RESUMO
Background: Blackleg is an acute and often fatal infection in bovine caused by the bacterium Clostridium chauvoei. The absence of conclusive diagnosis of blackleg usually occurs due to absence of practical and economical methods to send samples to microbiology laboratory. The goal of this work was to verify the possibility of using ordinary fi lter paper as a practical and economically feasible method for collecting, storing and shipping material to the laboratory to be used in a rapid and direct PCR approach to detect Clostridium chauvoei DNA.Materials, Methods & Results: The PCR technique for the diagnosis of blackleg from common fi lter paper was tested for specifi city, sensitivity and feasibility. To test the specifi city, the papers were impregnated with a suspension of the following microorganisms: C. chauvoei, C. perfringens, C. septicum, Bacillus anthracis, Staphylococcus aureus, and Escherichia coli. To test the sensitivity different concentration of C. chauvoei (ATCC 10092) were pipetted on common fi lter paper. To both test, DNA extraction of impregnated ordinary fi lter paper and their respective controls followed the method previously described and tested under different storage times (0 h, 24 h, 72 h and a week later). To test the feasibility, 12 bovine livers were collected and tissues samples were impregnate on common fi lter paper with suspension of C. cha
Background: Blackleg is an acute and often fatal infection in bovine caused by the bacterium Clostridium chauvoei. The absence of conclusive diagnosis of blackleg usually occurs due to absence of practical and economical methods to send samples to microbiology laboratory. The goal of this work was to verify the possibility of using ordinary fi lter paper as a practical and economically feasible method for collecting, storing and shipping material to the laboratory to be used in a rapid and direct PCR approach to detect Clostridium chauvoei DNA.Materials, Methods & Results: The PCR technique for the diagnosis of blackleg from common fi lter paper was tested for specifi city, sensitivity and feasibility. To test the specifi city, the papers were impregnated with a suspension of the following microorganisms: C. chauvoei, C. perfringens, C. septicum, Bacillus anthracis, Staphylococcus aureus, and Escherichia coli. To test the sensitivity different concentration of C. chauvoei (ATCC 10092) were pipetted on common fi lter paper. To both test, DNA extraction of impregnated ordinary fi lter paper and their respective controls followed the method previously described and tested under different storage times (0 h, 24 h, 72 h and a week later). To test the feasibility, 12 bovine livers were collected and tissues samples were impregnate on common fi lter paper with suspension of C. cha
RESUMO
Background: Blackleg is an acute and often fatal infection in bovine caused by the bacterium Clostridium chauvoei. The absence of conclusive diagnosis of blackleg usually occurs due to absence of practical and economical methods to send samples to microbiology laboratory. The goal of this work was to verify the possibility of using ordinary fi lter paper as a practical and economically feasible method for collecting, storing and shipping material to the laboratory to be used in a rapid and direct PCR approach to detect Clostridium chauvoei DNA.Materials, Methods & Results: The PCR technique for the diagnosis of blackleg from common fi lter paper was tested for specifi city, sensitivity and feasibility. To test the specifi city, the papers were impregnated with a suspension of the following microorganisms: C. chauvoei, C. perfringens, C. septicum, Bacillus anthracis, Staphylococcus aureus, and Escherichia coli. To test the sensitivity different concentration of C. chauvoei (ATCC 10092) were pipetted on common fi lter paper. To both test, DNA extraction of impregnated ordinary fi lter paper and their respective controls followed the method previously described and tested under different storage times (0 h, 24 h, 72 h and a week later). To test the feasibility, 12 bovine livers were collected and tissues samples were impregnate on common fi lter paper with suspension of C. cha
Background: Blackleg is an acute and often fatal infection in bovine caused by the bacterium Clostridium chauvoei. The absence of conclusive diagnosis of blackleg usually occurs due to absence of practical and economical methods to send samples to microbiology laboratory. The goal of this work was to verify the possibility of using ordinary fi lter paper as a practical and economically feasible method for collecting, storing and shipping material to the laboratory to be used in a rapid and direct PCR approach to detect Clostridium chauvoei DNA.Materials, Methods & Results: The PCR technique for the diagnosis of blackleg from common fi lter paper was tested for specifi city, sensitivity and feasibility. To test the specifi city, the papers were impregnated with a suspension of the following microorganisms: C. chauvoei, C. perfringens, C. septicum, Bacillus anthracis, Staphylococcus aureus, and Escherichia coli. To test the sensitivity different concentration of C. chauvoei (ATCC 10092) were pipetted on common fi lter paper. To both test, DNA extraction of impregnated ordinary fi lter paper and their respective controls followed the method previously described and tested under different storage times (0 h, 24 h, 72 h and a week later). To test the feasibility, 12 bovine livers were collected and tissues samples were impregnate on common fi lter paper with suspension of C. cha
RESUMO
Horse Strangles appears frequently in animals vaccinated with commercial bacterins in Rio Grande do Sul, Brazil. Aiming to know the antigenic relationships of strains recovered from sick animals among them and with two vaccines profusely used in the state, bilateral cross reactivity indices (CRI) were estimated. In addition, the immunogenicity of vaccines prepared with field isolates and commercial vaccines was tested in mice. Antibody titers were measured by ELISA and expressed as seroconversions. Thirteen strains of Streptococcus equi subsp. equi, nine classified biochemically as typical and other four as atypical strains, were recovered from 35 sick horses belonging to 10 herds of Rio Grande do Sul, Brazil. The strains recovered from sick horses showed very close CRI, suggesting antigenic homogeneity among them, but not with the vaccinal strains. A vaccine produced with an atypical strain induced the highest seroconversion, 9.4, while two produced with typical strains were poorly-immunogenic. The commercial vaccines were less immunogenic than five and four vaccines produced with field strains, inducing seroconversions of 2.6 and 3.8, respectively.
A Adenite Eqüina é freqüente em animais vacinados com bacterinas comerciais no Rio Grande do Sul. Com o objetivo de determinar as relações antigênicas entre cepas isoladas de casos clínicos e duas vacinas amplamente utilizadas no Estado, foram determinados os índices de reatividade cruzada bilateral (IRC) entre elas. Também foi determinada a imunogenicidade em camundongos de vacinas preparadas com cepas de campo e de vacinas comerciais. Os títulos de anticorpos foram determinados por ELISA e expressos como soroconversão. Foram isoladas 13 cepas de Streptococcus equi subsp. equi de 35 casos clínicos de Adenite Eqüina em 10 diferentes rebanhos do Rio Grande do Sul, Brasil, das quais nove foram classificadas bioquimicamente como típicas e outras quatro como atípicas. As cepas de campo apresentaram elevada reatividade cruzada, sugerindo homogeneidade antigênica entre elas, mas não com as cepas vacinais. Uma vacina produzida com cepa atípica induziu soroconversão de 9.4, enquanto duas vacinas produzidas com cepas típicas foram pouco imunogênicas. As vacinas comerciais induziram soroconversões de 2.6 e 3.8, menores que quatro e cinco vacinas produzidas com cepas de campo, respectivamente.
RESUMO
Strangles is a contagious disease of the respiratory tract of horses produced by Streptococcus equi subsp. equi, a Lancefield's group C haemolytic bacterium. It produces a mucopurulent secretion of the anterior airways, as well as lymphadenitis and abscesses. The bacteria synthesizes several pathogenicity factors such a hyaluronic acid capsule, hyaluronidase, streptolisin O, streptokinase, IgG Fc receptors, peptidoglican and protein M. Among these factors, protein M deserves special importance due to its antifagocitic and adherence properties. The disease has high morbidity and low lethality, and produces economic losses due to low performance and treatment. Clinical diagnosis and treatment are done easily, but prophylaxis is hampered by the low potency of vaccines, that protect around 50 % of vaccinated animals. Strangles may occur during all the year, but cold and humid weather favors the survival of streptococci, making animals that live in regions with those characteristics more prone to infection. New vaccines using purified or subunit antigens have been developed aiming to increase their potency and to avoid undesirable side effects. The demonstration that bacteria strains show differences in their antigenicity, called attention on the selection of appropriate strains to use as antigens.
A adenite equina, também conhecida como garrotilho, é uma enfermidade bacteriana contagiosa, causada por Streptococcus equi, subsp. equi, bactéria hemolítica do grupo C de Lancefield, que afeta o trato respiratório anterior de equinos de todas as idades, com maior prevalência entre um e cinco anos de idade. Caracteriza-se por produzir secreção mucopurulenta das vias aéreas anteriores e linfadenite dos gânglios retrofaríngeos e submandibulares com formação de abscessos. Fatores de virulência de S. equi, subsp. equi, incluem cápsula de ácido hialurônico, hialuronidase, estreptolisina O, estreptoquinase, receptores para Fc de IgG, peptidoglicano e proteína M. Dentre esses fatores, a proteína M tem especial importância por ser de membrana com propriedades antifagocitárias e de aderência. A doença tem baixa letalidade e alta morbidade e seus prejuízos econômicos devem-se à perda de performance e custo do tratamento. O diagnóstico clínico e o tratamento não apresentam dificuldades, mas a profilaxia é prejudicada pela baixa eficiência das vacinas disponíveis, com índices de proteção de 50%. O garrotilho pode ocorrer em todas as épocas do ano, mas o frio e a umidade facilitam a sobrevivência do agente e sua disseminação, portanto animais que vivem nos estados mais frios e úmidos do país são mais vulneráveis à infecção. Novas vacinas utilizando antígenos purificados ou de subunidades estão sendo desenvolvidas com a finalidade de incrementar sua potência e evitar efeitos indesejáveis. A comprovação de diferenças de antigenicidade, entre estirpes, alerta sobre a importância da seleção apropriada das cepas vacinais.
RESUMO
Horse Strangles appears frequently in animals vaccinated with commercial bacterins in Rio Grande do Sul, Brazil. Aiming to know the antigenic relationships of strains recovered from sick animals among them and with two vaccines profusely used in the state, bilateral cross reactivity indices (CRI) were estimated. In addition, the immunogenicity of vaccines prepared with field isolates and commercial vaccines was tested in mice. Antibody titers were measured by ELISA and expressed as seroconversions. Thirteen strains of Streptococcus equi subsp. equi, nine classified biochemically as typical and other four as atypical strains, were recovered from 35 sick horses belonging to 10 herds of Rio Grande do Sul, Brazil. The strains recovered from sick horses showed very close CRI, suggesting antigenic homogeneity among them, but not with the vaccinal strains. A vaccine produced with an atypical strain induced the highest seroconversion, 9.4, while two produced with typical strains were poorly-immunogenic. The commercial vaccines were less immunogenic than five and four vaccines produced with field strains, inducing seroconversions of 2.6 and 3.8, respectively.
A Adenite Eqüina é freqüente em animais vacinados com bacterinas comerciais no Rio Grande do Sul. Com o objetivo de determinar as relações antigênicas entre cepas isoladas de casos clínicos e duas vacinas amplamente utilizadas no Estado, foram determinados os índices de reatividade cruzada bilateral (IRC) entre elas. Também foi determinada a imunogenicidade em camundongos de vacinas preparadas com cepas de campo e de vacinas comerciais. Os títulos de anticorpos foram determinados por ELISA e expressos como soroconversão. Foram isoladas 13 cepas de Streptococcus equi subsp. equi de 35 casos clínicos de Adenite Eqüina em 10 diferentes rebanhos do Rio Grande do Sul, Brasil, das quais nove foram classificadas bioquimicamente como típicas e outras quatro como atípicas. As cepas de campo apresentaram elevada reatividade cruzada, sugerindo homogeneidade antigênica entre elas, mas não com as cepas vacinais. Uma vacina produzida com cepa atípica induziu soroconversão de 9.4, enquanto duas vacinas produzidas com cepas típicas foram pouco imunogênicas. As vacinas comerciais induziram soroconversões de 2.6 e 3.8, menores que quatro e cinco vacinas produzidas com cepas de campo, respectivamente.
RESUMO
Horse Strangles appears frequently in animals vaccinated with commercial bacterins in Rio Grande do Sul, Brazil. Aiming to know the antigenic relationships of strains recovered from sick animals among them and with two vaccines profusely used in the state, bilateral cross reactivity indices (CRI) were estimated. In addition, the immunogenicity of vaccines prepared with field isolates and commercial vaccines was tested in mice. Antibody titers were measured by ELISA and expressed as seroconversions. Thirteen strains of Streptococcus equi subsp. equi, nine classified biochemically as typical and other four as atypical strains, were recovered from 35 sick horses belonging to 10 herds of Rio Grande do Sul, Brazil. The strains recovered from sick horses showed very close CRI, suggesting antigenic homogeneity among them, but not with the vaccinal strains. A vaccine produced with an atypical strain induced the highest seroconversion, 9.4, while two produced with typical strains were poorly-immunogenic. The commercial vaccines were less immunogenic than five and four vaccines produced with field strains, inducing seroconversions of 2.6 and 3.8, respectively.
A Adenite Eqüina é freqüente em animais vacinados com bacterinas comerciais no Rio Grande do Sul. Com o objetivo de determinar as relações antigênicas entre cepas isoladas de casos clínicos e duas vacinas amplamente utilizadas no Estado, foram determinados os índices de reatividade cruzada bilateral (IRC) entre elas. Também foi determinada a imunogenicidade em camundongos de vacinas preparadas com cepas de campo e de vacinas comerciais. Os títulos de anticorpos foram determinados por ELISA e expressos como soroconversão. Foram isoladas 13 cepas de Streptococcus equi subsp. equi de 35 casos clínicos de Adenite Eqüina em 10 diferentes rebanhos do Rio Grande do Sul, Brasil, das quais nove foram classificadas bioquimicamente como típicas e outras quatro como atípicas. As cepas de campo apresentaram elevada reatividade cruzada, sugerindo homogeneidade antigênica entre elas, mas não com as cepas vacinais. Uma vacina produzida com cepa atípica induziu soroconversão de 9.4, enquanto duas vacinas produzidas com cepas típicas foram pouco imunogênicas. As vacinas comerciais induziram soroconversões de 2.6 e 3.8, menores que quatro e cinco vacinas produzidas com cepas de campo, respectivamente.
RESUMO
Strangles is a contagious disease of the respiratory tract of horses produced by Streptococcus equi subsp. equi, a Lancefield's group C haemolytic bacterium. It produces a mucopurulent secretion of the anterior airways, as well as lymphadenitis and abscesses. The bacteria synthesizes several pathogenicity factors such a hyaluronic acid capsule, hyaluronidase, streptolisin O, streptokinase, IgG Fc receptors, peptidoglican and protein M. Among these factors, protein M deserves special importance due to its antifagocitic and adherence properties. The disease has high morbidity and low lethality, and produces economic losses due to low performance and treatment. Clinical diagnosis and treatment are done easily, but prophylaxis is hampered by the low potency of vaccines, that protect around 50 % of vaccinated animals. Strangles may occur during all the year, but cold and humid weather favors the survival of streptococci, making animals that live in regions with those characteristics more prone to infection. New vaccines using purified or subunit antigens have been developed aiming to increase their potency and to avoid undesirable side effects. The demonstration that bacteria strains show differences in their antigenicity, called attention on the selection of appropriate strains to use as antigens.
A adenite equina, também conhecida como garrotilho, é uma enfermidade bacteriana contagiosa, causada por Streptococcus equi, subsp. equi, bactéria hemolítica do grupo C de Lancefield, que afeta o trato respiratório anterior de equinos de todas as idades, com maior prevalência entre um e cinco anos de idade. Caracteriza-se por produzir secreção mucopurulenta das vias aéreas anteriores e linfadenite dos gânglios retrofaríngeos e submandibulares com formação de abscessos. Fatores de virulência de S. equi, subsp. equi, incluem cápsula de ácido hialurônico, hialuronidase, estreptolisina O, estreptoquinase, receptores para Fc de IgG, peptidoglicano e proteína M. Dentre esses fatores, a proteína M tem especial importância por ser de membrana com propriedades antifagocitárias e de aderência. A doença tem baixa letalidade e alta morbidade e seus prejuízos econômicos devem-se à perda de performance e custo do tratamento. O diagnóstico clínico e o tratamento não apresentam dificuldades, mas a profilaxia é prejudicada pela baixa eficiência das vacinas disponíveis, com índices de proteção de 50%. O garrotilho pode ocorrer em todas as épocas do ano, mas o frio e a umidade facilitam a sobrevivência do agente e sua disseminação, portanto animais que vivem nos estados mais frios e úmidos do país são mais vulneráveis à infecção. Novas vacinas utilizando antígenos purificados ou de subunidades estão sendo desenvolvidas com a finalidade de incrementar sua potência e evitar efeitos indesejáveis. A comprovação de diferenças de antigenicidade, entre estirpes, alerta sobre a importância da seleção apropriada das cepas vacinais.
RESUMO
Pasteurella multocida é um cocobacilo Gram negativo encapsulado que faz parte da microbiota de gatos, cães e outros animais domésticos e selvagens, nos quais pode causar principalmente pneumonia e septicemia. É transmitido ao ser humano pela mordida de animais, especialmente gatos. Este microrganismo provoca infecções de pele e tecidos adjacentes ao local da inoculação, podendo alcançar a corrente sangüínea e se disseminar pelo organismo. Em maio de 2004, na cidade de Santa Maria-RS, uma mulher sadia foi mordida no dedo indicador direito por seu gato. Após 24 horas, o braço apresentou-se hiperêmico e dolorido, com elevação da temperatura e edema no local da mordida. Passadas 48 horas, os sintomas permaneciam e surgiu uma pústula no local na mordida. Realizou-se coleta da secreção da pústula e semeadura em placas de ágar sangue ovino 5%, ágar colúmbia e caldo BHI. Com 24 h de incubação observou-se o crescimento de colônias grandes, acinzentadas, não hemolíticas, que apresentavam morfologia de cocobacilos gram negativos, e bioquimismo de Pasteurella multocida, confirmando a suspeita clínica. O teste de sensibilidade in vitro? aos antimicrobianos realizado foi condizente com o tratamento clínico recomendado amoxicilina + ácido clavulânico (500/125 mg três vezes ao dia) associada à pomada de fibrinolisina, desoxirribonuclease e sulfato de gentamicina, para uso tópico. Após 16 hora
RESUMO
Pasteurella multocida é um cocobacilo Gram negativo encapsulado que faz parte da microbiota de gatos, cães e outros animais domésticos e selvagens, nos quais pode causar principalmente pneumonia e septicemia. É transmitido ao ser humano pela mordida de animais, especialmente gatos. Este microrganismo provoca infecções de pele e tecidos adjacentes ao local da inoculação, podendo alcançar a corrente sangüínea e se disseminar pelo organismo. Em maio de 2004, na cidade de Santa Maria-RS, uma mulher sadia foi mordida no dedo indicador direito por seu gato. Após 24 horas, o braço apresentou-se hiperêmico e dolorido, com elevação da temperatura e edema no local da mordida. Passadas 48 horas, os sintomas permaneciam e surgiu uma pústula no local na mordida. Realizou-se coleta da secreção da pústula e semeadura em placas de ágar sangue ovino 5%, ágar colúmbia e caldo BHI. Com 24 h de incubação observou-se o crescimento de colônias grandes, acinzentadas, não hemolíticas, que apresentavam morfologia de cocobacilos gram negativos, e bioquimismo de Pasteurella multocida, confirmando a suspeita clínica. O teste de sensibilidade in vitro? aos antimicrobianos realizado foi condizente com o tratamento clínico recomendado amoxicilina + ácido clavulânico (500/125 mg três vezes ao dia) associada à pomada de fibrinolisina, desoxirribonuclease e sulfato de gentamicina, para uso tópico. Após 16 hora
RESUMO
Colibacillosis is an enteric disease with a major impact to the swine industry and is caused by enterotoxigenic strains of Escherichia coli. Forty clinical isolates from pigs with diarrhea and 13 environmental isolates were analysed regarding their genotypic profile, genetic relationship and antibiotic resistance. The most prevalent gene was Stb, identified in 50% of the isolates from clinical cases, and Sta and Lt were detected in 35% of them. Among the adesine factors investigated, F18 was found in 27.5% of the E. coli strains. The ERIC-PCR technique used for epidemiological characterization of the isolates did not show the expected discriminatory power. However, the test allowed separation of the isolates in groups, but did not evidence groups related to virulence factors. In the susceptibility test, the highest values for resistance were to tetracycline, in 88.6%. The index of multiple resistance to antimicrobials varied from 0 to 0.69.
A colibacilose é a enfermidade entérica de maior impacto na suinocultura, sendo ocasionada por cepas enterotoxigênicas de Escherichia coli. Quarenta isolados clínicos de suínos com diarréia e 13 isolados ambientais foram analisados quanto ao perfil genotípico, relação genética e resistência antimicrobiana. O gene que codifica para a toxina Stb foi identificado em 50% dos isolados clínicos, seguido por Sta e Lt, com 35%. Dentre os fatores de adesinas pesquisados, a F18 foi encontrada em 27,5% das amostras. A técnica de ERIC-PCR utilizada para caracterização epidemiológica dos isolados, não demonstrou poder discriminatório esperado, e apesar de permitir a separação dos isolados em grupos, estes não evidenciaram grupos relacionados aos fatores de virulência. No teste de susceptibilidade antimicrobiana a maior resistência foi observada à tetraciclina, em 88,6%. O índice de resistência múltipla aos antimicrobianos (IRMA), variou entre 0 a 0,69.