Melatonin decreases brain apoptosis, oxidative stress, and CD200 expression and increased survival rate in mice infected by Venezuelan equine encephalitis virus.

BACKGROUND: Pro-inflammatory and oxidative events during brain Venezuelan equine encephalitis virus infection could lead to apoptosis and induce anti-inflammatory responses (increased expression of CD200). The aim of this study was to determine the effect of melatonin on brain apoptosis, oxidative stress, and CD200 molecule in mice and neuroblastoma cultures infected by Venezuelan equine encephalitis virus. METHODS: Mice were infected with 10 median lethal doses (LD50) of Venezuelan equine encephalitis virus, treated with melatonin (500 µg/kg bw; three days before infection and during all experimental time) and sacrificed on days 1, 3, and 5 postinfection. Brain samples were obtained at those periods of time. In addition, infected neuroblastoma cell cultures (multiplicity of infection [MOI]: 1) were treated with 0, 0.1, 0.5, and 1 mM of melatonin and analyzed at 2, 4, and 6 h. CD200 and apoptosis expressions were analyzed by immunohistochemistry and TUNEL assay, respectively. Nitrites and malondialdehyde were determined by appropriate biochemical methods. RESULTS: Increased brain expression of apoptosis, nitrite, and malondialdehyde productions and CD200 of infected mice were found. Melatonin diminished those expressions. Similarly, high apoptosis expression and nitrite and malondialdehyde productions on infected neuroblastoma cultures were diminished by melatonin. Melatonin increased the survival rate (25%) in Venezuelan equine encephalitis virus-infected animals compared with untreated infected mice (0%). CONCLUSIONS: Neurological damage during brain Venezuelan equine encephalitis virus infection could be mediated by apoptosis and oxidative stress and CD200 molecule could be an important anti-inflammatory response. Melatonin could be beneficial reducing apoptosis and oxidative stress.

Increased expression of cytokines, soluble cytokine receptors, soluble apoptosis ligand and apoptosis in dengue.

Several studies have been performed to determine biomarkers that define the risk factors to developing severe forms of dengue. In this study, the levels of TNF-α, IL-6, IL-1, IL-17, soluble interleukin-1 receptor like 1 protein (sST2), soluble TNF-related apoptosis-inducing ligand (sTRAIL), IL-12 and soluble receptors for TNF (sTNF-RI and sTNF-RII) were determined by ELISA in dengue patients and monocyte/macrophage cultures. Dengue was classified as dengue without warning symptoms (DNWS), with warning symptoms (DWWS) and severe dengue (SD). High values of IL-6, sTNFRI, sTNFRII and sST2 were observed in DWWS and/or SD and IL-12 and sTRAIL in DNWS. TNF-α and IL-17 were increased not associated to the disease severity. High production of TNF-α, IL-1ß, IL-12, IL-17, sST2 and sTRAIL and apoptosis expression were observed in dengue monocyte/macrophage cultures. This study shows that beneficial or deleterious biomarkers can be present in dengue regardless the disease severity and that monocytes may be in part the source of studied molecules.

HLA class I association with progression to end-stage renal disease in patients from Zulia, Venezuela

The aim of this study was to determine HLA associations with progression to end-stagerenal disease (ESRD) in the mixed Zulian population in Venezuela, regardless of other factors. A retrospective study to determine HLA Class I association was performed on188 patients with ESRD due to different types of glomerulonephritis, and 202 healthy controls. Patients and control groups were serologically typed by Terasaki microlymphocytotoxicity technique using commercial Class I plates including 26 HLA-A and 48 HLA-Bspecificities. The antigens positively associated to the ESRD were: HLA-B38, B51, B53 and B62.Negatively associated antigens were: HLA-A9, B12, B17, B40 and B48. The haplotypes positively associated were: HLA-A2-B51, A2-B53, A23-B38 and A68-B38. The negatively associated haplotypes were: HLA-A2-B12, A2-B48, A9-B35 and A28-B40. The high Odds ratio observed and its statistical corroboration reflect the strength of the described association between HLA antigens and ESRD. Further molecular studies should clarify types and subtypes of the HLA class I alleles involved in the progression to ESRD (AU)

El objetivo principal de este trabajo fue determinar las posibles asociaciones de los antígenos HLA con la progresión a enfermedad renal terminal (ESRD por las siglas en inglés), independientemente de otros factores, en la población Zuliana de Venezuela. Se trata de un estudio retrospectivo, analizando los resultados obtenidos de la tipificación de los antígenos HLA clase I (A y B) en 188 pacientes con enfermedad renal crónica en etapa terminal y con indicación de trasplante renal, en comparación con 202 controles sanos de la misma población. Los antígenos HLA fueron tipificados por la técnica de microlinfocitotoxicidad de Terasaki, utilizando placas comerciales para clase I incluyendo 26 especificidades HLAA y 48 HLA-B. Los antígenos HLA clase I asociados a ESRD fueron: HLA-B38, B51, B53,B62; y los asociados negativamente resultaron HLA-A9, B12, B17, B40, B48. Los haplotipos asociados positivamente fueron: HLA-A2-B51, A2-B53, A23-B38 y A68-B38. Los haplotipos asociados negativamente resultaron: HLA-A2-B12, A2-B48, A9-B35, A28-B40. Los altosriesgos relativos observados y su corroboración estadística reflejan la fortaleza de las asociaciones descritas. Estos resultados podrían orientar los estudios moleculares que permitirán determinar y confirmar de manera más específica cuáles son los alelos HLA clase I asociados con esta patología (AU)

Importancia de las pruebas específicas e inespecíficas para el diagnóstico de sífilis en donantes de sangre / Importance of specific and unspecific tests to diagnosis syphilis in blood donors

Con la finalidad de mejorar el diagnóstico de laboratorio de sífilis como enfermedad infecto contagiosa en donantes de sangre, se realizó el presente estudio cuyo objetivo es determinar las pruebas serológicas específicas: Inmunoanálisis Enzimático (ELISA), Inmunocromatografía (IC) e inespecíficas: Laboratorio de investigación de enfermedades venéreas (VDRL) y Reaginas séricas no calentadas (USR) más confiable para el descarte de sífilis en donantes de sangre del Hospital Dr. Adolfo Pons de Maracaibo, estado Zulia. Se analizaron 481 sueros de donantes de sangre aparentemente sanos, de ambos sexos en edades comprendidas entre 18 y 60 años. Del total de muestras analizadas por ELISA 10 resultaron positivas (2,07 por ciento) y 8 (1,66 por ciento) por IC. El VDRL captó 4 (0,82 por ciento) sueros con reactividad y USR sólo 2 sueros (0,41 por ciento). Se concluye que la prueba de ELISA conjuntamente con el VDRL son las herramientas más seguras y fidedignos para el descarte de sífilis en donantes de sangre, dado que proporcionan en paralelo resultados confiables, fidedigno que garantice la calidad de la misma al ser transfundida

In order to improve the laboratory diagnosis of syphilis as an infectious and contagious disease in blood donors, we performed this study to determine the reliability of the specific: Enzyme Immunoassay (Elisa) and Immune-chromatography (IC) tests, the unspecific: Venereal Disease Research Laboratory (VDRL) test and the Unheated serum regain (USR) Serologic tests to rule out syphilis from blood donors of the Dr Adolfo Pons Hospital in Maracaibo, Zulia state. We analyzed 481 sera from apparently healthy blood donors, male and female, 18 to 60 years of ages. From the samples analyzed by Elisa 10 were positive (2.07 percent) and 8 (1.66 percent) by IC. VDRL detected 4 (0.82 percent) reactive sera and USR just 2 (0.421 percent). We concluded that Elisa with VDRL are the safest and more reliable tests to rule out syphilis from blood donors, since they gave in parallel reliable results to assure the quality of blood to be transfused

Capacidad larvívora del gold fish (Carassius auratus auratus) y del guppy salvaje (Poecilia reticulata) sobre larvas de Aedes aegypti en condiciones de laboratorio / Larvivorous capacity of the gold fish (Carassius auratus auratus) and the wild guppy (Poecilia reticulata) on larvaes of Aedes aegypti in laboratory conditions

El control biológico de vectores de importancia médica se presenta como una alternativa al uso de plaguisidas. La utilización de peces larvívoros se promueve como una nueva estratégia para el control de vectores. El propósito de este estudio es evaluar el potencial de dos especies ícticas para el control biológico de mosquitos Aedes aegypti (principal vector de dengue) en condiciones de laboratorio. Un creciente número de larvas de A. aegyptis en estadíos I, II y III (n: 25, 50, y 100) fueron colocados en acuarios con goldfish (Carassius auratus) y guppys salvajes (Poecilia reticulata). Se cuantificó la relación peso corporal/larvas ingeridas/hora en diez ensayos. La especie Poecilia reticulata reflejó una mayor (P<0,001) capacidad larvívora que C. auratus, dado que cuando se administraron 25, 50 y 100 larvas, los Poecilia reticulata obtuvieron valores promedio de eliminación de 3,15 ± 0,12; 5,50 ± 0,31 y 10,95 ± 0,25, respectivamente, frente a 1,21 ± 0,03; 2,45 ± 0,02 y 4,73 ± 0,06 de los C. auratus. Los resultados obtenidos son indicativos de que bajo las condiciones ensayadas, ambas especies de peces poseen alta capacidad de eliminación de larvas de mosquito A. aegypti; sin embargo, consederando su capacidad larvívora, disponibilidad, costo, características reproductivas y resistencia a las condiciones climáticas, la especie Poecilia reticulata ofrece ventajas importantes ante C. auratus auratus cuando ambos se evalúan integralmente como controladores poblacionales de mosquitos vectores.

Comparación entre los métodos de inmunocromatografía e inmunoensayo enzimático (ELISA) en el diagnóstico del dengue / Comparison between immunochromatographic and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) in the dengue diagnosis

La búsqueda de técnicas para la confirmación diagnóstica de Dengue y su reciente comercialización requieren su estudio en cuanto a sensibilidad, especificidad, reproducibilidad, rapidez y costo. Con el objetivo de comparar dos técnicas serológicas para el diagnóstico de esta infección, se analizaron 184 sueros provenientes de pacientes con diagnóstico confirmatorio de Dengue y 60 de Rubéola para la evaluación de la especificidad. Fueron procesados por el método de Inmunocromatografía (IC) e Inmunoensayo Enzimático (ELISA) para la determinación de anticuerpos IgM e IgG antidengue. Para IC y ELISA se obtuvo un 0,70 y 0,79 respectivamente, de sensibilidad nosológica en la determinación de anticuerpos IgM; en la determinación de IgG la sensibilidad del ELISA resultó significativamente incrementada (p<0,0001) con respecto a IC (0,92 vs. 0,65). Ambas técnicas alcanzaron un 98 por ciento de reproducibilidad y 100 por ciento de especificidad. Estos resultados sugieren que el ELISA es óptima para la detección de infecciones primarias y secundarias, mientras que IC demostró ser más rápida y aplicable en caso de brotes y/o epidemias, sin embargo es menos sensible en el diagnóstico de infecciones secuendarias por virus dengue y consecuentemente menos adecuada para el seguimiento y detección de casos de fiebre hemorrágica por dengue/síndrome de choque (FHD/SCD) en áreas endémicas

Asociación HLA clase I y leucemia en pacientes mestizos del estado Zulia, Venezuela

Resumen. La asociación entre los Alelos Leucocitarios Humanos (HLA) clase I (A, B, C) y las Leucemias Linfoides Agudas y Mieloides, se determinó mediante la técnica de Reacción en cadena de la polimerasa con iniciadores de secuencia específica (PCR-SSP) en un grupo de 60 pacientes y 30 controles sanos. Los valores obtenidos se expresaron como frecuencias alélicas y haplotipicas. Se utilizaron como métodos estadísticos la prueba de Chi-cuadrado corregida, test de Fisher, riesgo relativo y la fracción etiológica. Se observó una asociación positiva significativa de los alelos HLA-B*39 (RR = 16,184, p = 0,0237) y HLA C*03 (RR =5,0; p = 0,0127) con las Leucemias Mieloides (aguda y crónica). Así mismo se encontraron asociaciones positivas de los haplotipos de 2 loci: HLA-A*02-C*03 (RR = 6,0; p = 0,0153), A*24-C*03 (RR = 16,184; p = 0,0237), B*40-C*03 (RR = 10,706; p = 0,0021) y un haplotipo de 3 loci: HLA-A*02-B*40-C*03 (RR = 8,11; p = 0,0102) con las Leucemias Mieloides. No se evidenció ningún tipo de asociación con la Leucemia Linfoide Aguda. No se observaron asociaciones negativas con ningún tipo de Leucemia.

Abstract. The Human Leukocyte Allele (HLA) Class I (A, B, C) and Acute Lymphoid Leukemia and Myeloid Leukemia association, was determined by polymerase chain reaction - sequence specific primers (PCR-SSP) in 60 patients and 30 healthy controls. The results were reported as allelic frequencies and haplotype. The Chi-square corrected, Fisher’s Test, Relative risk and etiologic fraction were calculated. A significant positive association was showed between HLA-B*39 (RR = 16.184; p = 0.0237) and HLA C*03 (RR =5.0; p = 0.0127) alleles and Myeloid Leukaemia. Positive associations between haplotypes 2 loci: HLA-A*02-C*03 (RR = 6.0; p = 0.0153), A*24-C*03 (RR = 16.184; p = 0.0237), B*40-C*03 (RR = 10.706; p = 0.0021) and haplotype 3 loci: HLA-A*02-B*40-C*03 (RR = 8.11; p = 0.0102) and Myeloid Leukemia were found. No association was evident in Acute Lymphoid Leukemia. No negative association with Leukemias were observed.

HLA-B27 subtypes determination in patients with ankylosing spondylitis from Zulia, Venezuela.

To perform an investigation regarding the distribution of the human leukocyte antigen (HLA)-B27 subtypes in the Zulian population with ankylosing spondylitis (AS), 48 unrelated Mestizos, HLA-B27 positive by serology, were studied using the polymerase chain reaction-specific sequence oligonucleotides probe (PCR-SSOP) and specific sequence primers (SSP) to analyze the polymorphism in exons 2 and 3 of the HLA-B27 gene. Only two of eight HLA-B27 subtypes studied (B*2701-B*2708) were found. The distribution of these alleles in the population of patients was: B*2705, 68.8%, and B*2702, 31.2%. B*2705 subtype showed significant association with patients being male. In the healthy controls, the most common subtype was B*2708. These results were compared with frequencies reported in other Mestizo and Spanish populations and showed significant differences, such as a high frequency of B*2702. Such results show that HLA*B2705 and HLA*B2702 are the subtypes most frequently associated with AS in our Mestizo population and suggest a possible protector role for HLA*B2708, which was found only in the healthy population.

Respuesta inmune de toros vacunados con cepa rb51 de brucella abortus / Immune response in bulls vaccinated with brucella abortus strain rb51

La presente investigción tuvo como objetivo determinar el efecto de la vacunación de toros adultos con la cepa RB51 de Brucella abortus sobre la respeusta inmune humoral y celular. Para el estudio fueron seleccionados 20 toros mestizos de razas cebuinas, con una edad promedio de 3 años, de la zona sur del lago de Maracaibo, estado Zulia, Venezuela. Los animales fueron divididos en dos grupos: Un grupo (n= 10) recibió una dosis simple de 10 mil millones de UFC de cepa RB51 de Brucella abortus en 2 mL por vía subcutánea y otro grupo (n= 10) no recibió vacunación. Los toros fueron muestredos cada 15 días para diagnóstico serológico con pruebas tradicionales de brucelosis (Rosa de bengal, Aglutinación en placa y en tubo, 2-Mercaptoetnol y ELISA competitivo). A los 70 días post vacunación los animales fueron muestreados para medir la respuesta celular con la prueba de transformación linfoblástica frente a diferentes antígenos de la cepa RB51. No se observó respuesta de anticuerpos en ninguna de las pruebas de diagnóstico serológico tradicionales y los animales vacunados mostraron niveles significativamente mayores de respuesta inmune celular (P<0,05) que los animales no vacunados, especialmente para el antígeno 18 KDa de RB51. Por lo tanto, se puede concluir que el uso de cepa RB51 de Brucella abortus en toros a una dosis simple de 10 mil millones UFC/mL, no induce la formación de anticuerpos que interfieran con las pruebas de diagnóstico serológico para la infección por brucelosis y produce una buena respuesta celular protectora

[Association of HLA class I and leukemia in mestizo patients of the state of Zulia, Venezuela]. / Asociación HLA clase I y leucemia en pacientes mestizos del estado Zulia, Venezuela.

The Human Leukocyte Allele (HLA) Class I (A, B, C) and Acute Lymphoid Leukemia and Myeloid Leukemia association, was determined by polymerase chain reaction--sequence specific primers (PCR-SSP) in 60 patients and 30 healthy controls. The results were reported as allelic frequencies and haplotype. The Chi-square corrected, Fisher's Test, Relative risk and etiologic fraction were calculated. A significant positive association was showed between HLA-B*39 (RR = 16.184; p = 0.0237) and HLA C*03 (RR = 5.0; p = 0.0127) alleles and Mycloid Leukaemia. Positive associations between haplotypes 2 loci: HLA-A*02-C*03 (RR = 6.0; p = 0.0153), A*24-C*03 (RR = 16.184; p = 0.0237), B*40-C*03 (RR = 10.706; p = 0.0021) and haplotype 3 loci: HLA-A*02-B*40-C*03 (RR = 8.11; p = 0.0102) and Myeloid Leukemia were found. No association was evident in Acute Lymphoid Leukemia. No negative association with Leukemias were observed.

[Immune response and anergy. Study in tuberculosis patients from the Universitary Hospital, Maracaibo, Venezuela ]. / Respuesta inmunitaria y anergia. Estudio en pacientes tuberculosos del hospital universitario de Maracaibo, Venezuela.

With the aim of evaluate the anergy in Mycobacterium tuberculosis individuals infected we study 57 patients and 15 healthy controls, both sex and with different age, which to practice Sputum Bacteriology culture (BK) and the la reaction intradermic with PDD. The test of tuberculine on skin was achieve inoculate 0.1 ml de PPD intradérmic vía, the results were obtained at 72 h. 28 patient total result BK+ and 29 BK-. The Group BK+, 15 result PPD+ and 13 PPD-, the lastet were classify as anergic patients (BK+ PPD-). From the 29 patient residual (BK-), 20 was PPD+ and 9 PPD-. All the controls resulted BK- PPD-. Only the anergy in patient BK was evaluated + (28 individuals) patient. Was classified from the point of clinical view in three series: N series: 27 patient TBC+ BK-, P Series: 28 patient TBC+ BK+ and EP Series: 2 patient with extra pulmonary TBC. According to the grade of pulmonary complication, the patient separated in two groups, according to the extension and type of lesion found in the evaluation with X. rays The "group 1" with 9 patient (32.14%) it introduced lesions on one side with or without caverns and the "group 2" with 19 patient (67.85%) with bilateral lesions with or without caverns. Was carried out the Lymphoblastic Transformation Test (TTL) stimulating with PHA and PPD, for which patterns of outlying blood with heparina were gathered. The concentrations of IL-4, IL-6 and INF-gamma was gotten inmunoenzimatic in supernatants of cultivations for rehearsals and in plasm, hind to the stimulation with the PPD. The statistical analysis was carried out utilizing the Test T of Student in pair, Varianza Analysis and the square Chi. Only the controls and the patient BK-, they showed normal response to the PHA, in contrast, the patient BK+ PPD+ they introduced a suppression of the response opposite the PHA of aprox. 90%. The patient PPD+ they showed a superior response in cultivation that the patient PPD-. The concentration of IL-4 in the plasm of the anergic patient (PPD-) showed a significant difference (P < 0.05) with concerning the PPD group+. The concentration of INF-gamma was lower in the anergic patient significantly different to the of the patient PPD+. Similar result was gotten in the mensuration of IL-4 and INF-gamma in supernatants of cultivation. One could observe the presence of patient with IL-4+ INF-gamma, and INF-gamma or IL-4 only. In the patient classified clinical like series "P", the concentration of IL-4 was old in the "group 2" with concerning the "group 1." the opposite occurred with the concentrations of the INF-gamma which were old in the "group 1" (both differences were not significant statistical). The increase of IL-4 next to low concentrations of INF-gamma in anergic patient and committed clinical, it suggest a prevalence of the pattern Th2 (T2) in the immune response.

Respuesta inmunitaria y anergia. Estudio en pacientes tuberculosos del Hospital Universitario de Maracaibo, Venezuela / Immunitary response and anergy. Study in tuberculosis patients from the Universitary Hospital, Maracaibo, Venezuela

RESUMEN: Con el objeto de evaluar la anergia en individuos infectados con el Mycobacterium tuberculosis se estudiaron 57 pacientes y 15 controles sanos de ambos sexos y edades diferentes, a los cuales se les practicó cultivo bacteriológico de esputo (BK) y la intradermoreacción con el PDD. La prueba de tuberculina en piel fue realizada inoculando 0.1 ml de PPD vía intradérmica con resultados evaluados a las 72 horas. Un total de 28 pacientes resultaron BK+ y 29 BK-. Del grupo BK+, 15 resultaron PPD+ y 13 PPD-, estos últimos fueron clasificados como pacientes anérgicos (BK+PPD-). De los 29 pacientes restantes (BK-), 20 fueron PPD+ y 9 PPD-. Todos los controles resultaron BK- PPD-. Solamente se evaluó la anergia en pacientes BK+ (28 individuos).Los pacientes fueron clasificados desde el punto de vista clínico en tres series: Serie N: 27 pacientes TBC + BK-, Serie P: 28 pacientes TBC + BK+ y Serie EP: 2 pacientes con TBC extra pulmonar. Según el grado de complicación pulmonar, los pacientes se separaron en dos grupos, de acuerdo a la extensión y tipo de lesión encontrados en la evaluación con rayos X. El ôgrupo 1ö con 9 pacientes (32.14 %) presentó lesiones unilaterales con o sin cavernas y el ôgrupo 2ö con 19 pacientes (67.85 %) con lesiones bilaterales con o sin cavernas. Se realizó el Test de transformación linfoblástica (TTL) estimulando con PHA y/o PPD, para lo cual se recolectaron muestras de sangre periférica con heparina. Las concentraciones de IL-4, IL-6 INF-gama obtuvieron por ensayos inmunoenzimáticos en sobrenadante de cultivos y en plasma, posterior a la estimulación con el PPD. El análisis estadístico se realizó utilizando el Test T de Student pareado, Análisis de Varianza y el Chi cuadrado. Sólo los controles y los pacientes BK-, mostraron respuesta normal a la PHA, en contraste, los pacientes BK+ PPD+ presentaron una supresión de la respuesta frente a la PHA de aprox. 90 %. Los pacientes PPD+ mostraron una respuesta superior en cultivo que los pacientes PPD-. La concentración de IL-4 en el plasma de los pacientes anergicos (PPD-) mostró una diferencia significativa (P<0.05) con respecto al grupo PPD+. La concentración de INF-gama fue inferior en los pacientes anérgicos mas no significativamente diferente a la de los pacientes PPD+. Similar resultado se obtuvo en la medición de IL-4 INF- en sobrenadante de cultivo. Se pudo observar la presencia de pacientes con IL-4 + INF-gama, INF-gamao IL-4 solamente...