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Tsitol Genet ; 42(2): 10-5, 2008.
Artigo em Ucraniano | MEDLINE | ID: mdl-18630114

RESUMO

A cDNA combinatorial antibody library of mouse variable immunoglobulin fragments has been constructed from mice immunized with rhIFN-beta1b. For this purpose, cDNAS of immunoglobulin variable heavy (V(H)) and variable light (V(L)) chains genes amplified from splenocytes were joined with linker DNA to form ScFv's (single-chain Fv-antibodies). The obtained ScFv-DNA pool was cloned into a phagemid vector and used for Esherichia coli transformation. Using the phage display technique, bacterial clones producing single-chain antibodies specific to rhIFN-beta1b were selected. The following characteristics of the combinatorial library were determined in this work: abundance, functional size, and the initial ScFv-DNA diversity in the library constructed. High specificity of interaction between phage displayed ScFv's and rhIFN-beta1b has been demonstrated.


Assuntos
Biblioteca Gênica , Fragmentos de Imunoglobulinas/genética , Cadeias Pesadas de Imunoglobulinas/genética , Cadeias Leves de Imunoglobulina/genética , Região Variável de Imunoglobulina/genética , Interferon beta/imunologia , Animais , Clonagem Molecular , Técnicas de Química Combinatória , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Escherichia coli/genética , Feminino , Humanos , Immunoblotting , Fragmentos de Imunoglobulinas/biossíntese , Fragmentos de Imunoglobulinas/imunologia , Cadeias Pesadas de Imunoglobulinas/biossíntese , Cadeias Pesadas de Imunoglobulinas/imunologia , Cadeias Leves de Imunoglobulina/biossíntese , Cadeias Leves de Imunoglobulina/imunologia , Região Variável de Imunoglobulina/biossíntese , Região Variável de Imunoglobulina/imunologia , Interferon beta-1b , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C
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