Immunofluorescence and High-Resolution Microscopy Reveal New Insights in Human Globozoospermia.

Globozoospermia is a rare and severe type of teratozoospermia characterized by the presence of round-headed, acrosomeless spermatozoa with cytoskeleton defects. Current data support a negative relationship between globozoospermia and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) outcomes, revealing the need to perform exhaustive studies on this type of sperm disorder. The aim of this study was to evaluate different structural, functional and molecular sperm biomarkers in total globozoospermia with proper embryo development after ICSI. The combination of field-emission scanning electron microscopy (FE-SEM) and transmission electron microscopy (TEM) allowed us to identify and correlate eight morphological patterns with both types of microscopy. Additionally, results reported a high percentage of coiled forms, with cytoplasmic retentions around the head and midpiece. By fluorescent microscopy, we detected that most of the sperm showed tubulin in the terminal piece of the flagellum and less than 1% displayed tyrosine phosphorylation in the flagellum. Moreover, we did not detect chaperone Heat shock-related 70 kDa protein 2 (HSPA2) in 85% of the cells. Overall, these findings provide new insights into globozoospermia, which could have potential implications in improving sperm selection methods for assisted reproductive techniques.

Situación actual de la técnica time lapse en el laboratorio / Current status of time-lapse systems in the laboratory

El uso de los sistemas time lapse está cada vez más extendido en los laboratorios, se ha demostrado su utilidad a la hora de seleccionar mejor los embriones en combinación con la morfología, que hasta hoy era el método utilizado para realizar esta selección. Aunque existen autores que no están muy de acuerdo con esta afirmación, hay una gran mayoría que coincide en que la monitorización continua de los embriones ofrece una información relevante a la hora de elegir los mejores embriones de un cultivo. Durante los últimos años han surgido estudios avalando el uso de esta técnica, así se ha descrito que se puede conseguir elevar las tasas de embarazo y apostar con más fuerza por la transferencia de embrión único. Todo lo descrito en la literatura habla de resultados con patrones de división y los distintos estudios que validan esos modelos, pero ninguno nombra en profundidad las especificaciones propias de cada sistema, por tanto, el objetivo de este estudio ha sido el intentar resaltar las diferencias existentes entre las plataformas que se pueden encontrar en el mercado e indicar el futuro de cada una de ellas

The use of time-lapse systems is increasingly widespread in laboratories, it has proved useful in the selection of the best embryos when combined with their morphology, the traditional method used until now. Although there are some authors that disagree with this statement, a large majority agrees that the continuous monitorization of the embryos offers relevant information at the time of choosing the best embryos within a culture. In recent years there have been studies that support the use of this technique, and have proven that higher pregnancy rates can be achieved with its use, placing more emphasis on single embryo transfer. Everything published in the literature describes the results of with division patterns and the various studies that validate those models, but none provide an in-depth description of their specifications, thus the aim of this study was to highlight the differences between each of the platforms found on the market and indicate the predicted future of each of them

Análisis de la dinámica de la fragmentación de ADN en espermatozoides para la optimización de la Inseminación Artificial Intrauterina / Dynamic analysis of sperm DNA fragmentation for optimizing intrauterine artificial insemination

Introducción y Objetivos: De forma normal existe un porcentaje de espermatozoides con ADN fragmentado en el eyaculado. Sin embargo, la manipulación de las muestras de semen para R.A. puede aumentar el grado basal de fragmentación. Aunque los mecanismos de procesamiento del semen que pueden afectar a la fragmentación no son todavía conocidos, el objetivo es analizar la influencia del swim-up en la dinámica de fragmentación del ADN espermático a lo largo del tiempo en las mismas condiciones en las que se procesa el semen para IAC, y evaluar si la fragmentación del ADN espermático tras swim-up, así como su evolución en el tiempo puede predecir la posibilidad de gestación en IAC. Material y métodos: Las muestras de semen utilizadas se han obtenido de 25 parejas en tratamiento de IAC el mismo día de la Inseminación. La fragmentación del ADN se midió con el Kit Halosperm (SCD). Se empleó la T de Student para la comparación estática de medias entre ambos grupos y tests de regresión lineal, exponencial y logarítmica para el estudio dinámico. Resultados: En todo momento, dentro del intervalo estudiado, el índice de fragmentación del semen capacitado se mantiene significativamente inferior al del semen fresco. Conclusiones: Los resultados apoyan la idea de que la centrifugación que conlleva el swim-up no induce daño adicional en el ADN espermático y que es recomendable utilizar las muestras de semen post swimup para inseminación en un intervalo de una hora (AU)

Introduction: A certain level of damaged DNA is present in mature sperm cells after a natural ejaculation. Additionally, sperm management for artificial reproduction techniques (ART) may increase the basal rate of DNA damage. Unfortunately, the mechanisms and processes involved in Sperm DNA Fragmentation (SDF) are not fully illuminated. The main aim of this investigation was to analyse the influence of swim-up on the evolution of sperm DNA fragmentation values over time, emulating the experiment within the same set-up of sperm handling as used for insemination and to evaluate whether the degree of sperm DNA fragmentation as well the evolution over time can predict IUI outcome. Material and methods: Semen samples were obtained from couples undergoing IUI (only one cycle per couple was included) for infertility treatment at the Clinica Tambre in Madrid, Spain. A total of 25 males provided 25 samples that were analysed. SDF fragmentation was assessed using the sperm chromatin dispersion (SCD) test using the Halosperm kit (Halotech DNA, Madrid). Statistical analysis was performed using T-Student and regression analysis . Results: Mean values of DNA fragmentation in the spermatozoa prepared by swim-up are lower than before selection in all times studied. Conclusion: The results of this study support the notion that the swim-up technique, as practised in our laboratory, does no induce DNA damage to human spermatozoa, as assessed by SCD assay. We therefore propose that sperm samples be used before an hour after processing in intrauterine insemination (AU)