RESUMO
Current visceral leishmaniasis (VL) control programs in Brazil include the infected dog elimination but, despite this strategy, the incidence of human VL is still increasing. One of the reasons is the long delay between sample collection, analysis, control implementation and the low sensitivity of diagnostic tests. Due to the high prevalence of asymptomatic dogs, the diagnosis of these animals is important considering their vector infection capacity. Hence, a rapid and accurate diagnosis of canine visceral leishmaniasis is essential for an efficient surveillance program. In this study we evaluated the performance of rK39 antigen in an immunochromatographic format to detect symptomatic and asymptomatic Leishmania chagasi infection in dogs and compared the results with those using a crude antigen ELISA. The sensitivity of rK39 dipstick and ELISA were 83% vs. 95%, respectively, while the specificity was both 100%. Our results also demonstrated that the dipstick test was able to detect infected dogs presenting different clinical forms.
Assuntos
Anticorpos Antiprotozoários/sangue , Antígenos de Protozoários/imunologia , Doenças do Cão/diagnóstico , Doenças do Cão/fisiopatologia , Leishmaniose Visceral/veterinária , Proteínas de Protozoários/imunologia , Kit de Reagentes para Diagnóstico , Animais , Antígenos de Protozoários/genética , Cromatografia/métodos , Doenças do Cão/parasitologia , Cães , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Imunoensaio , Leishmania/isolamento & purificação , Leishmaniose Visceral/diagnóstico , Leishmaniose Visceral/parasitologia , Leishmaniose Visceral/fisiopatologia , Proteínas de Protozoários/genética , Sensibilidade e Especificidade , Fatores de TempoRESUMO
Recentemente, foco de leishmaniose visceral canina (CVL) foi descrito na regiäo noroeste do Estado de São Paulo - Brasil. O Hospital Veterinário - UNESP - Araçatuba, no ano de 2.000, desenvolveu 60 testes citopatológicos de casos suspeitos de leishmaniose usando aspirado por agulha fina (FNA). Os esfregaços de linfonodo foram corados pelo método de Romanowsky (Diff-Quik®) e observados em microscopia de luz. Os casos positivos mostraram formas amastigotas típicas de Leishmania livres ou em vacúolos de macrófagos. Sinais citopatológicos de reatividade do sistema linfo-histiocitário com ausência de parasitos foram também observados. Com o objetivo de implementar o diagnóstico da CVL, detectando parasitos e material antigênico nos esfregaços, aplicou-se a reaçäo de imunofluorescência direta (IFD) usando anticorpo policlonal anti-Leishmania produzido em camundongo. Comparamos o método de IFD com a pesquisa direta do parasito em esfregaços corados pelo método de Romanowsky. Dos 60 cäes com sinais clínicos da doença, o exame direto foi positivo em 50 por cento (n=30), duvidoso em 36,7 por cento (n=22) e negativo com reatividade do linfonodo em 13,3 por cento (n=8). Quando os linfonodos foram submetidos a reaçäo de IFD observamos reaçäo positiva em 93,3 por cento (n=56) e reaçäo negativa em 6,7 por cento (n=4). Nossos resultados mostraram que a reaçäo de IFD apresentou alta sensibilidade quando comparada a pesquisa direta do parasito pela coloraçäo de Romanowsky. A reaçäo de IFD pode ser um método útil para confirmar os casos duvidosos da doença, onde as formas amastigotas näo säo identificadas com facilidade
