Transplantation of Human Amniotic Membrane over the Liver Surface Reduces Hepatic Fibrosis in a Cholestatic Model in Young Rats.

PURPOSE: Biliary atresia precedes liver cirrhosis and liver transplantation. Amniotic membrane (AM) promotes tissue regeneration, inhibits fibrosis, and reduces inflammation. Here, we test amniotic membrane potential as a therapeutic tool against cholestatic liver fibrosis. METHODS: Three groups of rats were used: sham surgery (SS), bile duct ligature (BDL), and bile duct ligature plus human amniotic membrane (BDL + AM). After surgery, animals were sacrificed at different weeks. Biochemical and histopathological analyses of liver tissue were performed. Collagen was expressed as a percentage of total liver tissue area. qPCR was performed to analyse gene expression levels of transforming growth factor-ß1 (Tgfb1) and apelin (Apln). Statistical analysis performed considered p < 0.05 was significant. RESULTS: Groups undergoing BDL developed cholestasis. Biochemical markers from BDL + AM group improved compared to BDL group. Ductular reaction, portal fibrosis, and bile plugs were markedly reduced in the BDL + AM group compared to BDL group. Collagen area in BDL + AM group was statistically decreased compared to BDL group. Finally, expression levels of both Apln and Tgfb1 mRNA were statistically downregulated in BDL + AM group versus BDL group. CONCLUSION: AM significantly reduces liver fibrosis in a surgical animal model of cholestasis. Our results suggest that AM may be useful as a therapeutic tool in liver cirrhosis.

White blood cell count and C-reactive protein together remain useful for diagnosis and staging of acute appendicitis in children.

BACKGROUND: Acute appendicitis (AA) is the most common acute surgical condition of the abdomen, and the most commonly misdiagnosed. OBJECTIVE: To analyse the white blood cell count (WBCC) and C-reactive protein (CRP) contribution to the diagnosis of AA in children. METHODS: This was a retrospective study of 943 consecutive patients operated on with the preoperative diagnosis of AA, in whom preoperative WBCC and CRP had both been measured. Postoperatively, the patients were divided into three groups: normal appendix (no AA), simple AA and complicated AA. RESULTS: Of the 943 patients, 616 (65.3%) had simple AA. The mean (standard deviation (SD)) age for this group was 9.8 (3.2) years (p<0.01 v. complicated AA), the mean WBCC was 16.5 (5.0) × 109/L (p<0.01 v. complicated AA and no AA), and the mean CRP level was 304.8 (409.5) nmol/L (p<0.01 v. complicated AA). The mean age of the patients with complicated AA (283/943, 30.0%) was 7.9 (3.7) years, the mean WBCC was 17.7 (6.2) × 109/L (p<0.01 v. no AA) and the mean CRP level was 1 076.2 (923.8) nmol/L (p<0.01 v. no AA). The mean age of the patients with no AA (44/943, 4.7%) was 8.8 (3.2) years, the mean WBCC was 13.1 (5.3) × 109/L and the mean CRP was 361.9 (447.6) nmol/L. The WBCC was normal in 113/899 patients with appendicitis (12.6%) and CRP in 139 (15.5%). Both the WBCC and CRP were normal in 17 patients with appendicitis (1.9%). The best receiver operating characteristic (ROC) curve was obtained for WBCC when comparing all AA with no AA: cut-off point 15.0 × 109/L, sensitivity 65%, specificity 68%, area under the curve 0.70. The best ROC curve for CRP was obtained when comparing simple AA with complicated AA: cut-off point 361.9 nmol/L, sensitivity 74%, specificity 74%, area under the curve 0.81. CONCLUSIONS: The WBCC is helpful in diagnosing simple AA and CRP in diagnosing complicated AA. If both are normal, AA is very unlikely. Together the WBCC and CRP are useful tools in diagnosing and staging AA.

Surgical acquired aganglionosis: myth or reality?

PURPOSE: A number of patients operated on for Hirschsprung disease continue to have constipation and abdominal distension for years after surgery. Some authors have proposed that ischemia during surgery may induce secondary aganglionosis. The aim of the present study was to study the effects of ischemia on the enteric nervous system of sigmoid colon in an animal model. METHODS: A surgical model of colonic ischemia was created. 34 adult Sprague-Dawley rats underwent a laparotomy where the marginal arterioles of the sigmoid colon were ligated. After that, a section in the middle segment of the sigmoid colon was performed followed by an anastomosis. The presence of ischemia was assessed by measurement of visible light spectroscopy tissue oximetry and histological examination. Colonic function was assessed by evaluation of stool weight. Rats were killed at 1, 8 and 12 weeks after the operation. 12 rats were sham-operated. Enteric nervous system was evaluated by means of immunohistochemistry with NGFR p75. Quantitative analysis of the number of ganglia and ganglion cells in the myenteric plexus was performed. RESULTS: The surgical model of colonic ischemia significantly decreased tissue oxygenation (pre-surgical = 54.69 ± 7.32 %; post-surgical = 27.37 ± 9.2 %; p < 0.001). There was no disturbance in body-weight gaining in experimental groups and daily stool output did not vary after surgery (pre-surgical = 4.24 ± 0.94 g; post-surgical = 3.82 ± 1 g; p = 0.09). All experimental groups showed persistent ganglia. However, there was a significant decrease in the number of ganglia in all the experimental groups compared to control (1w: 45.91 ± 7.66; 8w: 44.17 ± 10.56; 12w: 36.17 ± 15.06 vs control: 56.88 ± 8.66; p < 0.01). The number of total ganglion cells was significantly reduced only in the experimental group killed at week 12 compared to control (1w: 539 ± 167.58; 8w: 488.58 ± 154.41; 12w: 343.94 ± 161.91 vs control: 513.96 ± 126.97; p < 0.01). The rate of ganglion cells per ganglia was significantly higher in the groups killed at week 1 and 8 versus control group (1w: 11.63 ± 2.53; 8w: 11.11 ± 2.56; 12w: 9.34 ± 1.16 vs control: 9.02 ± 1.81; p < 0.05). CONCLUSION: Long-term follow-up after surgically induced colonic ischemia in the rat showed a decreased number of ganglion cells and ganglia. Nevertheless, it did not produce aganglionosis.

Efectos de la anastomosis esofágica a tensión: Estudio experimental de las causas de reflujo en la atresia de esófago / Esophageal anastomosis under tensio: experimental study about the causes for GER in repaired esophageal atresia

El reflujo gastroesofágico se diagnostica con frecuencia después de la reparación de una atresia de esófafo.El objetivo de este estudio es demostrar que uno o más componentes de la barrera esofagogástrica se alteran como consecuencia de una anastomosis esofáfica a tensión.La presión del esfínter esofágico inferior(PEEI)la presión de los pilares del diafragma(PPD)la longitud del esófago intraabdominal(LEIA) se midieron mediante una nanometría esofágica de retirada en 20 ratas antes y después de una resección esofágica de 15 mm y en 8 ratas antes y después anastomosisesofágica sin tensión(grupo control).La PEEI disminuyó de 44,9ñ 17,4 a 30,9ñ 12,3 mnHg y la LEIA de 17,9ñ2,9 a 15,8ñ 2,4 mn(p<0,05)en el grupo experimental,mientras que en el grupo control no hubo cambios significativos.La PPD no varió en ninguno de los dos grupos.En este modelo,la anastomosis esofágica a tensión disminuyó significativamente la presión del esfínter esofágico inferior y la longitud del esófago intraabdominal,pero no cambió las presiones del diafragma crural.El reflujo posoperatorio encontrado en pacientes operados de atresia de esófago se podría deber en parte a este mecanismo

Efectos de la anastomosis esofágica a tensión: Estudio experimental de las causas de reflujo en la atresia de esófago / Esophageal anastomosis under tensio: experimental study about the causes for GER in repaired esophageal atresia

El reflujo gastroesofágico se diagnostica con frecuencia después de la reparación de una atresia de esófafo.El objetivo de este estudio es demostrar que uno o más componentes de la barrera esofagogástrica se alteran como consecuencia de una anastomosis esofáfica a tensión.La presión del esfínter esofágico inferior(PEEI)la presión de los pilares del diafragma(PPD)la longitud del esófago intraabdominal(LEIA) se midieron mediante una nanometría esofágica de retirada en 20 ratas antes y después de una resección esofágica de 15 mm y en 8 ratas antes y después anastomosisesofágica sin tensión(grupo control).La PEEI disminuyó de 44,9ñ 17,4 a 30,9ñ 12,3 mnHg y la LEIA de 17,9ñ2,9 a 15,8ñ 2,4 mn(p<0,05)en el grupo experimental,mientras que en el grupo control no hubo cambios significativos.La PPD no varió en ninguno de los dos grupos.En este modelo,la anastomosis esofágica a tensión disminuyó significativamente la presión del esfínter esofágico inferior y la longitud del esófago intraabdominal,pero no cambió las presiones del diafragma crural.El reflujo posoperatorio encontrado en pacientes operados de atresia de esófago se podría deber en parte a este mecanismo

Malformaciones esqueléticas en la atresia de esófago: estudio clínico y esperimental / Squeletal malformations in esophageal atresia: clinical and experimental study

Las asociaciones malformativas nos dan la clave para comprender la embriogénesis de sus componentes.El objetivo de nuestro trabajo es comparar las malformaciones esqueléticas(ME)de un modelo teratogénico de atresia de esófago(AE) en fetos de ratas con ME de la AE clínica y esbozar un posible mecanismo patogénico común.Para ello revisamos las historias y radiografías de 443 niños con AE tratados entre los años 1965 y 1996.Se indujo la aparición de AE en las camadas de 16 ratas mediante la inyección de adriamicina en los días 8 y 9 de la gestación.A los embriones recuperados se les tiño el esqueleto de azul alcián y rojo alizarina para evidenciar la presencia de anomalías.De los 443 pacientes estudiados,239(53,9 por ciento)tenían una o más malformaciones esqueléticas asociadas,siendo las más frecuentes:hipersegmentación vertebral(n=102)hipoplasia sacra(n=42)vértebras malformadas principalmente torácicas(n=47) e hipoplasia radial y del pulgar(n=57).De 52 embriones de rata con atresia de esófago todos ellos tenían alguna anomalía esquelética,siendo frecuentes las vértebras torácicas malformadas(n=52) y la hipoplasia sacra(n=27).La asociación de malformaciones esofágicas,vertebrales y de los miembros en el mismo individuo,sugiere que estas anomalías se deben a un mecanismo patogénico común tanto en la rata,como en el humano,capaces de alterar tanto la segmentación como la organización del mesodermo paraxial durante la organogénesis.La naturaleza de las malformaciones encontradas sugiere que los genes Hox podrían estar involucrados en la etiología de la AE

Malformaciones esqueléticas en la atresia de esófago: estudio clínico y esperimental / Squeletal malformations in esophageal atresia: clinical and experimental study

Las asociaciones malformativas nos dan la clave para comprender la embriogénesis de sus componentes.El objetivo de nuestro trabajo es comparar las malformaciones esqueléticas(ME)de un modelo teratogénico de atresia de esófago(AE) en fetos de ratas con ME de la AE clínica y esbozar un posible mecanismo patogénico común.Para ello revisamos las historias y radiografías de 443 niños con AE tratados entre los años 1965 y 1996.Se indujo la aparición de AE en las camadas de 16 ratas mediante la inyección de adriamicina en los días 8 y 9 de la gestación.A los embriones recuperados se les tiño el esqueleto de azul alcián y rojo alizarina para evidenciar la presencia de anomalías.De los 443 pacientes estudiados,239(53,9 por ciento)tenían una o más malformaciones esqueléticas asociadas,siendo las más frecuentes:hipersegmentación vertebral(n=102)hipoplasia sacra(n=42)vértebras malformadas principalmente torácicas(n=47) e hipoplasia radial y del pulgar(n=57).De 52 embriones de rata con atresia de esófago todos ellos tenían alguna anomalía esquelética,siendo frecuentes las vértebras torácicas malformadas(n=52) y la hipoplasia sacra(n=27).La asociación de malformaciones esofágicas,vertebrales y de los miembros en el mismo individuo,sugiere que estas anomalías se deben a un mecanismo patogénico común tanto en la rata,como en el humano,capaces de alterar tanto la segmentación como la organización del mesodermo paraxial durante la organogénesis.La naturaleza de las malformaciones encontradas sugiere que los genes Hox podrían estar involucrados en la etiología de la AE