Effects of Brazilian green propolis extract on planktonic cells and biofilms of multidrug-resistant strains of Klebsiella pneumoniae and Pseudomonas aeruginosa.

Propolis could represent an alternative therapeutic agent for targeting multidrug-resistant bacteria due to its antimicrobial potential. The effect of Brazilian green propolis (BGP) aqueous extract (AqExt) was evaluated on eight multidrug-resistant clinical strains of Klebsiella pneumoniae and Pseudomonas aeruginosa, as well as on one reference strain for each bacterial species. The minimum bactericidal concentration (MBC) was determined and optimal concentrations were further evaluated in comparison with 0.12% chlorhexidine. The natural extract was chemically characterized by HPLC-DAD analysis. The MBC values ranged between 3.12 and 27.5 mg ml-1. Analysis of bacterial metabolic activity after treatment for 5 min with BGP-AqExt revealed a strong antimicrobial potential, similar to chlorhexidine. The extract comprised several active compounds including quercetin, gallic acid, caffeic and p-coumaric acid, drupani, galangin, and artepillin C. Altogether, the findings suggest that BGP-AqExt is fast and effective against multidrug-resistant strains of K. pneumoniae and P. aeruginosa in planktonic cultures and biofilms.

Schinus terebinthifolius (Brazilian Peppertree) extract used as antifungal to control Candida spp. in planktonic cultures and biofilms / Extrato de Schinus terebinthifolius (pimenta rosa) utilizado como antifúngico para controlar Candida spp. em culturas planctônicas e biofilmes

Objective: The use of medicinal plants may be an alternative method for the control of Candida spp. Responsible for human infections. This study evaluated the antifungal effect of Schinus terebinthifolius extract (Brazilian Peppertree) on C. albicans, C. dubliniensis, C. glabrata, and C. krusei planktonic cultures and bio films. Material and Methods: Minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungal concentration (MFC) of the plant extract were determined by the broth microdilution method. Biofilms formed in microplate wells were exposed to the extract for 5 min (50, 100 and 200 mg/mL) or 24 h (25, 50 and 100 mg/mL). After determination of colony-forming units per milliliter (CFU/mL), the data were analyzed by one-way ANOVA and Tukey's Test (P ≤ 0.05). Results: Different MIC (mg/mL) were found, such as 0.39 (C. dubliniensis), 1.56 (C. albicans), and 3.13 (C. glabrata and C. krusei). Besides, MFC (mg/mL) of 0.78 (C. dubliniensis) and 3.13 (C. albicans, C. glabrata and C. krusei) were also observed. Regarding the biofilms, significant reductions (log10) were found after 5 min and 24 h exposure to the plant extract, compared to the control group. However, C. dubliniensis was significantly affected only in 24 h treatment. Conclusion: S. terebinthifolius extract presented a significant antifungal effect on C. albicans, C. dubliniensis, C. glabrata, and C. Krusei both in planktonic cultures and biofilms (AU)

Objetivo: O uso de plantas medicinais pode ser um método alternativo para o controle de Candida spp. responsáveis por infecções humanas. Este estudo avaliou o efeito antifúngico do extrato de Schinus terebinthifolius (pimenta rosa) sobre culturas planctônicas e biofilmes de C. albicans, C. dubliniensis, C. glabrata e C. krusei. Material e Métodos: Concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM) do extrato vegetal foram determinadas pelo método de micro diluição em caldo. Biofilmes formados em poços de microplacas foram expostos ao extrato por 5 min (50, 100 e 200 mg/mL) ou 24 h (25, 50 e 100 mg/mL). Após determinação de unidades formadoras de colônias por mililitro (UFC/mL), os dados foram analisados por one-way ANOVA e Teste de Tukey (P ≤ 0,05). Resultados: Foram encontradas diferentes CIM (mg/mL), como 0,39 (C. dubliniensis),1,56 (C. albicans) e 3,13 (C. glabrata e C. krusei). Além disso, CFM (mg/mL) de 0,78 (C. dubliniensis) e 3,13 (C. albicans, C. glabrata e C. krusei) também foram observadas. Em relação aos biofilmes, foram encontradas reduções significativas (log10) após 5 min e 24 h de exposição ao extrato vegetal, em comparação ao grupo controle. No entanto, C. dubliniensis foi significativamente afetada apenas no tratamento de 24 h. Conclusão: O extrato de S. terebinthifolius apresentou efeito antifúngico significativo sobre C. albicans, C. dubliniensis, C. glabrata e C. Krusei, tanto em culturas planctônicas quanto em biofilmes. (AU)

Total protein level reduction of odontopathogens biofilms by Rosmarinus officinalis L. (rosemary) extract: an analysis on Candida albicans and Streptococcus mutans / Redução do nível de proteína total de biofilmes de odontopatógenos por extrato de Rosmarinus officinalis L. (alecrim): uma análise sobre Candida albicans e Streptococcus mutans

Objective: The resistance of fungi and bacteria to the available antimicrobials has increased and the development of alternative products to control them has become a very requirement. The use of plant products could be a viable option due to the efficacy, viability, and availability they present. Thereby, this study evaluated the effect of R. officinalis L. extract on C. albicans and S. mutans biofilms, by the total protein level analysis presented by the microorganisms. Material and Methods: For this purpose, monomicrobial biofilms were formed for 48 h and exposed to the R. officinalis L. extract for 5 min. Then, total protein quantification was performed by Lowry method. Results: The analysis showed significant total protein reduction of the biofilms after exposure to the plant extract, with 39 ± 11%, for C. albicans, and 32 ± 11%, for S. mutans. Conclusion: R. officinalis L. extract decreased the total protein level in both biofilms. Thus, C. albicans and S. mutans protein composition could be a target for action of antimicrobial agents. (AU)

Objetivo: A resistência de fungos e bactérias aos antimicrobianos disponíveis tem se elevado e o desenvolvimento de produtos alternativos para controlar micróbios tem se tornado uma necessidade real. A utilização de produtos de origem vegetal poderia ser uma opção viável, devido à eficácia, viabilidade e disponibilidade que apresentam. Sendo assim, este estudo avaliou o efeito do extrato de R. officinalis L. (alecrim) sobre biofilmes de C. albicans and S. mutans, analisando o nível de proteína total apresentada pelos micro-organismos. Material e Métodos: Para tanto, biofilmes monomicrobianos foram formados por 48 h e expostos ao extrato de R. officinalis L. por 5 min. Então, a quantificação de proteína total foi realizada por método de Lowry. Resultados: A análise demonstrou reduções significativas de proteína total de cada biofilme após exposição ao extrato, sendo 39 ± 11% no biofilme de C. albicans e 32 ± 11%, no caso de S. mutans. Conclusão: O extrato de R. officinalis L. diminuiu o nível de proteína total em ambos os biofilmes. Com isso, a composição proteica de C. albicans e S. mutans poderia ser um alvo para ação de agentes antimicrobianos. (AU)

Assessment of Candida SPP. proliferation in occlusal and palatal splints / Avaliação da proliferação Candida SPP. em placas oclusais e palatais

Candida species inhabit the oral cavity of all individuals who wear complete denture and whose material is the same as that used in splints. Assess the growth of C. albicans in occlusal and palatal splints used for treatment of TMD so that the potential risks of oral microbiota can be assessed. The growth of Candida spp. was assessed in the saliva of 27 individuals wearing splints for treatment of TMD. They were divided into two groups: G1 (n = 14), individuals wearing occlusal splint; and G2 (n = 13), individuals wearing palatal splint. Saliva samples were collected during placement of the splints (T1) and after 4 months (T2), being stored in PBS (10 mL) after 60-second rinses. It was observed that patients wearing occlusal splints (G1) had an increase of 0.648 CFU/mL (Log 10), with statistically significant differences (P = 0.043) for C. albicans (42.33%), C. glabrata (5.52%), C. krusei (41.72%) and C. tropicalis (10.43%). In the group of patients wearing palatal splints (G2), there was a decrease of 0.101 CFU/mL (Log 10), was observed with (P = 0.964) only the presence of C. albicans. The results suggest that growth of Candida species was greater in patients wearing occlusal splints compared to those wearing palatal ones as the presence of different yeast species was found in the former.

Espécies de Candida habitam a cavidade oral de 60-100% de indivíduos usuários de prótese total, cujo material é o mesmo utilizado em placas miorrelaxante. Avaliar o crescimento de C. albicans. em placas relaxantes musculares oclusais e palatais, usadas para o tratamento de DTM, na intenção de verificar riscos em potencial à microbiota bucal. Avaliou-se o crescimento de Candida spp. na saliva de 27 indivíduos, usuários de placa miorrelaxante, em tratamento para DTM no ICT-UNESP. Os indivíduos foram divididos em dois grupos: G1(n=14) ­ placa com recobrimento oclusal; e G2 (n=13) ­ sem recobrimento. As coletas foram com PBS (10mL), em bochechos por 60seg, na instalação das placas (T1) e após 4 meses (T2). Observou-se que pacientes usuários da placa miorrelaxante com recobrimento oclusal (grupo G1) apresentaram aumento de 0,648 UFC/mL (Log10) com diferença estatisticamente significante (p=0,043) analisando-se 42,33% C. albicans, 5,52% C. glabrata, 41,72% C. krusei e 10,43% C. tropicalis. No grupo de pacientes que utilizaram a placa sem recobrimento (grupo G2), observou-se diminuição de 0,101 UFC/mL (Log10) com (p=0,954) apresentando apenas C. albicans. Os resultados sugerem que os pacientes que fizeram uso de placa miorrelaxante com recobrimento oclusal apresentaram maior crescimento de Candida spp. em relação aos usuários de placa sem recobrimento, verificando-se a presença de diferentes espécies da levedura.

Are Desensitizing Toothpastes Equally Biocompatible and Effective Against Microorganisms?

The aims of this study were evaluate cytotoxicity, genotoxicity, antimicrobial activity of desensitizing toothpastes compared to a common one and the surface roughness of tooth enamel submitted to brushing with these toothpastes. Samples of three desensitizing toothpastes (Colgate Sensitive, Sensodyne and Oral B Sensitive) and common toothpaste (Colgate) were placed in contact with gingival human fibroblasts. Cytotoxicity and genotoxocity were measured by MTT assay and micronucleus test. Antimicrobial activity of the toothpastes extracts against C. albicans, S. mutans and S. aureus were assessed. For surface roughness evaluation, bovine teeth were submitted to 10.000 brushing cycles. The results were analyzed statically using Mann-Whitney U, ANOVA and Z tests (p<0.05). All toothpastes caused cytotoxic effect to the cells (p<0.05), except Colgate Sensitive. The toothpastes did not increase the number of micronuclei compared to the untreated control group. Colgate eliminated all the evaluated microorganisms at lower concentrations compared to Colgate Sensitive and Oral B Sensitive, which were not able to eliminate S. aureus. Sensodyne did not reach the minimum microbicidal concentration. The surface roughness of tooth enamel increased after brushing with Colgate Sensitive and Oral B Sensitive, however the comparison between groups showed no difference on the enamel surface roughness presented by desensitizing toothpastes when compared with the common one (p>0.05). Based on these results, we can conclude that although none toothpaste has induced genotoxicity, Colgate Sensitive was also not cytotoxic. Colgate was the most effective against the microorganisms, and there were no differences on the enamel surface roughness between the groups.

Are Desensitizing Toothpastes Equally Biocompatible and Effective Against Microorganisms?

Abstract The aims of this study were evaluate cytotoxicity, genotoxicity, antimicrobial activity of desensitizing toothpastes compared to a common one and the surface roughness of tooth enamel submitted to brushing with these toothpastes. Samples of three desensitizing toothpastes (Colgate Sensitive, Sensodyne and Oral B Sensitive) and common toothpaste (Colgate) were placed in contact with gingival human fibroblasts. Cytotoxicity and genotoxocity were measured by MTT assay and micronucleus test. Antimicrobial activity of the toothpastes extracts against C. albicans, S. mutans and S. aureus were assessed. For surface roughness evaluation, bovine teeth were submitted to 10.000 brushing cycles. The results were analyzed statically using Mann-Whitney U, ANOVA and Z tests (p<0.05). All toothpastes caused cytotoxic effect to the cells (p<0.05), except Colgate Sensitive. The toothpastes did not increase the number of micronuclei compared to the untreated control group. Colgate eliminated all the evaluated microorganisms at lower concentrations compared to Colgate Sensitive and Oral B Sensitive, which were not able to eliminate S. aureus. Sensodyne did not reach the minimum microbicidal concentration. The surface roughness of tooth enamel increased after brushing with Colgate Sensitive and Oral B Sensitive, however the comparison between groups showed no difference on the enamel surface roughness presented by desensitizing toothpastes when compared with the common one (p>0.05). Based on these results, we can conclude that although none toothpaste has induced genotoxicity, Colgate Sensitive was also not cytotoxic. Colgate was the most effective against the microorganisms, and there were no differences on the enamel surface roughness between the groups.

Resumo Os objetivos desse estudo foram avaliar a citotoxicidade, genotoxicidade, atividade antimicrobiana de dentifrícios dessensibilizantes em comparação com um comum e também a rugosidade superficial do esmalte dentário submetido à escovação com esses dentifrícios. Amostras de três dentifrícios dessensibilizantes (Colgate Sensitive, Sensodyne e Oral B Sensitive) e um dentifrício comum (Colgate) foram colocadas em contato com fibroblastos gengivais humanos e a citotoxicidade e genotoxidade foram mensuradas pelo ensaio MTT e teste do micronúcleo. A atividade antimicrobiana dos extratos dos dentifrícios contra C. albicans, S. mutans e S. aureus foi determinada. Para a avaliação da rugosidade superficial, espécimes de dentes bovinos foram submetidas à 10.000 ciclos de escovação. Os resultados foram analisados estatisticamente usando os testes Mann-Whitney U, ANOVA e Teste Z (P<0,05). Todos os dentifrícios causaram efeito citotóxico às células (P<0,05), exceto o Colgate Sensitive. Os dentifrícios não aumentaram o número de micronúcleos em comparação com o grupo não tratado. O Colgate foi capaz de eliminar todos os microorganismos avaliados em concentrações mais baixas em comparação com Colgate Sensitive e Oral B Sensitive, que não foram capazes de eliminar os S. aureus. O Sensodyne não atingiu a concentração microbicida mínima para qualquer microorganismo. A rugosidade superficial do esmalte dentário aumentou após a escovação com Colgate Sensitive e Oral B Sensitive, porém a comparação entre os grupos não mostrou diferença na rugosidade superficial do esmalte apresentada por dentifrícios dessensibilizantes quando comparados ao comum (p>0,05). Com base nesses resultados, podemos concluir que, embora nenhum dentifrício tenha induzido genotoxicidade, o Colgate Sensitive também não foi citotóxico. O Colgate foi o mais eficaz contra os microorganismos, e não houve diferença na rugosidade superficial do esmalte entre os grupos.

Anticoagulant effects of phytotherapeutic drugs and their importance in surgical dental procedures / Efeitos anticoagulantes de drogas fitoterapicas e sua importância em procedimentos odontológicos cirúrgicos

ABSTRACT Phytotherapeutic drugs are plant-derived products with medicinal properties. They are used for treating or preventing several diseases. However, patients who use these substances and even health professionals are unaware of their negative effects. One of the most common negative effects of phytotherapeutic drugs reported in the literature is the inhibition of natural coagulation factors in the human body. Therefore, the aim of this study was to perform a brief review of the literature concerning the anticoagulant effects of phytotherapeutic drugs and their importance in surgical dental procedures. Preventive measures, clarification and monitoring of patients taking phytotherapeutic drugs are recommended before performing surgical dental procedures, in order to prevent against complications such as hemorrhage.

RESUMO Fitoterápicos são produtos derivados de plantas com propriedades medicinais. Eles são utilizados para o tratamento ou a prevenção de diversas doenças. No entanto, os pacientes que fazem uso destas substâncias, na sua grande maioria, desconhecem seus efeitos negativos. Portanto, o objetivo deste estudo foi realizar uma breve revisão de literatura sobre os efeitos anticoagulantes de fitoterápicos e sua importância diante da realização de procedimentos odontológicos cirúrgicos. Medidas de prevenção, esclarecimento e acompanhamento de pacientes que se utilizam destes medicamentos são recomendados antes da realização destes procedimentos a fim de prevenir complicações como processos hemorrágicos.

Extrato de Rosmarinus Officinalis l. (Alecrim) reduz a viabilidade de biofilmes de interesse para saúde bucal / Rosmarinus officinalis l. (Rosemary) extract decreases the biofilms viability of oral health interest

Objetivo: No presente estudo foi avaliado o efeito do extrato de alecrim sobre a viabilidade de biofilmes monomicrobianos de Candida albicans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans e Pseudomonas aeruginosa, bem como, sobre biofilmes polimicrobianos de C. albicans associada com S. aureus, E. faecalis, S. mutans ou P. aeruginosa. Material e métodos: Em placa de microtitulação foram formados os biofilmes mono e polimicrobianos por 48 h. Em seguida, foram expostos por 5 min ao extrato de alecrim (200 mg/mL). Solução salina (NaCl 0,9%) foi utilizada como controle. Após, foram realizadas lavagens com salina para remoção de células não aderidas. Para verificação da viabilidade dos biofilmes, após o tratamento, foi aplicado o teste colorimétrico MTT. A absorbância dos poços foi lida em espectrofotômetro de microplacas (570 nm) e os dados foram convertidos em percentual de redução e analisados estatisticamente por ANOVA e Tukey Test (P ≤ 0,05). Resultados: Após aplicação do extrato de alecrim, com exceção do biofilme de E. faecalis, foram observadas reduções significativas da viabilidade dos biofilmes monomicrobianos e polimicrobianos. Conclusão: Biofilmes monomicrobianos de C. albicans, S. aureus, S. mutans e P. aeruginosa, foram afetados pelo extrato de alecrim, bem como, os biofilmes polimicrobianos de C. albicans associada com S. aureus, E. faecalis, S. mutans ou P. aeruginosa em biofilmes polimicrobianos, apresentando significativas reduções de viabilidade.(AU)

Objective: This study evaluated the effect of rosemary extract on Candida albicans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans and Pseudomonas aeruginosa monomicrobial biofilms viability, as well as on C. albicans associated with S. aureus, E. faecalis, S. mutans or P. aeruginosa in polymicrobial biofilms. Material and Methods: In microtiter plate, mono- and polymicrobial biofilms for 48 h were formed. Then, they were exposed for 5 min to rosemary extract (200 mg/mL). Saline (0.9% NaCl) was used as control. After, washes were done with saline to remove the non-adhered cells. Biofilm viability was checked by MTT colorimetric assay, after treatment. Absorbance of the wells was read in microplate spectrophotometer (570 nm) and data were converted to reduction percentage and statistically analyzed by ANOVA and Tukey test (P ≤ 0.05). Results: After application of rosemary extract, with exception of the E. faecalis biofilm, significant reductions in mono- and polymicrobial biofilms viability were observed. Conclusion: C. albicans, S. aureus, S. mutans and P. aeruginosa monomicrobial biofilms were affected by rosemary extract, as well as C. albicans associated with S. aureus, E. faecalis, S. mutans or P. aeruginosa in polymicrobial biofilms, presenting significant viability reductions. (AU)

Avaliação de atividades biológicas dos extratos de Rosmarinus officinalis L. (alecrim) e Thymus vulgaris L. (tomilho) / Assessment of biological activities of Rosmarinus officinalis L. (rosemary) and Thymus vulgaris L. (thyme) extracts

No presente estudo foram avaliadas algumas atividades biológicas dos extratos de R. officinalis L. (alecrim) e T. vulgaris L. (tomilho), verificando:I. Atividade antimicrobiana sobre biofilmes monomicrobianos de Candida albicans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans e Pseudomonas aeruginosa e associações de C. albicans com cada uma destas bactérias, após determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração microbicida mínima (CMM) sobre culturas planctônicas destes micro-organismos; II. Viabilidade celular sobre macrófagos de camundongo (RAW 264.7), fibroblastos gengivais humanos (FMM-1), linhagem tumoral de carcinoma mamário (MCF-7) e linhagem tumoral de carcinoma cervical (HeLa); III. Atividade antiinflamatória sobre RAW 264.7 estimulada por lipopolissacarídeo (LPS) de Escherichia coli; e IV. Atividade genotóxica. Após verificação da capacidade antimicrobiana dos extratos, por método de microdiluição em caldo, as concentrações mais efetivas foram aplicadas nos demais testes.Sobre os biofilmes mono e polimicrobianos, formados por 48 h em poços de placa de microtitulação, a ação dos extratos foi analisada após exposição de 5 min, com quantificação de UFC/mL e analise de suaviabilidade. Da mesma forma, sobre as linhagens celulares (RAW 264.7,FMM-1, MCF-7 e HeLa), cultivadas por 24 h em placas de microtitulação,os extratos foram analisados com os ensaios de MTT, vermelho neutro(VN) e cristal violeta (CV). Foi analisado o efeito anti-inflamatório dos extratos com ensaio imunoenzimático ELISA, pela quantificação de citocinas pró-inflamatórias (TNF-α e IL-1β). A genotoxicidade dos extratos foi verificada pela frequência de micronúcleos (MN) formados em 1000 células. Os resultados foram analisados por T-Test ou ANOVA e Tukey Test (p ≤ 0,05). Em relação ao extrato de R. officinalis L. foi observada redução significativa de todos os biofilmes após exposição de 5 min, bem como, redução de sua viabilidade.Quanto às células, ...

This study performed some biological activities of R. officinalis L.(rosemary) and T. vulgaris L. (thyme) extracts, such as: I. Antimicrobial activity on monomicrobial biofilms of Candida albicans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans and Pseudomonas aeruginosa and C. albicans association with each of these bacteria, after determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum microbicidal concentration (MMC) on planktonic cultures of these microorganisms; II. Cell viability on mouse macrophages (RAW 264.7),human gingival fibroblasts (FMM-1), human breast carcinoma cells (MCF-7) and cervical carcinoma cells (HeLa); III. Anti-inflammatory activity on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7; and IV. Genotoxic activity. After checking the antimicrobial capacity of the extracts by broth microdilution method, the most effective concentrations were applied in the other tests. On mono- and polymicrobial biofilms formed by 48 h in microtitre plate wells, the action of the extracts was analyzed after 5 min exposure, with counting of CFU/mL and analysis of their viability. Likewise, in the cell lines (RAW 264.7, FMM-1, MCF-7 and HeLa cells) cultured for 24 h in microtitre plates, the extracts were analyzed by MTT, neutral red (NR) and crystal violet (CV) assays. By ELISA assay, anti-inflammatory effect of the extracts was analyzed with quantification of pro inflammatory cytokines (TNF-α and IL-1β). The genotoxicity of the extracts was verifiedby the micronuclei frequency (MN) formed in 1000 cells. The results were analyzed by T-Test or ANOVA and Tukey test (p ≤ 0.05). Regarding the R.officinalis L. extract was observed significant reduction of all biofilms after 5 min of exposure, as well as reduction their viability. Additionally, cellviability above 50% to ≤ 50 mg/mL was observed on lineages. The IL-1βlevel did not change with the concentrations of the extract, but when RAW 264.7 was stimulated by LPS ...

Avaliação de atividades biológicas dos extratos de Rosmarinus officinalis L. (alecrim) e Thymus vulgaris L. (tomilho) / Assessment of biological activities of Rosmarinus officinalis L. (rosemary) and Thymus vulgaris L. (thyme) extracts

No presente estudo foram avaliadas algumas atividades biológicas dos extratos de R. officinalis L. (alecrim) e T. vulgaris L. (tomilho), verificando:I. Atividade antimicrobiana sobre biofilmes monomicrobianos de Candida albicans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans e Pseudomonas aeruginosa e associações de C. albicans com cada uma destas bactérias, após determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração microbicida mínima (CMM) sobre culturas planctônicas destes micro-organismos; II. Viabilidade celular sobre macrófagos de camundongo (RAW 264.7), fibroblastos gengivais humanos (FMM-1), linhagem tumoral de carcinoma mamário (MCF-7) e linhagem tumoral de carcinoma cervical (HeLa); III. Atividade antiinflamatória sobre RAW 264.7 estimulada por lipopolissacarídeo (LPS) de Escherichia coli; e IV. Atividade genotóxica. Após verificação da capacidade antimicrobiana dos extratos, por método de microdiluição em caldo, as concentrações mais efetivas foram aplicadas nos demais testes.Sobre os biofilmes mono e polimicrobianos, formados por 48 h em poços de placa de microtitulação, a ação dos extratos foi analisada após exposição de 5 min, com quantificação de UFC/mL e analise de suaviabilidade. Da mesma forma, sobre as linhagens celulares (RAW 264.7,FMM-1, MCF-7 e HeLa), cultivadas por 24 h em placas de microtitulação,os extratos foram analisados com os ensaios de MTT, vermelho neutro(VN) e cristal violeta (CV). Foi analisado o efeito anti-inflamatório dos extratos com ensaio imunoenzimático ELISA, pela quantificação de citocinas pró-inflamatórias (TNF-α e IL-1β). A genotoxicidade dos extratos foi verificada pela frequência de micronúcleos (MN) formados em 1000 células. Os resultados foram analisados por T-Test ou ANOVA e Tukey Test (p ≤ 0,05). Em relação ao extrato de R. officinalis L. foi observada redução significativa de todos os biofilmes após exposição de 5 min, bem como, redução de sua viabilidade.Quanto às células...

This study performed some biological activities of R. officinalis L.(rosemary) and T. vulgaris L. (thyme) extracts, such as: I. Antimicrobial activity on monomicrobial biofilms of Candida albicans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans and Pseudomonas aeruginosa and C. albicans association with each of these bacteria, after determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum microbicidal concentration (MMC) on planktonic cultures of these microorganisms; II. Cell viability on mouse macrophages (RAW 264.7),human gingival fibroblasts (FMM-1), human breast carcinoma cells (MCF-7) and cervical carcinoma cells (HeLa); III. Anti-inflammatory activity on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7; and IV. Genotoxic activity. After checking the antimicrobial capacity of the extracts by broth microdilution method, the most effective concentrations were applied in the other tests. On mono- and polymicrobial biofilms formed by 48 h in microtitre plate wells, the action of the extracts was analyzed after 5 min exposure, with counting of CFU/mL and analysis of their viability. Likewise, in the cell lines (RAW 264.7, FMM-1, MCF-7 and HeLa cells) cultured for 24 h in microtitre plates, the extracts were analyzed by MTT, neutral red (NR) and crystal violet (CV) assays. By ELISA assay, anti-inflammatory effect of the extracts was analyzed with quantification of pro inflammatory cytokines (TNF-α and IL-1β). The genotoxicity of the extracts was verifiedby the micronuclei frequency (MN) formed in 1000 cells. The results were analyzed by T-Test or ANOVA and Tukey test (p ≤ 0.05). Regarding the R.officinalis L. extract was observed significant reduction of all biofilms after 5 min of exposure, as well as reduction their viability. Additionally, cellviability above 50% to ≤ 50 mg/mL was observed on lineages. The IL-1βlevel did not change with the concentrations of the extract, but when RAW 264.7 was stimulated by LPS...

Antifungal effect of plant extracts on Candida albicans biofilm on acrylic resin / Efeito antifúngico de extratos vegetais sobre biofilme de Candida albicans em resina acrílica

Objetivo: Avaliar potencial antifúngico dos extratos de Equisetum arvense L. (cavalinha), Glycyrrhiza glabra L. (alcaçuz), Punica granatum L. (romã) e Stryphnodendron barbati-mam Mart. (barbatimão) sobre biofilme de Candida albicans em resina acrílica. Material e métodos: Cepa-padrão de C. albicans foi cultivada em ágar Sabouraud-dextrose por 24 h a 37°C. Após padronização do inóculo (106 células/mL) em espectrofotômetro, foram mantidos em caldo Brain Heart Infusion suplementado comsacarose (5%) um disco de resina acrílica estéril com 100 μL do inóculo padronizado, por 5 dias a 37 °C. As amostras dos grupos tratados (n = 10) foram expostas separadamente à concentração de 50 mg/mL de cada extrato por 5 min e ao antifúngico nistatina (48.83 UI/mL). Para o grupo não tratado (controle, n = 10) foi utilizada solução fisiológica estéril (NaCl 0,9%). Os biofilmes foram desagregados dos discos de resina acrílica por homogeneizador ultrassônico por 30 s. Após diluições decimais, foram feitas semeaduras em placas de Sabouraud-dextrose e incubação por 48 h a 37 ºC. Posteriormente, foram contadas as UFC/mL e os valores foram convertidos em log10 e realizada análise estatística (ANOVA e Tukey Test; p ≤ 0,05). Resultados: Todos os extratos naturais e a nistatina proporcionaram reduções significativas (p < 0,01) do biofilme de C. albicans em comparação ao grupo controle (NaCl 0,9%), no entanto, não houve diferença estatística entre os extratos (p = 0,1567). Conclusões: Houve formação de biofilme de C. albicans em resina acrílica e todos os extratos vegetais foram efetivos para esta levedura, atuando semelhantemente à nistatina.

Objective: Evaluating the antifungal potential of Equisetum arvense L. (horsetail), Glycyrrhiza glabra L. (licorice), Punica granatum L. (pomegranate) and Stryphnodendron barbatimam Mart. (barbatimão) extracts, after Candida albicans biofilm formation on acrylic resin. Material and methods: C. albicans standard strain was cultured on Sabourauddextrose agar for 24 h at 37 °C. After standardized in a spectrophotometer, 100 μL of the inoculums (106 cells/mL) and a sterile acrylic resin disc were maintained in Brain Heart Infusion broth supplemented with sucrose (5%), for 5 days at 37ºC. The samples of the treated groups (n = 10) were separately exposed to a concentration of 50 mg/mL of each extract for 5 minutes or to nystatin (48.83 IU/mL). For the untreated group (control, n = 10), it was used sterile saline (0.9% NaCl). Biofilms were disaggregated from the acrylic resin discs by an ultrasonic homogenizer for 30 s. After decimal dilutions, sowings in Sabouraud-dextrose plates were made with incubation for 48 h at 37°C. Later, CFU/mL was verified and the values were converted to log10 and they had their statistical analysis done (ANOVA and Tukey Test, p ≤ 0.05). Results: It was found that all plant extracts and nystatin resulted in significant reduction of C. albicans biofilm (p < 0.01) compared to the control group (0.9% NaCl). However, all of them showed similar reductions to each other (p = 0.1567). Conclusion: There was biofilm formation of C. albicans on acrylic resin and all plant extracts were effective against this yeast, acting similarly to nystatin.

Ensaio de citotoxicidade de extratos naturais após determinação da concentração microbicida mínima para Staphylococcus spp., streptococcus mutans e candida spp / Cytotoxicity of natural extracts after determination of Minimum Microbicide Concentration for Staphylococcus spp., Streptococcus mutans and Candida spp

A proposta deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana e citotoxicidade dos extratos vegetais de Equisetum arvense L. (cavalinha), Glycyrrhiza glabra L. (alcaçuz), Punica granatum L. (romã) e Stryphnodendron barbatimam Mart. (barbatimão). A atividade antimicrobiana dos extratos vegetais foi analisada em cepas de Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans, Candida albicans, Candida glabrata e Candida tropicalis, sendo uma ATCC e nove clínicas, através do teste de micro diluição em caldo, contudo para se determinar a Concentração Microbicida Mínima (CMM) dos extratos foram feitas semeaduras do conteúdo dos poços das placas de microdiluição. A citotoxicidade das CMM dos extratos naturais foi verificada pelo método colorimétrico MTT e pela quantificação da produção de citocinas IL-1β e TNF-α pelo teste ELISA, para tanto, fora mutilizadas culturas celulares de macrófagos de camundongos (RAW264.7). Os resultados foram analisados estatisticamente pelo teste ANOVA complementado por Tukey, com significância de 5%. Para o extrato de cavalinha, romã e barbatimão foi determinada como CMM efetiva para todas as cepas a concentração de 50 mg/mL e para o extrato de alcaçuz 100 mg/mL. Quanto à citotoxicidade destas concentrações, pelo método MTT, foi observada redução significativa da viabilidade celular (p≤0,05), em relação ao grupo controle, para 48% no grupo tratado com cavalinha, 79% para alcaçuz, 76% para romã e 86% para barbatimão. Em relação à quantificação de IL-1β, os grupos tratados com extratos de alcaçuz e cavalinha exibiram semelhanças ao grupo controle(p≥0,05) com produção de 1,99 e 1,32 pg/mL respectivamente, contudo o grupo tratado com extrato de barbatimão produziu 3,98 pg/mL (p<0,05) e o grupo que recebeu tratamento com extrato de romã a produção foi de 7,72 pg/mL (p<0,01), diferindo significativamente do grupo controle (2,20pg/mL)...

The objective of this study was to verify the antimicrobial activity and cytotoxicity of Equisetum arvense L. (horsetail), Glycyrrhiza glabra L.(licorice), Punica granatum L. (pomegranate) and Stryphnodendron barbatimam Mart. (barbatimam) glycolic extracts. The antimicrobial activityof the extracts was analyzed in Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans, Candida albicans, Candida glabrata and Candida tropicalis strains, being one ATCC and nine clinics through the method of microdilution in broth according to NCCLS. It was realized sowing of the contents from the well of microdilution plate, after incubation,for determination of MMC of the natural extracts. The cytotoxicity of the extracts was evaluated for MTT assay, having as an experimental model cultivation of mice macrophages (RAW 264.7), and through the ELISAtest, for cytokyne quantification IL-1β and TNF-α produced by the cellular cultivation after a period of 24 hours exposed to the extracts MMC.The results were subordinated to statistical analisys (ANOVA and Turkeytest), with p≤0,05. Related to the antimicrobial activity, the natural extracts of horsetail, pomegranate and barbatimam eliminated all the strains to the concentration of 50 mg/mL and the natural extract of licorice promoted the eliimination of 100 mg/mL. Regarding to the cellular viability of the active MMC for the 100% of strains, it was observed meaningful reduction(p<0,01) in all the natural extracts compared to the control group, and, asa result, horsetail exhibited an average of 48%; licorice, 79%; pomegranate, 76%; e barbatimam, 86%. As the production of cytokyne the pomegranate extract presented production of IL-1β (7,72 pg/mL) significantly superior to the other groups, including the control (p<0,05). The barbatimam extract exhibited an intermediate average value of IL-1β(3,98 pg/mL), being statistically different of the other groups (p<0,01)...