Resistencia a aminoglucósidos y quinolonas en cepas de Klebsiella pneumoniae aisladas en dos unidades de cuidados intensivos del Hospital Universitario de Los Andes Mérida, Venezuela, entre 2007 y 2009 / Aminoglycoside and quinolone resistance in strains of Klebsiella pneumonia isolated from two units of intensive care unit of the University of the Andes Hospital, Merida, Venezuela between 2007 and 2009

Introducción: el incremento en la resistencia a aminoglucósidos y quinolonas es un grave problema para el tratamiento de las infecciones a nivel mundial. Sin duda uno de los factores que ha contribuido a este incremento, es la gran plasticidad que poseen para adquirir genes que le confieren resistencia a los antimicrobianos. Objetivo: determinar los patrones y genes de resistencia a aminoglucósidos y quinolonas en cepas de K. pneumoniae aisladas de dos unidades del Hospital Universitario de los Andes Mérida. Venezuela en 2007 y 2009. Materiales y Método: evaluaron 39 cepas de K. pneumoniae aisladas en la unidad de alto riesgo neonatal y unidad de cuidados intensivos de adultos. La sensibilidad antimicrobiana se determinó mediante la prueba de difusión del disco y por E-test. La detección de los genes aac(3)-IIa, aac(6)-Ib, arma, rmt, qnrA, qnrB y qnrS se realizó por PCR y posterior secuenciación. Resultados: el 100% de las cepas aisladas en 2007 portaban el gen aac(6)-Ib, mientras que el 57% de las cepas aisladas de la misma unidad y de la unidad de cuidados intensivos de adultos en el año 2009 portaban los genes de resistencia aac(3)-IIa, aac(6)-Ib. La resistencia a quinolonas se observó en el 88,8% de las cepas aisladas de la y portaban el gen qnrB. Conclusiones: la resistencia a los aminoglucósidos en las cepas aisladas en la unidad de alto riesgo neonatal estuvo mediada por los genes genes aac(3)-IIa y aac(6)-Ib. Mientras que la resistencia a quinolonas se presento en las cepas aisladas de la unidad de cuidados intensivos de adultos mediadas por el gen qnrB. MÉD.UIS. 2016;29(2):21-30.

Introduction: aminoglycoside and quinolone resistance is serious problem for the treatment of infections worldwide.Without doubtone of the factors that has contributed to the increase in the resistance in enterobacteria, is the great plasticity that possess the bacteria of this family to acquire genes that confers resistance to antimicrobials. Objective: to determine the patterns of resistance to aminoglycosides and quinolones in strains of Klebsiella pneumoniae isolated from two intensive care units of the Universidad de los Andes, Merida, Venezuela. Methods: weevalvated with 39 K. pneumoniae strains isolated in neonatal high risk unit and adult intensive care unit. Antibiotic susceptibility was tested by the disk diffusion method and by the E-test method. Detection of aac (3)-IIa, aac (6)-Ib, arma, rmt, qnrA, qnrS qnrB genes was carried out by PCR and subsequently sequenced. Results: 100 % of the strains isolated in 2007 were carriers of the gene aac(6)-Ib , while 57% of the strains isolated from the same unit and the in the year 2009 were carriers of resistance genes aac(3)-IIa, aac(6)-Ib. The resistance to quinolones were observed in the 88.8% of the strains of Klebsiella isolated from the AICU and were carriers the qnrB gene. Conclusions: the resistance to aminoglycosides in strains isolated in the neonatal high risk unit was mediated by genes aac(3)-IIa and aac(6)-Ib. While the resistance to quinolones was presented in the strains isolated from the adult intensive care unit mediated by the qnrB gene. MÉD.UIS. 2016;29(2):21-30.

[Characterization of extended-spectrum ß-lactamases-producing Klebsiella pneumoniae isolates of two intensive care units]. / Caracterización de cepas de Klebsiella pneumoniae productora de ß-lactamasa de espectro extendido aisladas en dos unidades de cuidados intensivos.

BACKGROUND: Extended-spectrum ß-lactamase (ESBL)- producing Klebsiella pneumonia is more the frequently implied bacterium infections nosocomiales in the Neonatal High Risk Unit (NHRU), and adult intensive care unit (aICU) in the The Andes University Hospital Autonomy Institute. AIM: To determine the microbiological and molecular characteristics associated with infections caused by this bacterium. MATERIAL AND METHODS: 17 strains of K. pneumoniae isolated from neonates from NHRU with nosocomial infections and 11 isolates from patients hospitalized in the aICU between June to November 2009 were characterized by in vitro agar diffusion test and MIC, the production of ß-lactamase, the presence of blaTEM blaSHV y blaCTX-M genes and genotyping. RESULTS: A high percentage of resistance to ß-lactams and the presence of ESßL TEM, SHV and CTX-M in 41.2 y 82% of strains obtained at HRNU and at aICU respectively were detected. BLEE (+) phenotype was detected in 17,6% of HRNU strains and 91% of aICU strains. Genotypic analysis by REP-PCR detected several clones suggesting that resistant clones of ESBL-producing K. pneumoniae are endemic not only specific circulation and transmission of a single common among patients. CONCLUSION: K. pneumoniae strains that produce ß-lactamases circulate in these critical units studied representing a therapeutic challenge that is necessary to fight against.

Caracterización de cepas de Klebsiella pneumoniae productora de β-lactamasa de espectro extendido aisladas en dos unidades de cuidados intensivos / Characterization of extended-spectrum β-lactamases-producing Klebsiella pneumoniae isolates of two intensive care units

Background: Extended-spectrum β-lactamase (ESBL)- producing Klebsiella pneumonia is more the frequently implied bacterium infections nosocomiales in the Neonatal High Risk Unit (NHRU), and adult intensive care unit (aICU) in the The Andes University Hospital Autonomy Institute. Aim: To determine the microbiological and molecular characteristics associated with infections caused by this bacterium. Material and Methods: 17 strains of K. pneumoniae isolated from neonates from NHRU with nosocomial infections and 11 isolates from patients hospitalized in the aICU between June to November 2009 were characterized by in vitro agar diffusion test and MIC, the production of β-lactamase, the presence of blaTEM blaSHV y blaCTX-M genes and genotyping. Results: A high percentage of resistance to β-lactams and the presence of ESβL TEM, SHV and CTX-M in 41.2 y 82% of strains obtained at HRNU and at aICU respectively were detected. BLEE (+) phenotype was detected in 17,6% of HRNU strains and 91% of aICU strains. Genotypic analysis by REP-PCR detected several clones suggesting that resistant clones of ESBL-producing K. pneumoniae are endemic not only specific circulation and transmission of a single common among patients. Conclusion: K. pneumoniae strains that produce β-lactamases circulate in these critical units studied representing a therapeutic challenge that is necessary to fight against.

Introducción: Klebsiella pneumoniae productora de β-lactamasa de espectro extendido (βLEE) es la bacteria más frecuentemente implicada en infecciones nosocomiales en las Unidades de Alto Riesgo Neonatal (UARN) y Cuidados intensivos de adulto (UCIa) del Instituto Autónomo Hospital Universitario de Los Andes. Objetivo: Determinar las características microbiológicas y moleculares asociadas a las infecciones causadas por esta bacteria. MaterialyMétodos: Se caracterizaron la susceptibilidad in vitro por difusión en agar y CIM, la presencia de β-lactamasa y la presencia de genes blaTEM blaSHV y blaCTX-M y la genotipificación en 17 cepas de K. pneumoniae aisladas de neonatos con infección nosocomial, así como 11 aisladas de pacientes hospitalizados en la UCIa entre junio y noviembre de 2009. Resultados: Esta investigación reveló un alto porcentaje de resistencia a β-lactámicos y la presencia de genes tipo blaTEM, blaSHV y blaCTX-M en 41,2 y 82% de las cepas procedentes de UARN y UCIa, respectivamente. Producción de BLEE se detectó en 17,6% cepa de UARN y en 91% de las pertenecientes a UCIa. Mediante el análisis genotípico REP-PCR se detectaron varias clones lo cual sugiere que existen clones resistentes de K. pneumoniae productora de βLEE específicas no endémicas más que la circulación y transmisión de un aislado habitual entre pacientes. Conclusión: En las unidades críticas estudiadas circulan cepas de K. pneumoniae productoras de β-lactamasas constituyendo un problema terapéutico importante y necesario de combatir.

Determinación del gen que codifica la enzima APH-(3´)-VIa en aislamientos de Acinetobacter 13TU:RUH1139 de origen hospitalario / Determination of the gene which codifies the APH-(3’)-VIa enzyme in Acinetobacter 13TU:RUH1139 isolates of nosocomial origin

El objetivo de este trabajo fue evaluar el fenotipo de resistencia y la presencia del gen aminoglucósido-O-fosfotransferasa-3´-VIa (aph-(3´)-VIa) en 23 aislamientos identificados como Acinetobacter 13TU:RUH 1139, provenientes de neonatos y soluciones parenterales, administradas a los mismos, en la Unidad de Alto Riesgo Neonatal (UARN) del Instituto Autónomo Hospital Universitario de Los Andes (IAHULA). Para la determinación de la susceptibilidad antimicrobiana se probaron seis aminoglucósidos mediante la prueba de difusión en agar (amikacina, gentamicina, tobramicina, netilmicina, dibekacina y neomicina), así como kanamicina y estreptomicina por dilución en agar. Todos los aislamientos resultaron resistentes a estreptomicina, más del 90% de los mismos mostraron resistencia ante amikacina, gentamicina y tobramicina, y el 82,6% fue resistente a netilmicina y dibekacina. Se detectó el gen aph-(3´)-VIa en 15 aislamientos de los neonatos y en 2 provenientes de las soluciones parenterales. Debido al elevado porcentaje de aislamientos resistentes a los aminoglucósidos, así como la presencia del gen aph-(3´)-VIa en Acinetobacter 13TU:RUH 1139, el uso de estos antimicrobianos como monoterapia debe ser restringido en el IAHULA y es necesario vigilar continuamente la diseminación genética de dicha resistencia.

The purpose of this work was to evaluate the resistance phenotype and the presence of aminoglucoside-0-phosphotransferase-3’-VIa (aph-(3’)-VIa) in 23 isolates identified as Acinetobacter 12TU:RUH 1139, obtained from neonates and parenteral solutions administered to them, at the Neonatal High Risk Unit (NHRU) of the Instituto Autónomo Hospital Universitario de Los Andes (IAHULA). Six aminoglucosides were examined for determination of antimicrobial susceptibility by the agar-diffusion test (amikacin, gentamycin, tobramycin, netilmycin, dibekacin, and neomycin), as well kanamycin and streptomycin by the agar-dilution test. All the isolates were streptomycin resistant, and over 90% of them showed resistance to amikacin, gentamycin, and tobramycin, and 82.6% was resistant to netilmycin and dibekacin. Gene aph-(3`)-VIa was detected in 15 isolates from neonates and in 2 from the parenteral solutions. Due to the high percentage of aminoglucoside-resistant isolates, as well as the presence of the gene aph-(3’)-VIa in Acinetobacter 13TU:RUH 1139, the use of these antimicrobials as monotherapy should be restricted at the AUHLA, and it is necessary to constantly survey the genetic dissemination of this resistance.

Properties of honey from ten species of Peruvian stingless bees.

Honey produced by ten stingless bee species (Melipona crinita, M. eburnea, M. grandis, M. illota, Nannotrigona melanocera, Partamona epiphytophila, Ptilotrigona lurida, Scaptotrigona polystica, Scaura latitarsis, and Tetragonisca angustula) from Peru has been characterized according to traditional physicochemical standards (color and moisture), biochemical components (flavonoids, polyphenols, nitrites, proteins), and bioactive properties (antibacterial activity, antioxidant capacity). Analytical data are also provided for a sample of Apis mellifera and an artificial honey control. For stingless bees, honey color varied between 26 and 150 mm Pfund. M. illota produced the lightest honey, while N. melanocera and T. angustula were the darkest. Moisture varied between 20.8 and 45.8 g water/100 g, confirming higher moisture for stingless bee honey than the A. mellifera honey standard of 20 g water/100 g. Flavonoids varied from 2.6 to 31.0 mg quercetin equivalents/100g, nitrites from 0.30 to 2.88 micromoles nitrites/100 g, polyphenols from 99.7 to 464.9 mg gallic acid equivalents/100g, proteins from 0.75 to 2.86 g/100 g, and the antioxidant capacity from 93.8 to 569.6 micromoles Trolox equivalents/100 g. The minimal inhibitory concentration (MIC) was slightly lower against Staphylococcus aureus (12.5 -50 g/100 mL) than Escherichia coli (50 g/100 mL).

Evaluación de actividad antibacteriana de mieles de Apis mellifera, contra Escherichia coli y Staphylococcus aureus / Evaluation of the antibacterial activity of Apis mellifera honey against strains of Escherichia coli and Staphylococcus aureus

La miel de abeja es un fluido dulce y viscoso producido por las abejas a partir del néctar y de la mielada. Se trata de una medicina antigua utilizada principalmente en el tratamiento de heridas, úlceras y quemaduras. En el presente trabajo se evaluó la actividad antimicrobiana de nueve mieles venezolanas, para lo cual se utilizaron cepas ATCC de Escherichia coli y Staphylococcus aureus. Las mieles analizadas se utilizaron concentradas y diluidas (1:2, 1:4, 1:8). Se observó la inhibición del crecimiento de S. aureus en la miel procedente del estado Trujillo sin diluir y en su dilución 1:2, mientras que no se observó inhibición del crecimiento de las cepas de E. coli, por lo que deberían probarse otras bacterias para futuras aplicaciones.

Honey is a sweet and viscous fluid produced by bees from nectar and honeydew. It is an ancient natural medicine mainly used to treat wounds, ulcers and burns. In this study we have assessed the antibacterial activity against E. coli and S. aureus of nine Venezuelan honeys participating in the national honey contest year 2005, compared with a control artificial honey. The honeys were tested at three dilutions (1:2, 1:4, 1:8) and undiluted. Only S. aureus was inhibited by one undiluted honey sample and at the 1:2 dilution. The honeys from the contest, were of low therapeutical value against E. coli and S. aureus, but other bacterias should be tested for further applications.

Utilidad del Sistema API 20NE para identificar especies del género Acinetobacter y otros bacilos gramnegativos no fermentadores / Use of the API 20NE System to identify species of the Acinetobacter genus and other non fermenting gram-negative bacilli

Se utilizaron 62 cepas identificadas inicialmente como bacilos gramnegativos no fermentadores (BGNNF), aisladas de pacientes con diagnóstico de infección nosocomial, con el objeto de determinar su género y especie. Cuarenta y cinco cepas fueron identificadas como Acinetobacter baumannii, 10 como Pseudomonas aeruginosa, 3 como Stenotrophomonas maltophilia, 3 como Comamonas acidovorans y 1 como Achromobacter xylosoxidans subsp. xylosoxidans, mediante el API 20NE. Con respecto a las cepas de Acinetobacter, el ARDRA permitió identificar 20 cepas como A. baumannii y 23 como Acinetobacter genoespecie 13TU, pero 2 cepas no fueron identificadas por este método. La secuencia de la subunidad 16S del ADNr de todas las cepas incluidas en este estudio permitió identificar 20 cepas como A. baumannii, 23 cepas como Acinetobacter RUH1139, 10 como P. aeruginosa, 4 como A. xylosoxidans subsp. xylosoxidans (2 de estas cuatro cepas habían sido identificadas como A. baumannii mediante API20NE), 3 como S. maltophilia, 1 como C. acidovorans y 1 como β-Proteubacterium. Las discrepancias entre la identificación bioquímica por API 20NE y por ARDRA, para diferenciar las genoespecies de Acinetobacter, fue resuelta por la secuenciación de la subunidad 16S del ADNr, indicando que la identificación de los aislados de Acinetobacter, entre otros BGNNF, mediante API 20NE, debe ser confirmada por técnicas genéticas.

We used 62 strains initially identified as non fermenting gram-negative bacilli (NFGNB) isolated from patients with a nosocomial infection diagnosis with the purpose of identifying their genus and species. Forty five strains were identified as Acinetobacter baumannii, 10 as Pseudomonas aeruginosa, 3 as Stenotrophomonas maltophilia, 3 as Comamonas acidovorans and 1 as Achromobacter xylosoxidans subspecies xylosoxidans through the API 20NE. Regarding the Acinetobacter strains, the ARDRA allowed to identify 20 strains as A. baumannii and 23 as Acinetobacter genospecies 13TU, but 2 strains were not identified with this method. The ADNr 16S sequence of all the strains included in this study allowed to identify 20 strains as A. baumannii, 23 strains as Acinetobacter RUH1139, 10 as P. aeruginosa, 4 as A. xylosoxidans subsp. xylosoxidans (2 of these four strains strains had been identified as A. baumannii through API20NE), 3 as S. maltophilia, and 1 as C. acidovorans and 1 as β-Proteubacterium. The discrepancies between the biochemical identification by API 20NE and by ARDRA to differentiate the Acinetobacter genospecies was resolved by the ADNr16S sequencing, indicating that the identification of the Acinetobacter isolates, among other NFGNB, through API 20NE, should be confirmed through genetic techniques.

Molecular study of methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolates at a neonatal high-risk unit in Merida, Venezuela.

BACKGROUND: Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is a multiresistant microorganisms which holds first place in the world as a nosocomial pathogen. Special attention has therefore been directed to specific nosocomial surveillance systems and strict infection control measures for this microorganism in which the microbiological laboratory plays an important role by applying phenotypic and genotypic methods that permit establishing their epidemiological relationship especially in hospital outbreaks. In the present study the general objective was to study MRSA strains isolated from neonates with nosocomial infections and from healthcare personnel working in the Neonatal High Risk Unit (NHRU) of the Andes University Hospital Autonomous Institute (AUHAI) in Mérida, Venezuela. MATERIAL/METHODS: Forty-three S. aureus isolates were analyzed by phenotypic and genotypic methods. RESULTS: In these strains, antibiotypes resistant to oxacillin, gentamicin, erythromycin, and tobramycin predominated (50%). The greater percentage of MRSA strains isolated from health personnel as well as two neonates were described as pulse types Ia and Ib, belonging to phage group II, containing type IV SCCmecA and resistant to macrolides and aminoglycosides and sensitive to clindamycin and trimethoprim-sulfamethoxazole. CONCLUSIONS: This is the first reported case of SCCmecA type IV MRSA found in the NHRU of the AUHAI.

Caracterización fenotípica de cepas de Staphylococcus coagulasa negativa aisladas de una unidad de alto riesgo neonatal / Phenotypic characterization of coagulase-negative Staphylococcus strains isolated from a high risk neonatal unit

Las infecciones nosocomiales constituyen un problema de salud pública, debido a las altas tasas de morbimortalidad que ocasiona y por los altos costos económicos que generan. Las unidades de cuidados intensivos son una de las principales áreas donde se registra una alta incidencia de infección nosocomial, siendo la sepsis la principal infección en la cual se involucran una gran variedad de microorganismos. El grupo de Staphylococcus coagulasa negativa (SCN), es uno de los agentes etiológicos más frecuentemente aislados. De ahí nuestro interés en realizar la caracterización de 32 cepas de SCN aisladas de neonatos con infección nosocomial en la Unidad de Alto Riesgo Neonatal (UARN) del Instituto Autónomo Hospital Universitario de Los Andes (IAHULA), Mérida, Venezuela; durante el período diciembre 1997-Abril 1999. Los resultados muestran que el aislamiento de SCN fue de 47,37 por ciento. El 78,1 por ciento de las cepas estudiadas se aislaron de neonatos con bacteremia. Las especies más frecuentes fueron S. epidermidis (46,9 por ciento) y S. warneri (34,4 por ciento). Todas las cepas evaluadas mostraron resistencia a la penicilina y en un 18,8 por ciento de ellas mediada por la producción de B-lactamasa. El 68,8 por ciento de las cepas fueron resistentes a oxacilina y el 78,1 por ciento a gentamicina. La mayoría de las cepas resistentes a oxacilina mostraron valores de CIM g/mL, y se detectó la presencia de la PBP2a. Ninguna de las cepas fueron hiperproductoras de B-lactamasa. Se observó una excelente actividad de la vancomicina y quinupristin-dalfopristin sobre todas las cepas SCN evaluadas. Debido al papel que tienen los SCN en la UARN del IAHULA, es necesario extremar las medidas de asepsia durante los procedimientos de diagnóstico y terapéuticos invasivos, con el propósito de evitar las infecciones causadas por este grupo de microorganismos.

Nosocomial infections constitute a public health problem due to a high level of morbidity and mortality, generating high health-care costs in hospitals. Intensive care units are the principal areas where a high incidence of nosocomial infections is reported. Bacterimia is the principal infection involving a large variety of microorganisms; coagulase-negative Staphylococcus (CNS) is one of the most frequently isolated pathogens. Therefore, the purpose of this study was to characterize the 32 strains of CNS isolated from neonates with nosocomial infections in the High Risk Neonatal Unit (HRNU) at the University of the Andes Hospital Autonomous Institute (UAHAI), Mérida, Venezuela, from December 1997 to April 1999. Results showed that the isolation of CNS was 47.37 percent; 78.1 percent of the species were isolated from neonates with bacteremia. S. epidermidis (46.9 percent), and S. warneri (34.4 percent) were the species most frequently found. All pathogens showed resistance to penicillin and 18.8 percent of them produced ß-lactamase; 68.8 percent were resistant to oxacillin and 78.1 percent to gentamicin. Most of the oxacillin-resistant strains showed MIC values above 0.5 mg/mL and the presence of PBP2a was detected. None of the strains were hyper-producers of ß-lactamase. Vancomicin and quinuprintin/dalfopristin showed excellent activity against these CNS. Due to the role of CNS as a pathogen in the HRNU of UAHAI, strong asepsis measures during diagnosis and therapeutic invasive procedures must be taken to prevent infections caused by this group of microorganisms.

[Comparison between culture media and procedures to detect Streptococcus agalactiae in pregnant women]. / Comparación de medios de cultivos y procedimientos para detectar colonización por Streptococcus agalactiae en mujeres embarazadas.

Detection of Streptococcus agalactiae in pregnant women's vagina and rectum and intrapartum antibiotic prophylaxis administered to colonized women are currently recommended to prevent neonatal precocious infections by this organism. In turn, it is very important to select the culture media and adequate sample collection site for S. agalactiae detection in colonized women. To standardize this methods in laboratory, different culture media and procedures for S. agalactiae recovery in pregnant women with obstetric and gynecologic complications were compared. Vaginorectal and endocervical swab specimens were collected from 60 pregnant women. The first sample was placed onto selective Columbia blood agar directly and onto selective Todd-Hewitt broth incubated at 37 degrees C and subcultured onto selective Columbia blood agar at 4 and 18 hours. The second sample was cultured on selective Columbia blood agar. Both culture media were incubated in a microaerophilic atmosphere at 37 degrees C from 24 to 48 hours. S. agalactiae was identified using conventional tests. 21 patients colonized with S. agalactiae were detected using vaginoanorectal samples. 19 (31.7%) patients tested positive for S. agalactiae through the culture of specimens directly onto selective Columbia blood agar; 21 (35%) and 20 (33%) patients were found to be positive for S. agalactiae by the selective Todd-Hewitt broth at 4 and 18 hours, respectively. Only one patient tested positive for S. agalactiae in the endocervical tract. The results show that the three procedures followed for S. agalactiae recovery are effective. Nevertheless, the procedure in which the sample was placed directly onto selective Columbia blood agar permits reducing costs and the time for bacteria identification. On the other hand, the vaginoanorectal swab was the best sample to detect colonization by S. agalactiae in pregnant women.

Comparación de medios de cultivos y procedimientos para detectar colonización por Streptococcus agalactiae en mujeres embarazadas / Comparison between culture media and procedures to detect Streptococcus agalactiae in pregnant women

Introducción: La detección de Streptococcus agalactiae en la vagina y/o el recto de las mujeres embarazadas y la administración de profilaxis antimicrobiana intraparto en las colonizadas, es el método recomendado para prevenir la infección neonatal precoz por este patógeno. En consecuencia, es importante seleccionar los medios de cultivos y el sitio de toma de muestra más adecuado para la detección de S. agalactiae en mujeres colonizadas. Objetivo: Comparar diferentes medios de cultivos y procedimientos para la recuperación de S. agalactiae en mujeres embarazadas con complicaciones gineco-obstétricas. Metodología: Se tomaron hisopados vagino-ano-rectales y endocer-vicales de 60 mujeres embarazadas. Con la primera muestra se realizó cultivo directo en agar sangre Columbia selectivo (ASCSD), y caldo selectivo Todd Hewitt (CSTH) incubados a 37 °C, y subcultivos a las 4 y 18 horas en agar sangre Columbia selectivo (ASCS). La segunda muestra se cultivó en ASCS. El ASCSD y ASCS se incubaron en atmósfera microaeróñla a 37 °C durante 24 a 48 horas. La identificación de S. agalactiae se realizó mediante pruebas convencionales. Resultados: Utilizando hisopado vagino-ano-rectal se detectaron 21 pacientes colonizadas con S. agalactiae, de la siguiente manera: 19(31,7 por ciento) en el ASCSD, 21 (35 por ciento) en el CSTH a las 4 horas y 20 (33,3 por ciento) a las 18 horas. De las 21 pacientes colonizadas sólo a una paciente se le detectó S. agalactiae en la muestra de secreción vagino-ano-rectal y endocervical simultáneamente. Conclusión: Los tres procedimientos ensayados presentaron igual efectividad para la recuperación de S. agalactiae; sin embargo, con el uso del ASCSD, se disminuyen los costos y el tiempo de identificación de dicho microorganismo. Por otra parte, el hisopado vagino-ano-rectal resultó ser la muestra más idónea para detectar colonización por S. agalactiae en mujeres embarazadas.

Detection of Streptococcus agalactiae in pregnant women's vagina and rectum and intrapartum antibiotic prophylaxis administered to colonized women are currently recommended to prevent neonatal precocious infections by this organism. In turn, it is very important to select the culture media and adequate sample collection site for S. agalactiae detection in colonized women. To standardize this methods in laboratory, different culture media and procedures for S. agalactiae recovery in pregnant women with obstetric and gynecologic complications were compared. Vaginorectal and endocervical swab specimens were collected from 60 pregnant women. The first sample was placed onto selective Columbia blood agar directly and onto selective Todd-Hewitt broth incubated at 37 °C and subcultured onto selective Columbia blood agar at 4 and 18 hours. The second sample was cultured on selective Columbia blood agar. Both culture media were incubated in a microaerophilic atmosphere at 37 °C from 24 to 48 hours. S. agalactiae was identified using conventional tests. 21 patients colonized with S. agalactiae were detected using vaginoanorectal samples. 19 (31.7 percent) patients tested positive for S. agalactiae through the culture of specimens directly onto selective Columbia blood agar; 21 (35 percent) and 20 (33 percent) patients were found to be positive for S. agalactiae by the selective Todd-Hewitt broth at 4 and 18 hours, respectively. Only one patient tested positive for S. agalactiae in the endocervical tract. The results show that the three procedures followed for S. agalactiae recovery are effective. Nevertheless, the procedure in which the sample was placed directly onto selective Columbia blood agar permits reducing costs and the time for bacteria identification. On the other hand, the vaginoanorectal swab was the best sample to detect colonization by S. agalactiae in pregnant women.

Molecular epidemiology and characterization of resistance mechanisms to various antimicrobial agents in Acinetobacter baumannii isolated in Mérida, Venezuela.

BACKGROUND: A. baumannii outbreaks are difficult to control because of the relative ease with which this microorganism spreads and persists in hospital settings. Successive papers reported increased resistance in clinical isolates of A. baumannii, currently resistant to most antibiotics. The purpose of this study was to characterize the epidemiological relationship and the mechanisms of resistance to several antimicrobial agents of a collection of A. baumannii strains. MATERIAL/METHODS: Twenty A. baumannii isolated from two intensive care units (ICUs) at the Instituto Autónomo Universitario de Los Andes, Mérida, Venezuela, were analyzed by PFGE. Characterization of resistance determinants to various antimicrobial agents was also carried out. RESULTS: PFGE typing revealed five different patterns. Pattern 1, susceptible to ciprofloxacin and cefepime, was found to be spread among the patients of both ICUs and was also cultured from a humidifier in the neonatal ICU. All the strains were resistant to gentamicin and tetracycline, 90% to amikacin and cefotaxime, and 85% to ciprofloxacin. The resistance of the strains to ceftazidime, cefepime, and imipenem was 40, 50, and 10%, respectively. All the strains showed beta-lactamases with Ips equal to 5.4 (TEM-1) and greater than 9. Furthermore, two of them, both exhibiting resistance to imipenem, presented a beta-lactamase with an Ip of 7.2 (OXA-58). Three of seven amikacin-resistant A. baumannii strains (PFGE-2) carried the gene encoding the APH(3')-Vla enzyme and two strains (PFGE-5) had the TET(B) determinant. CONCLUSIONS: This study shows the dissemination of A. baumannii clinical isolates, a humidifier being the source of the strain.

Monitoreo bacteriológico de áreas clínicas odontológicas: estudio preliminar de un quirófano / Bacteriological monitoring in clinical dental areas: a preliminary study of an operating room

Knowledge on nosocomial infections has led to improve prevention and control of infectious diseases. The School of Dentistry in the University of Los Andes seeks to increase oral health in its public service, but several limitations impede the establishment of competent clinical environments in agreement with International guidelines. These limitations increase the possibility of clumping potentially pathogen microorganisms, which can affect the final result of dental treatment and cause some other complications. In order to measure the bacterial load and the presence of pathogens like: Pseudomonas sp, Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Acinetobacter sp. in the environment of the surgery room "A" (Department of Anesthesiology and Stomatological Surgery, School of Dentistry, University of Los Andes), we performed a bacteriological analysis on samples obtained with hyssop from lamp holder, suction hose, arm rest and ventilation duct, and one sample obtained from the environment with a Tripticase Soy Lecithin Tween 80 agar plate opened over the instrumental tray, before and after three surgical procedures in different days. Bacterial load was measured and evaluated. The recovered bacteria were identified by conventional microbiological techniques. No satisfactory bacterial load was observed and three of the searched pathogens were recovered. The high bacterial load shows an inadequate environment for surgical procedures, it suggests deficiencies in disinfection's techniques and supports the need for setting bacteriological monitoring programs for environments in dental clinic areas.

El conocimiento de las enfermedades nosocomiales ha conllevado a mejorar la prevención y control de enfermedades infecciosas. La Facultad de Odontología de la Universidad de Los Andes, en su servicio público, busca mejorar la salud bucal poblacional; no obstante muchas limitantes impiden la adecuación de los ambientes clínicos según lineamientos internacionales, incrementando la posibilidad de acumular microorganismos potencialmente patógenos que pueden comprometer el resultado final del tratamiento odontológico y/u ocasionar problemas subyacentes. Con la finalidad de evaluar la carga bacteriana y la presencia de patógenos como Pseudomonas sp, Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Acinetobacter sp. en el quirófano A (Cátedra de Anestesiología y Cirugía Estomatológica, Facultad de Odontología, Universidad de Los Andes), se realizó un análisis bacteriológico a muestras obtenidas por hisopado de la agarradera de lámpara, manguera de succión, brazo de unidad y rejilla de ventilación; y a una del ambiente obtenida con una placa de agar Tripticasa Soya con Lecitina y Tween 80 abierta sobre la bandeja de instrumentos, antes e inmediatamente después de tres procedimientos quirúrgicos, en días diferentes. Se cuantificó y evaluó la carga bacteriana. Las bacterias recuperadas fueron identificadas por técnicas microbiológicas convencionales. Se encontraron cargas bacterianas no satisfactorias, además de recuperarse tres de los patógenos investigados. Las cargas bacterianas elevadas indican un ambiente inadecuado para actividades quirúrgicas, sugieren deficiencias en las normas de desinfección ambiental manejadas y reflejan la necesidad de implementar programas de monitoreo bacteriológico del ambiente en áreas clínicas odontológicas

Outbreak of infection with Acinetobacter strain RUH 1139 in an intensive care unit.

OBJECTIVE: To investigate a nosocomial outbreak of infection with Acinetobacter strain RUH 1139, in the unit of high neonatal risk at University Hospital of The Andes (Merida, Venezuela). METHODS: Twenty-eight Acinetobacter strains were detected by biochemical testing and further identified to the species level by examination of the gene encoding 16S ribosomal DNA, using restriction analysis and gene sequencing. The epidemiological relationship between the strains was established by means of repetitive extragenic palindromic polymerase chain reaction (REP-PCR) and pulsed-field gel electrophoresis (PFGE), and antimicrobial susceptibilities were determined by disk diffusion. RESULTS: The spread of an epidemic strain of Acinetobacter RUH 1139 among 16 patients over a period of 3 months was demonstrated using antimicrobial susceptibility testing, PFGE, and REP-PCR. The epidemic strain was also isolated in 2 of the sampled parenteral nutrition solutions. All the patients involved in the infection outbreak had received parenteral solution. Moreover, strains of Acinetobacter RUH 1139 with another PFGE pattern and of A. baumannii were sporadically isolated before and during the outbreak. CONCLUSION: This is the first description of an outbreak of infection with this genospecies of Acinetobacter in which parenteral nutrition solution was potentially the infection source.

Flora vaginal en pacientes que asisten a consulta ginecológica / Vaginal flora in patients attended at the gynecological consults

El presente trabajo tuvo como objetivo determinar la frecuencia de Vaginosis Bacteriana (VB) y otros tipos de flora vaginal alterada en mujeres sexualmente activas que acuden a la consulta ginecológica del Instituto de Prevención y Asistencia Social del Ministerio de Educación (IPASME), Estado Mérida, y la frecuencia de microorganismos aeróbicos como agentes etiológicos de dichas infecciones, así como establecer la relación de algunas variables clínicas y microbiológicas con los diferentes tipos de flora vaginal. Se estudiaron 136 pacientes entre febrero del 2002 y noviembre del 2003. El diagnóstico clínico y microbiológico de VB y de otro tipo de flora vaginal, se realizó mediante los criterios de Amsel, y mediante la evaluación, según los criterios de Nugent y Donders, del extendido teñido con la coloración de Gram. La identificación de los microorganismos se realizó siguiendo la metodología convencional. El análisis estadístico se realizó mediante el programa computarizado Statistical Package for Social Sciences (SPSS) versión 10 para determinar el chi cuadrado. De las 136 pacientes, 34 (25 por ciento) presentaron flora vaginal normal y 102 (75 por ciento) flora vaginal alterada (VB en 25 por ciento, vaginitis aeróbica (VA) en 13.2 por ciento, candidosis vulvo-vaginal 11 por ciento y vaginosis citolítica (VC) 25.7 por ciento). Se encontró una relación estadísticamente significativa (p< 0,05) entre la VB y los criterios de Amsel. El extendido de la secreción vaginal, teñido con la coloración de Gram confirmó el diagnóstico de VB y la diferenció de VA. Gardnerella vaginalis fue el microorganismo más frecuentemente aislado de las pacientes con VB, mientras que Streptococcus grupo B, Escherichia coli y Staphylococcus aureus fueron más frecuentes en pacientes con VA. Para el tratamiento adecuado de las pacientes con dichas infecciones es importante realizar, además del examen clínco, el examen directo de la secreción vaginal teñido con la colaración de Gram

Factores de virulencia asociados a la enteropatogenicidad en cepas de Aeromonas spp. aisladas de niños con diarrea en Mérida, Venezuela / Factors of virulence associated with entero-pathogenicity in strains of Aeromonas spp isolated from children with diarrhea in Mérida, Venezuela

Se estudiaron las heces de 397 pacientes con enfermedad diarreica aguda, y las de 121 pacientes sin diarrea que conformaron el grupo control , en el estado de Mérida, Venezuela , entre junio de 1993 y diciembre de 1994. El género Aeromonas fue identificado en los pacientes con enfermedad diarreica aguda en 11,83 por ciento y 5,78 por ciento se identificó en los pacientes del grupo control. Al estudiar los factores de virulencia descritos para Aeromonas (enterotoxina, citotoxina, hemaglutininas, hidrofobicidad celular y actividad hemolítica) en las cepas aisladas, se detectó que todas poseían al menos uno de los factores investigados asociados a la enteropatogenicidad. De las especies aisladas, Aeromonas caviae resultó ser la que se identificó con mayor frecuencia. Todos estos resultados sugieren que las especies de Aeromonas son patógenos entéricos potenciales en esta población

Factores de virulencia asociados a la enteropatogenicidad en cepas de Aeromonas spp. aisladas de niños con diarrea en Mérida, Venezuela / Factors of virulence associated with entero-pathogenicity in strains of Aeromonas spp isolated from children with diarrhea in Mérida, Venezuela

Se estudiaron las heces de 397 pacientes con enfermedad diarreica aguda, y las de 121 pacientes sin diarrea que conformaron el grupo control , en el estado de Mérida, Venezuela , entre junio de 1993 y diciembre de 1994. El género Aeromonas fue identificado en los pacientes con enfermedad diarreica aguda en 11,83 por ciento y 5,78 por ciento se identificó en los pacientes del grupo control. Al estudiar los factores de virulencia descritos para Aeromonas (enterotoxina, citotoxina, hemaglutininas, hidrofobicidad celular y actividad hemolítica) en las cepas aisladas, se detectó que todas poseían al menos uno de los factores investigados asociados a la enteropatogenicidad. De las especies aisladas, Aeromonas caviae resultó ser la que se identificó con mayor frecuencia. Todos estos resultados sugieren que las especies de Aeromonas son patógenos entéricos potenciales en esta población(AU)

[Factors of virulence associated with enteropathogenicity in strains of Aeromonas spp. isolated from children with diarrhea in Mérida, Venezuela]. / Factores de virulencia asociados a la enteropatogenicidad en cepas Aeromonas spp. aisladas de niños con diarrea en Mérida, Venezuela.

The feces of 397 patients with acute diarrheal disease (ADD) and of other 121 patients without diarrea (control group) were studied in the state of Mérida, Venezuela, from June 1993 to December 1994. The genus Aeromonas was identified in patients with ADD in 11.83% and in 5.78% of the patients from the control group. On studying the virulence factors described for Aeromonas (enterotoxin, cytotoxin, hemaglutinins, cellular hydrofibrosity, and hemolytic activity) in the isolated strains, it was detected that all presented at least one of the factors investigated associated with enteropathogenicity. Of the isolated species, Aeromonas caviae was the most frequently identified. All these results suggest that the Aeromonas species are potential enteric pathogens in this population.

Acinetobacter spp: aspectos microbiológicos, clínicos y epidemiológicos / Acinetobacter spp: microbiological, clinical and epidemiological aspects

Las especies de Acinetobacter se encuentran ampliamente diseminadas en la naturaleza, siendo el agua y el suelo sus principales nichos ecológicos. Se han aislado de numerosos focos y fuentes, incluyendo leche y sus derivados, aves de corral y comida congelada, además, de piel, conjuntiva, leche humana, garganta y uretra de sujetos sanos. A. baumannii es la especie más implicada en la colonización e infección hospitalaria de pacientes críticos o inmunosuprimidos, se ha aislado de una gran variedad de infecciones nosocomiales, incluyendo bacteriemia, meningitis secundarias a malformaciones congénitas o infecciones previas por otros microorganismos e infección del tracto urinario, pero su papel predominante es como agente causal de neumonía nosocomial, particularmente en pacientes con neumonía asociada a ventilación mecánica, recluidos en unidades de cuidados intensivos. Tales infecciones son, la mayoría de las veces, difíciles de tratar por la resistencia de estas bacterias a diversos antibióticos. Dada la importancia que ha adquirido este microorganismo, a nivel mundial, en los últimos años, se realizó esta revisión con aspectos relevantes de dicho género, tales como su ubicación taxonómica actual, epidemiología y su papel como patógeno nosocomial.

Infección por chlamydia trachomatis en embarazadas con complicaciones obstétricas / Chlamdia trachomatis infections in pregnancy with complications obstetrical

Las infecciones causadas por chlamydia trachomatis en la mujer pueden producir secuelas obstétricas serias durante el embarazo, así como en el recién nacido al pasar a través del canal de parto. Lo anterior, y que en Venezuela son pocos los estudios que se han realizados al respecto, motivó la realización del presente trabajo, con el objeto de determinar la frecuencia de infección cervical por chlamydia trachomatis en mujeres embarazadas con complicaciones obstétricas: ruptura prematura de membranas (RPM), amenaza de parto pretérmino (APP), y trabajo de parto pretérmino (TPP), así como, su relación con las características clínico-epidemiológicas de dichas pacientes. Se analizaron 60 muestras de hisopado endocervical, provenientes de mujeres embarazadas con dichas complicaciones, que acudieron al Servicio de Emergencia Obstétrica del Instituto Autónomo Hospital Universitario de Los Andes (IAHULA), durante el período abril-octubre 2000. Para la detección de chlamydia trachomatis se utilizó un equipo comercial de inmunofluorescencia directa (bioMERIEUX) siguiendo la metodología recomendada por los fabricantes. De las 60 muestras analizadas, 8 (13,33 por ciento) resultaron positivas para chlamydia trachomatis. El 75 por ciento de estas pacientes ingresaron con diagnóstico de APP, seguida de las complicaciones APP + RPM (25 por ciento). No se encontró relación entre la infección cervical por C. trachomatis y las características clínico-epidemiológicas de las pacientes; sin embargo, se pudo apreciar que la infección por C. trachomatis fue más frecuente en mujeres con bajas condiciones socioeconómicas, bajo nivel educativo y quienes iniciaron las relaciones sexuales a temprana edad