Determining hematological, biochemical and immunological reference values in healthy adults with high-risk for HIV acquisition in Mozambique

n many African countries, laboratory reference values are not established for the local healthy adult population. In Mozambique, reference values are known for young adults (18- 24yo) but not yet established for a wider age range. Our study aimed to establish hematological, biochemical and immunological reference values for vaccine trials in Mozambican healthy adults with high-risk for HIV acquisition.

Absolute and percent CD4+ T-cell enumeration by flow cytometry using capillary blood.

INTRODUCTION: CD4+ T-cell counting is usually performed on whole blood obtained from standard venipuncture. Venipuncture requires expertise, results in discomfort and generates biological waste. Capillary blood could be used to measure the levels of CD4+ T-cell in children, elderly and very ill patients. We studied the agreement between CD4+ T-cell counts and percent generated using venous blood with those obtained with capillary blood in HIV-infected adults and children in a resource-limited tropical setting. METHODS: This cross-sectional study consecutively enrolled a total of 152 adult and pediatric HIV-positive patients attending two outpatient clinics in Maputo City, Mozambique. We recruited individuals presenting for their routine clinical follow-up that included the determination of CD4+ T-cell counts in peripheral blood. For each subject, peripheral blood specimens were obtained by both venipuncture and finger prick. Specimens were tested using two flow cytometers, the FACSCount and the FACSCalibur. RESULTS: Absolute CD4+ T-cell counts obtained using capillary blood were in close agreement with those from venous blood both on the FACSCalibur (absolute bias=+12.3 cells/mm³, limits of agreement: -259.2 to +283.9, R²=0.96) and the FACSCount (absolute bias=+16.1 cells/mm³, limits of agreement: -209.2 to +241.5, R²=0.97). Percent CD4+ T-cell counts were measured only on the FACSCalibur also showed a good agreement with a bias of +0.6% and limits of agreement of -3.1 to +4.3. CONCLUSIONS: Absolute CD4+ T-cell counts and percent generated using capillary blood are in close agreement with those from venous blood. Point-Of-Care assays and standard flow cytometers can be deployed in a tiered laboratory network where both venous and capillary blood collection can be used for CD4+ T-cell enumeration.

Co-infecção pelos retrovírus HIV-1/HTV-1: impacto sobre o fenótipo de células T regulatórios / HIV-1 / HTV-1 retrovirus co-infection: impact on regulatory T cell phenotype

Células Treg sao elementos fundamentais na manutenção da homeostasia ao nível do sistema imunolodégico. Defeitos nestas células tém sido implicados no desenvolvimento de varias imunopatologias de origem autoimune ou infecciosa, incluindo aquelas que ocorrem ao nivel dos órgãos imunoprivilegiados, como o sistema nervoso central. Neste contexto sugere-se que os sintomas neurológicos observados em pacientes com mielopatia associada a infecção pelo virus linfotrépico das células T humano tipo "% (HTLV-7%), conhecida como HAM/TSP, est&o associados a uma disfunção em células Treg. O HTLV-% é um retrovirus que compartilha as mesmas rotas de transmissão com o virus de imunodeficiência humana tipo % (HIV-%4). Ha evidências de que indivíduos apresentado co-infecção HIV/HTLV estão mais susceptíveis a desenvolver doenças associadas a ambos virus. Para além de progredirem mais rapido para o SIDA, estes indivíduos estão mais predispostos para desenvolver complicações neurologicas, particularmente aquelas similares a HAM/TSP. O objectivo deste estudo foi fazer uma avaliação da frequência e fenotipo das células Treg, e sua correlação com a frequência de células activadas, em pacientes infectados pelo HIV com sintomatologia neurológica, possuindo (HIV/HTLV Neur) ou nao co-infecção pelo HTLV (HIV Neur). Nos observamos, em amostras de pacientes do grupo HIV/HTLV Neur, um aumento da frequência de células com fenotipo Treg. Estas células apresentavam tendência em expressar baixa densidade Foxp3 e elevada densidade da integrina VLA-4. Nestes pacientes, havia também uma correlação positiva entre a frequência de células Treg e a de células CD4"HLDR'. Conjuntamente, estes dados sugerem que células Treg em indivíduos HIV/HTLV Neur apresentam alguma disfunção, marcada por fraca expressão do factor de transcrição Foxp3 que regula o funcionamento destas células, e aumento dos níveis de expressão de moléculas nao frequentes em células Treg, como VLA-4. Tal disfunção pode estar relacionada, tanto a inabilidade em controlar a activado e proliferação de linfócitos efectores durante essas infecções, quanto a alterações nos mecanismos que norteiam o trafego de células Treg.