspectrofotometriaRESUMO
Saccharin, a synthetic sweetener constituent of several pharmaceutical and cosmetic preparations, is analyzed qualitatively and quantitatively in the presence of interferences like active ingredients and excipients. A derivative ultraviolet spectrophotometric method employing the second and the fourth orders was used. The calibration data obtained were satisfactory, with a relative precision range of 0.53 por cento-0,72 por cento, and linearity between 0.9998-0.9999.The recovery test results for the toothgel sample ranged between 97.80 por cento and 104.95 por cento in the second order of derivative and between 98.04 por cento and 101.32 por cento in the fourth derivative...
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Cosméticos/farmacologia , Sacarina , Edulcorantes , Estudos de Avaliação como Assunto , Estudos de Avaliação como Assunto , Manejo de Espécimes , Espectrofotometria UltravioletaRESUMO
A estabilidade físico-química da coenzima Q10 (COQ10) é afetada pela açäo do calor e da luminosidade. Comprimidos revestidos nas apresentaçöes de 10 e 50 mg, foram submetidos às temperaturas de 35, 40 e 50ºC. Ficaram expostos em estufas calibradas, e as amostras foram retiradas para análise do teor de ubidecarenona nos tempos: 0, 15, 30, 60 e 90 dias. A quantificaçäo do fármaco foi realizada utilizando-se um sistema HPLC WATERS com bomba isocrática, detector UV, integrador com coluna Microbondapack C18. Pelos resultados obtidos a decomposiçäo térmica da Coenzima Q10, nas condiçöes estudadas, seguiu processo cinético de primeira ordem. Os comprimidos revestidos de COQ10 de 10 mg foram estáveis entre, 502, 410 e 224 dias, enquanto que os de 50 mg entre 586, 505 e 286 dias, sob diferentes temperaturas. Por extrapolaçäo gráfica, os comprimidos de coenzima Q10 de 10 e 50 mg à temperatura de 25ºC, apresentariam estabilidade entre 694 e 800 dias respectivamente.
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Coenzimas/farmacocinética , Comprimidos/farmacocinética , Estabilidade Enzimática , Estabilidade de MedicamentosRESUMO
No leite tipo "B", comercializado no Município de Säo Paulo, SP (Brasil), foi pesquisada a presença de aflatoxina M1. As amostras de leite analisadas foram provenientes das quatro marcas de maior consumo pela populaçäo, coletadas no período de julho a outubro de 1982. A aflatoxina M1, embora em baixos níveis e em pequena proporçäo (1,8%), fez-se presente nas quatro marcas
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Bovinos , Animais , Contaminação de Alimentos/análise , Aflatoxinas/análise , Leite/análise , Estações do Ano , Brasil , Estudos de Amostragem , Aflatoxinas/normas , Legislação de MedicamentosRESUMO
No leite tipo "B", comercializado no município de Säo Paulo, SP (Brasil), foram pesquisadas a presença de inibidores bacterianos (penicilina, água oxigenada, formol e cloro). As amostras de leite utilizadas foram provenientes das quatro marcas de maior consumo pela populaçäo, coletadas no período de 14 de julho de 1982 a 20 de março de 1983. Foi constatada alta prevalência de inibidores bacterianos (4,70%). A incidência de resíduos de penicilina e de inibidores näo identificados foi de 0,7% e de 3,40%, respectivamente. Houve uma baixa proporçäo de amostras com água oxigenada e formol e ausência de cloro
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Bovinos , Animais , Leite/análise , Aditivos Alimentares/análise , Conservação de Alimentos , Penicilinas/análise , Brasil , Cloro/análise , Formaldeído/análise , Peróxido de Hidrogênio/análiseRESUMO
No leite tipo "B" comercializado em Säo Paulo foram pesquisados a presença de aflatoxina Ml e de inibidores bacterianos (Penicilina, água oxigenada, formol e cloro). As amostras de leite utilizadas foram provenientes das quatro marcas de maior consumo pela populaçäo de Säo Paulo. O trabalho constituiu-se em um estudo longitudinal, com amostragem probabiolística, dividido em dois períodos iguais de 140 dias com 224 amostras analisadas. No primeiro período, de 14 de junho a 31 de outubro de 1982, foram pesquisados todos os contaminantes propostos. No segundo período, de 01 de novembro de 1982 a 30 de março de 1983, a aflatoxina näo foi pesquisada, pois, como sofre influência sazonal, há maior possibilidade de ser encontrada nos meses de temperaturas mais baixas. A aflatoxina, embora em baixos níveis e em pequena proporçäo (1,8%), fez-se presente nas quatro marcas. Foi constatada alta prevalência de inibidores bacterianos. No primeiro e no segundo período a porporçäo foi de 4,95% e 4,50% respectivamente. No primeiro período a incidência de resíduos de penicilina e de inibidores näo identificados foi de 0,9% e de 3,6% respectivamente. No segundo foi de 0,45% e de 3,15%. Houve baixa proporçäo de amostras com água oxigenada e formol, e ausência de cloro. De acordo com os resultados, concluiu-se que há necessidade de estabelecimento de limites de tolerância para a aflatoxina no leite, ausentes na nossa legislaçäo; e pela necessidade da atuaçäo da saúde pública através da inspeçäo, e através de amplos programas educativos junto aos produtores e industrias
