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Genetics ; 175(3): 1505-31, 2007 Mar.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-17194782

RESUMO

Metazoan physiology depends on intricate patterns of gene expression that remain poorly known. Using transposon mutagenesis in Drosophila, we constructed a library of 7404 protein trap and enhancer trap lines, the Carnegie collection, to facilitate gene expression mapping at single-cell resolution. By sequencing the genomic insertion sites, determining splicing patterns downstream of the enhanced green fluorescent protein (EGFP) exon, and analyzing expression patterns in the ovary and salivary gland, we found that 600-900 different genes are trapped in our collection. A core set of 244 lines trapped different identifiable protein isoforms, while insertions likely to act as GFP-enhancer traps were found in 256 additional genes. At least 8 novel genes were also identified. Our results demonstrate that the Carnegie collection will be useful as a discovery tool in diverse areas of cell and developmental biology and suggest new strategies for greatly increasing the coverage of the Drosophila proteome with protein trap insertions.


Assuntos
Proteínas de Drosophila/genética , Drosophila/genética , Regulação da Expressão Gênica no Desenvolvimento , Biblioteca Gênica , Genes de Insetos/genética , Animais , Sequência de Bases , Primers do DNA , Elementos de DNA Transponíveis/genética , Proteínas de Drosophila/metabolismo , Feminino , Perfilação da Expressão Gênica/métodos , Proteínas de Fluorescência Verde/metabolismo , Dados de Sequência Molecular , Mutagênese , Ovário/metabolismo , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Glândulas Salivares/metabolismo , Análise de Sequência de DNA
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